胸腔积液的细胞学检查进展

苏梅芬

钦州市第二人民医院 广西 钦州 535000

胸腔积液是临床相关疾病常见症状，如炎症性疾病、结缔组织病、良、恶性肿瘤等，主要指以胸膜腔内病理性液积聚为特征的一种常见临床症候，临床症状主要表现为胸闷、呼吸困难等，临床按照其发生机制可分为漏出性胸腔积液及渗出性胸腔积液[1]。正常人的胸膜内会含有3～15ml液体，主要在呼吸时起到润滑作用，液体的滤出与吸收之间呈现动态平衡，患病后可使液体滤出与吸收失衡，病理性液体量增加，最终形成胸腔积液[2]。分析临床研究报道发现[3]，目前临床的胸腔积液患者中约有20%由肿瘤发展造成。而随着近几年来多种恶性肿瘤及结核性疾病发病率的增加，胸腔积液在疾病诊断、鉴别及疾病治疗、预后等多方面具有重要诊断价值，而临床可应用于胸腔积液检查中的方式较为广泛，主要包含了细胞学、生化学及分子生物学等，其中临床认为细胞学为胸腔积液的诊断金标准，包括苏木精-伊红染色法、沉渣涂片细胞化学染色、荧光染色、核仁组成区嗜银蛋白染色等染色方法。本文现针对胸腔积液的细胞学检查进展进行分析，主要综述内容如下。

1．胸腔积液的发生机制

胸膜腔是指由脏、壁两层胸膜在左右两肺周围围成的一个完全封闭的潜在性腔隙，腔内含有少量浆液，正常含量为3～15ml，主要在呼吸运动时起到润滑作用，正常人每24h可形成及吸收约500～1000ml的液体，胸膜腔内液体自毛细血管的静脉端再吸收，其余液体自淋巴系统回收至血液，液体的滤过及吸收处于动态平衡状态，此时若机产生全身或局部病变，病理变化可破坏液体滤过及吸收之间的动态平衡状态，从而使胸膜腔内液体出现形成过快或吸收过缓，最终形成胸腔积液[4]。

2．细胞学检查的概述及原理

细胞学检查是临床应用较为广泛的一种检查方式，具有取材方便、创伤小、操作快捷的优点，是目前临床检测胸腔积液肿瘤细胞分析方法的首要选择，通过收集脱落的细胞，将细胞经离心收集沉淀后制片等一系列操作后，在显微镜下观察细胞形态，从而进行疾病的诊断工作[5]。当患者胸腔内器官和胸膜发生炎症、肿瘤等病理变化时，胸膜腔液的分泌增多形成胸腔积液，同时胸膜间皮细胞大量脱落，当肿瘤穿破脏器表面间皮直接暴露在胸膜腔内后，恶性肿瘤细胞可脱水落在胸腔积液中，因此通过采用细胞学检查对胸腔积液进行分析可获得特异性结果。临床研究表明[6]，胸腔积液细胞学检查的灵敏度在40%～87%之间。

3．细胞学检查不同染色方式的应用效果

3.1 苏木精-伊红染色法

苏木精-伊红染色法主要用于对细胞组织进行染色，简称HE染色，其检验原理为细胞中的细胞核主要组成成分为酸性物质，与碱性染料如苏木精之间具有较强的亲和力，而细胞浆则与细胞核相反，细胞浆中所含的碱性物质与酸性染料如伊红之间具有较强亲和力，因此细胞或组织切片经苏木精-伊红染色液染色后，可通过观察细胞核和细胞质的染色变化和细微结构来分析是否可能为瘤细胞[7]。临床研究表明[8]，采用苏木精-伊红染色法瘤细胞检出率为39%。目前临床学者针对苏木精-伊红染色液在恶性细胞检出中的应用方式不断进行研究，使瘤细胞检出率不断增长。临床学者采用脑脊液细胞玻片离心沉淀器收集器对患者胸腔积液内细胞进行收集[9]，结果显示细胞收集率高达80%，检出率可高达93%。同时另一位学者将积液送检量增加至250ml，取新鲜下层积液离心涂片染色，可使瘤细胞首次检出率提高至83%，而三次以上检出率可高达100%[10]。

