硫唑嘌呤在乙醇溶液中的溶解度

蒋茜

（昭通市疾病预防控制中心，云南昭通 657000）

硫唑嘌呤是6-硫基嘌呤的咪唑衍生物，化学名为6-(1-甲基-4-硝基咪唑-5-硫基)嘌呤，又叫依米兰或依木兰，为淡黄色粉末或结晶性粉末，味微苦。硫唑嘌呤在乙醇溶液中微溶[1]，在水中几乎不溶，在稀氨溶液中易溶。

硫唑嘌呤可作为免疫抑制药[2]、抗肿瘤药，在体内分解为药效成分巯嘌呤，主要用于抑制同种异体移植的免疫排斥反应。硫唑嘌呤可导致骨髓抑制、肝功能损伤，大剂量用药后可能会导致粒细胞减少，造成再生障碍性贫血。燃烧后产生有毒气体，应放置于通风、低温、干燥处。

硫唑嘌呤具有很高的医用价值，通过对硫唑嘌呤在乙醇溶液中的溶解度研究，可指导相关药物临床使用；另外，在生产硫唑嘌呤药品时，利用其在乙醇溶液中的溶解度规律，可找到更适合硫唑嘌呤分离提纯的生产条件。

1 材料与方法

1.1 实验原理

硫唑嘌呤在不同温度和不同配比的乙醇溶液中溶解度不同，根据高效液相色谱仪测出的溶解度值，确定硫唑嘌呤在乙醇溶液中溶解度的变化规律。

1.2 试剂与仪器

无水乙醇，分析纯，重庆川东化工（集团）有限公司；甲醇，光谱纯，Merck；硫唑嘌呤标准品，100197，中国食品药品检定研究院。

Waters 2998高效液相色谱仪，配备PDA检测器，美国Waters公司；SK5200H型台式超声波清洗器，上海科导超声仪器有限公司；AS-01型真空泵，北京优晟联合科技有限公司；CPA2245型电子天平（Max 220 g，d=0.1 mg），德国Sartorius公司；THD-2020型低温恒温槽，上海沪粤明科学仪器有限公司；800B型离心机，上海安亭科学仪器厂。

1.3 色谱条件

色谱柱：Sun Fire™ C8（4.6 mm×250 mm，5 μm）；流动相：甲醇-水溶液（体积比为35∶65）；检测波长：300 nm[3]；流速：1.0 mL/min；检测温度：室温。在上述色谱条件下，硫唑嘌呤的保留时间为5.68 min。

1.4 标准曲线绘制

准确称取硫唑嘌呤0.010 0 g，用无水乙醇配成浓度为0.100 0 g/L的100 mL标准溶液待用。用带过滤头的注射器取1 mL标准溶液至进样瓶中，进行HPLC测定，进样体积依次为 0.1 μL、0.2 μL、0.3 μL、0.5 μL、1.0 μL、5.0 μL、10.0 μL、20.0 μL 和30.0 μL。横坐标为样品含量（μg），纵坐标为峰面积，回归方程为Y=929X-547 0，R2=0.999 4。

1.5 样品前处理

用精确度为0.1 mL的移液管配制二元混合溶剂，该溶剂中乙醇的摩尔分数分别为0.0～1.0（梯度0.1）。将配好的溶剂装入15 cm3的带盖离心管中，分别加入适量硫唑嘌呤粉末，200 W超声20 min使其充分溶解，且离心管中有剩余粉末；再用离心机3 000 r/min离心2 min，将离心后的溶液放置在温度精度为±0.05 ℃的恒温水浴中，温度为283.15～323.15 K（梯度10.0 K），恒温24 h，确保固液平衡[4]。在相应温度下预热一次性注射器，从上层清液中取出0.1～0.5 mL的样品，并用硅胶将注射器针头封住，用差减法称重，将液体快速放入10 mL容量瓶中，用无水乙醇定容，摇匀，得到样品溶液。进样量10 μL，按照1.3项下条件进行检测，按照1.4项下标准曲线计算硫唑嘌呤含量。

2 结果与分析

2.1 不同温度和溶剂浓度下硫唑嘌呤溶解度

实验测得硫唑嘌呤在不同温度、不同浓度乙醇溶液中的溶解度见表1。硫唑嘌呤的溶解度呈现一定规律：同一温度条件下，随着乙醇浓度升高，溶解度不断升高，当乙醇溶液的摩尔分数为0.4～0.6时，溶解度达到最大值，浓度继续升高，溶解度下降；当乙醇浓度保持不变，在实验范围内随温度升高，溶解度逐渐增大。

表1 硫唑嘌呤在不同温度、不同浓度乙醇中的溶解度

2.2 经验方程

根据温度的多项式经验方程[5]，溶解度计算公式如（1）所示：

式中，X1为溶解度，mg/100 g；T为绝对温度，K；a、b、c为参数。通过（1）式对硫唑嘌呤在一定温度范围内所对应的体系中的溶解度数据进行拟合，数据列于表2（表2所得经验方程的X1应×10-5）。均方根（RMSD）数值极小，说明方程拟合效果良好。

表2 实验数据关联得到的经验方程参数

3 结论

通过本实验，可以发现硫唑嘌呤在不同温度下不同摩尔分数的乙醇溶液中的溶解度呈现一定的规律性。在一定浓度的乙醇溶液中，当温度从283.15 K升至323.15 K，硫唑嘌呤的溶解度随之升高；在一定的温度条件下，当乙醇溶液摩尔分数逐渐升高时，溶解度随之升高，摩尔分数在0.4～0.6时溶解度最大，摩尔分数继续升高，溶解度反而下降；根据测定数据进行了方程拟合，拟合度良好，可用于计算一定温度下硫唑嘌呤在不同浓度乙醇溶液中的溶解度。