解酒颗粒对急性醉酒小鼠的解酒保肝作用研究*

白佳萌 赵世豪 闫梓喆 何欣 严亚锋

(陕西中医药大学，陕西 咸阳 712046)

过量饮酒危害健康，特别是长期大量饮酒严重损害肝脏、胃、心、胰腺等脏器[1-3]。目前市场上解酒保肝类产品较多[4]，中医药在解酒保肝方面有其独特的优势[5-6]，寻求开发中医药解酒保肝产品意义重大。解酒颗粒是指导老师严亚锋副教授在中医药理论的指导下，从药食两用中药中遴选出具有解酒保肝护胃作用的4味中药葛根、枳椇子、鸡内金和甘草，经现代制药工艺制成的颗粒剂。本研究通过动物实验，探讨解酒颗粒的解酒保肝作用，为其开发应用提供实验依据。

1 仪器与材料

1.1仪器 IKA组织匀浆仪(德国IKA公司)；TGL-16M型低温离心机(湖南湘仪离心机仪器有限公司)；BK-200VET全自动生化分析仪(山东博科生物产业有限公司)；ElX800酶标仪(美国Bio Tek)。

1.2试药 解酒颗粒，自制，规格15 g·袋-1，批号：220301。海王牌金樽片，购自深圳市海王健康科技发展有限公司，规格1.0 g·片-1，批号：20210204。56°红星二锅头白酒，购自北京红星股份有限公司，规格500 mL，批号：20210525。乙醇测试盒(货号：E036-1-1)、谷丙转氨酶(ALT)测试盒(货号：C009-2-1)、谷草转氨酶(AST)测试盒(货号：C010-2-1)、乙醇脱氢酶 (ADH) 测试盒(货号：A083-2)、乙醛脱氢酶 (ALDH)测试盒(货号：A075-1-1)、超氧化物歧化酶(SOD)测试盒(货号：A001-3-2)，均购自南京建成生物工程研究所。

1.3实验动物 SPF级KM小鼠160只，体重(30±2)g，雄性，由成都达硕实验动物有限公司提供，生产许可证号：SCXK(川)2020-030，合格证号：0043677。所有大鼠均分笼给予标准饲料适应性喂养一周，室温(22±2)℃，自由饮水进食。

2 方法

2.1药品配制 分别取解酒颗粒15 g、30 g、60 g，分别加80℃的热水溶解，即得解酒颗粒低、中、高剂量组的溶液。取金樽片细粉7.5 g，加水溶解，即得金樽片组溶液。

2.2小鼠急性醉酒模型的建立 随机取禁食不禁水12 h的小鼠50只，随机分为 5组，每组10只，分别以0.010，0.015，0.020，0.025和0.030 mL·g的剂量灌胃56°红星二锅头白酒。以小鼠“翻正反射”消失作为醉酒的判定指标[7-9]，记录醉酒和死亡小鼠的只数并计算醉酒率和死亡率，以醉酒率最高而死亡率最低的剂量作为小鼠急性醉酒模型的最佳灌胃剂量。

2.3小鼠醉酒、睡眠、醒酒时间的测定 取小鼠50只，随机分成5组，每组10只，分别为模型组、金樽片组(3.00 g·kg-1)、解酒颗粒低剂量组(1.50 g·kg-1)、解酒颗粒中剂量组(3.0 g·kg-1)、解酒颗粒高剂量组(6.00 g·kg-1)。除模型组用生理盐水灌胃外，其余各组用相应药物灌胃，1次·d-1，每10 g小鼠体重灌胃体积均为0.2 mL，连续灌胃3 d。最后1日灌胃30 min后，各组用56°白酒灌胃，每10 g小鼠体重灌胃体积均为0.2 mL。30 min后除模型组用生理盐水灌胃外，其余各组用相应药物再灌胃1次，每10 g小鼠体重灌胃体积均为0.2 mL。记录给白酒时间、小鼠翻正反射消失和恢复时间，计算醉酒时间、睡眠时间和醒酒时间。

2.4血清及肝组织中各项指标的测定 取小鼠60只，随机分成6组，每组10只，分别为正常组、模型组、金樽片组(3.00 g·kg-1)、解酒颗粒低剂量组(1.50 g·kg-1)、解酒颗粒低中量组(3.00 g·kg-1)、解酒颗粒高剂量组(6.00 g·kg-1)。给药和造模时正常组用生理盐水灌胃，其余方法同1.2.2方法操作。最后1次给药1 h后摘小鼠眼球取血，室温放置1 h后3000 r·min-1离心5 min，取上清液，按试剂盒说明书测定血清中乙醇浓度、谷丙转氨酶(ALT)和谷草转氨酶(AST)活性；取血后处死小鼠，解剖取肝脏1 g，加0.9%的生理盐水9 mL，制成10 %的肝组织匀浆液，3000 r·min-1离心5 min，取上清液，按照试剂盒说明书测定乙醇脱氢酶(ADH)、乙醛脱氢酶(ALDH)、超氧化物歧化酶(SOD)的活性。