3.2 沉渣涂片细胞化学染色

沉渣涂片细胞化学染色是基于细胞学及化学相结合的一种检查方法，以细胞形态学为基础，运用化学的原理对胸腔积液内的细胞进行定性、定位及半定量分析，常见方法包括过氧化物酶染色、苏丹黑B染色、糖原染色、碱性磷酸酶染色、特异性脂酶染色、非特异性脂酶染色及酸性磷酸酶染色等[11]。采用沉渣涂片细胞化学染色法进行胸腔积液检查时，若积液存在恶性瘤细胞，检查结果可显示为过氧化物酶染色及苏丹黑B染色结果为阴性，而糖原染色、碱性磷酸酶染色、特异性脂酶染色、非特异性脂酶染色及酸性磷酸酶染色等结果为阳性[12]。

3.3 荧光染色

荧光染色是临床较为常见的一种抗酸染色方法，以荧光染料为初染液，盐酸乙醇为脱色剂，高锰酸钾为复染液，染色后采用荧光显微镜进行观察，若细胞浆及核仁内含有大量的RNA，染色后细胞颜色为桔红或火焰色荧光，若细胞核中含有大量的DNA则为黄绿色荧光[13]。临床研究报道显示[14]，采用荧光染色进行检查恶性胸腔积液，阳性率为78%，假阳性率为14%。

3.4 核仁组成区嗜银蛋白染色

核仁组成区是染色体上的一个编码核糖体RNA片段，存在于DNA特异性环上，图像核仁，而核仁组成区嗜银蛋白染色法可确定组织切片上的核仁组成区，显示与核仁组成区有关的酸性蛋白，具有操作简便、批量染色的优点[15]。临床学者采用核仁组成区嗜银蛋白染色法进行良恶性胸腔积液鉴别[16]，结果显示，良性胸腔积液中淋巴细胞、间皮细胞及非典型增生间皮细胞中的银染色NOR相关蛋白核颗粒小于1.98个，其中87%为规则小圆形；恶性胸腔积液中瘤细胞银染色NOR相关蛋白核颗粒大于4.98个，其中82%为不规则及弥散分布型颗粒。另一学者经过研究发现[17]，在恶性胸腔积液检查中，采用核仁组成区嗜银染色诊断敏感性为75%，特异性为87%。

4．细胞学在胸腔积液检查中的优缺点

优点：①细胞学能够根据细胞大小、形态，细胞核大小、形态、核染色质及细胞浆内所含内容物，细胞排列形式等特点进行诊断，因此在胸腔积液检查中应用细胞学进行诊断可有效提高临床诊断准确率，对良恶性肿瘤鉴别具有重要价值。②具有操作简单、患者接受度高、安全无创或微创、可重复进行检查的优点。③由于操作简单，因此便于临床进行大规模人口健康筛查，同时具有较为广泛的取材范围，因此在早期肿瘤诊断中具有较高的准确率。缺点：①取材较少可导致一定程度的假阴性；②对组织学结构观察不满意，无法准确对肿瘤进行分类与分型；③无法准确的判定肿瘤的原发病灶和浸润情况[18]。

5．小结

细胞学检查是临床公认的胸腔积液诊断金标准，通过对胸腔积液内恶性细胞进行检查，从而进行相关疾病的诊断及鉴别，并在疾病的治疗及预后方面具有重要价值。目前临床常见的染色方法包括苏木精-伊红染色法、沉渣涂片细胞化学染色、荧光染色、核仁组成区嗜银蛋白染色等，在胸腔积液的细胞学检查中均具有较高价值。同时随着医疗技术的不断进步，临床学者也针对上述染色方法不断进行完善及优化，因此，细胞学检查在胸腔积液中具有良好的应用价值，且随着医疗技术不断发展，其染色方式逐渐多样化，诊断准确率也不断提高。