共培养条件下大鼠骨髓间充质干细胞分化为胰岛样细胞团的研究

刘鑫 岑妍慧 贾微 杨瑞 李森 姜娜 黄泽萍 宁志莹 黄威

广西中医药大学组织学与胚胎学教研室，南宁 530200

糖尿病是影响人类健康的主要疾病之一，除外源性胰岛素治疗外，胰岛移植是目前较理想的治疗方法，但面临胰岛供体短缺、移植排斥和手术后遗症等问题，制约了其在糖尿病治疗领域的临床应用。因此寻找可替代的其他来源的胰岛β细胞成为近年研究的热点。干细胞诱导分化为胰岛细胞是目前重要的研究方向之一，骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells, BMSCs)是骨髓中除造血干细胞以外的另一种多能干细胞，既可分化为造血组织，又可分化为造血以外的组织细胞，取材方便，容易进行体外分离、培养和纯化。目前一些研究均表明特定的诱导剂或培养体系可使BMSCs定向分化为胰岛细胞[1-3]，也有研究者使用共培养体系对BMSCs进行诱导分化[4-5]，但其主要探讨共培养体系对BMSCs功能改变的影响，而对于诱导过程中BMSCs形态变化的动态观察、胰岛素分泌量、表达特征及超微结构的变化等方面未见有关报道。本研究将大鼠胰岛细胞与BMSCs共培养作为诱导体系，最大程度模拟类似胰腺的微环境，探讨BMSCs在与胰岛细胞共培养后分化为胰岛样细胞团的可能性，以期为胰岛移植的临床应用奠定基础。

材料与方法

一、BMSCs的分离、纯化与鉴定

健康SPF级成年Wistar大鼠12只，购自广西中医药大学实验中心(动物许可证号：桂医动字第11004号)。无菌条件下取大鼠的股骨及胫骨，用含10%胎牛血清的低糖DMEM培养……