3 结果

3.1小鼠急性醉酒模型的建立 小鼠急性醉酒模型实验，小鼠醉酒率随着白酒剂量的增大而升高，当白酒剂量达到 0.02 mL·g-1时，醉酒率达到 100%，但随着白酒剂量的增加，小鼠死亡率也不断升高。0.020 mL·g-1的白酒剂量小鼠醉酒率不但达到100%，且死亡率为0，因此，选择此剂量为小鼠急性醉酒模型的最佳给白酒剂量。结果见表1。

表1 小鼠急性醉酒模型试验结果(n=10)

3.2对小鼠醉酒、睡眠、醒酒时间的影响 与模型组比较，解酒颗粒低、中、高剂量组及金樽片组均可显著延长小鼠醉酒时间，缩短睡眠和醒酒时间(P<0.01)。结果见表2。

表2 对小鼠醉酒、睡眠、醒酒时间的影响

3.3对小鼠血清中乙醇浓度、ALT和AST活性的影响 与正常组比较，模型组乙醇浓度、ALT和AST活性均显著升高(P<0.01)；与模型组比较，解酒颗粒低、中、高剂量组及金樽片组均可显著降低醉酒小鼠血清中乙醇质量浓度、ALT和AST的活性(P<0.01)。结果见表3。

表3 对小鼠血清乙醇浓度、ALT和AST活性的影响

3.4对小鼠肝组织ADH、ALDH和SOD活性的影响 与正常组比较，模型组的ADH、ALDH和SOD活性均显著升高(P<0.01)；与模型组比较，解酒颗粒低、中、高剂量组及金樽片组均可显著升高醉酒小鼠肝组织中ADH、ALDH和SOD的活性(P<0.01)。结果见表4。

表4 小鼠肝组织ADH、ALDH和SOD活性的影响

4 讨论

《本草纲目》指出酒“过饮不节，杀人顷刻。” WHO认为酒精中毒是当今世界范围内的第一公害[5]。酒精在机体代谢过程中会产生对健康有害的物质，如乙醛，自由基等，这些有害物质会引起肝损伤。解酒保肝的目的一方面是要加快酒精的代谢，使代谢产物快速排出体外，另一方面是保护肝脏和修复受损伤的肝细胞[4]。

解酒颗粒处方由葛根、枳椇子、鸡内金和甘草4味中药组成。葛根为君药，《本草拾遗》曰其可“解酒毒”。现代药理研究表明[10]，葛根有解酒作用，可抑制酒精吸收、加快酒精代谢、抗氧化、保护肝脏等。枳椇子为臣药，《滇南本草》曰其可“解酒毒”。现代药理研究表明[11]，枳椇子具有解酒保肝作用，并可预防肝纤维化、酒精性和非酒精性脂肪肝。另外，枳椇子配伍葛根具有协同解酒作用[12]。鸡内金为佐药，《本草纲目》载鸡内金可“消酒积”，现代药理研究表明[13-14]，鸡内金不仅具有消食作用，还具有解酒作用。可消除过量饮酒伴随的食积。甘草为使药，可调和诸药，《本草汇言》曰其为“补虚解毒之药也”。现代药理研究表明[15-16]，甘草具有解毒作用，还具有抑制胃液、胃酸分泌，增加胃粘膜细胞的己糖胺成分，保护胃黏膜作用。全方药味均为药食两用中药，药性平和，共奏解酒保肝护胃作用。

ALT和AST是临床用于评价肝功能的两个常用指标。当肝细胞被酒精损伤时，肝细胞中的 ALT和AST 会进入血液引起血中的ALT和AST活性的升高[17]。解酒颗粒不仅可降低醉酒小鼠血中乙醇浓度，减轻乙醇对机体的伤害，又可降低血中反应肝功能的指标ALT和AST的活性，说明解酒颗粒可减轻乙醇对肝脏的损伤。

ADH和ALDH是乙醇代谢过程的两个主要酶[18]。ADH和ALDH活性的大小直接影响乙醇在体内代谢的速度。解酒颗粒可升高醉酒小鼠肝组织中ADH和ALDH的活性，说明解酒颗粒可加速乙醇在体内的代谢，减轻乙醇对机体的伤害。

SOD是清除体内自由基的重要酶之一，保护细胞免受自由基攻击[19-20]。解酒颗粒可升高醉酒小鼠肝组织中SOD的活性，有助于体内自由基的清除，减轻自由基对肝细胞的攻击。

综上所述，解酒颗粒能延长小鼠醉酒时间，缩短睡眠和醒酒时间，加快乙醇在体内的代谢，降低乙醇对机体的损伤，增强机体清除自由基的能力，因此可发挥较好的解酒保肝作用，其作用机制可能与促进乙醇代谢和清除自由基有关。