深海鱼油对蛋鸡生产性能及蛋黄脂肪酸富集规律的影响

李菊芬 ， 李 丽 ， 李琦华*， 杨 凯， 余开文， 杨 梅， 黄 劲， 郭 敏

（1.云南农业大学动物科学技术学院，云南 昆明 650201；2.云南省动物营养与饲料重点实验室，云南 昆明 650201；3.云南省昭通市昭阳区畜牧兽医技术推广服务中心，云南 昭通 657000；4.云南云箐凤农牧发展有限公司，云南 昆明 650200；5.昆明晋宁祥和农牧有限公司，云南 昆明 650600）

ω-3多不饱和脂肪酸（ω-3PUFA）在人体和动物营养中不可或缺，主要包括α-亚麻酸（ALA）、二十二碳六烯酸（DHA）和二十二碳五烯酸（EPA）。ω-3PUFA具有提高动物生产和繁殖性能、促进免疫调节、提高鸡蛋蛋品质和脂肪酸富集、改善抗氧化状态和脂质代谢等多种生理功能（Cui等，2020；Abdulla等，2019；Reza等，2018；Mahdi等，2018）。鱼油富含ω-3PUFA，是鱼粉生产过程中鱼体及其废弃物经蒸、压榨和分离得到的副产品（喻礼怀等，2014），是EPA和DHA的优质原料，研究表明在众多蛋鸡膳食补充剂中，鱼油可有效提高蛋黄ω-3PUFA含量（Ebeid，2011）。在实际生产中，动物采食含有大量ω-6PUFA的饲粮，会导致动物所产的肉和蛋中ω-6PUFA偏高而ω-3PUFA偏低，而禽肉被广泛食用，其脂肪酸组成可以通过改变禽类膳食脂质的脂肪酸组成进行控制，因此鸡蛋作为被食用最广的禽类产品，其营养价值高，稳定性较高，是最理想的不饱和脂肪酸载体（赵丽娜，2007）。因此本试验以深海鱼油作为ω-3PUFA饲料源，研究其对蛋鸡生产性能的影响及在鸡蛋黄中脂肪酸富集的规律，分析出符合ω-3PUFA鸡蛋生产最适宜的鱼油添加水平，为富含ω-3PUFA营养调控型鸡蛋的生产提供科学依据。

1 材料与方法

1.1试验材料 深海鱼油，由云南云箐凤农牧发展有限公司提供，为透明黄色状液体，总甘油酯≥99.99%，DHA含量占总脂肪酸的14.81%（实测值）。

1.2试验动物及分组 试验选取198日龄体况良好、产蛋性能一致的海兰灰商品蛋鸡672只（昆明晋宁祥和农牧有限公司提供），随机分成6组，每组4个重复，每个重复28只进行分笼饲养。对照组（Ⅰ组）饲喂基础饲粮，各处理组蛋鸡饲粮在基础饲粮基础上分别添加0.75%（Ⅱ组）、1.00%（Ⅲ组）、1.25%（Ⅳ组）、1.50%（Ⅴ组）、1.75%（Ⅵ组）的深海鱼油，预饲期7 d，正试期共42 d。采用网上平养，自然光照加人工补光。人工加机器拌料，人工饲喂粉料，每日喂料4次（8∶00，12∶00，16∶00，20∶00），自由饮水。清粪和消毒每2 d 1次，每日记录温度和湿度。

1.3试验饲粮 基础饲粮为昆明晋宁祥和农牧有限公司自配的产蛋高峰期蛋鸡饲料，基础饲粮组成及营养水平见表1。试验饲粮及深海鱼油脂肪酸组成见表2。

表1 基础饲粮组成及其营养水平

表2 试验饲粮及深海鱼油脂肪酸组成（占总脂肪酸的百分比%）

1.4检测指标及方法

1.4.1 生产性能 试验期间每天以重复为单位，记录蛋重、产蛋数、破蛋数、耗料量、死淘数，计算平均日采食量、平均蛋重、产蛋率、破软壳蛋率和料蛋比，计算公式如下：

日平均采食量/（g/只·d）=（每组每天的喂料量-剩余量）/每组存栏鸡只数；

日平均蛋重=每组总蛋重/每组产蛋个数；

日均产蛋率=总产蛋数/存栏鸡只数×100；

日均破软壳蛋率=破软壳蛋总数/总产蛋数×100；

料蛋比=总耗料量/总蛋重。

1.4.2 脂肪酸测定及含量计算 分别于正式试验第7、14、28、42天，每个重复随机抽取4枚鸡蛋，分离蛋黄和蛋清，并将4枚分离得到的蛋黄混匀制成一个鸡蛋样，冻干样品后研磨称重，用甲醇、氯仿抽取脂肪，室温下氢氧化钾-甲醇甲酯化，采用气相色谱法（Hp6890GC/5973MS气相色谱-质谱联用仪）测定脂肪酸组成和含量，各处理组饲粮及蛋黄脂肪酸含量的计算采用面积归一法（陈秀丽等，2014）。

1.5数据统计分析 用Excel整理数据，用SPSS 22.0软件中ANOVA进行单因素方差分析，同时采用线性模型（GLM）程序分析不同添加水平下ALA、DHA和总ω-3PUFA在蛋黄中的沉积量随时间变化的规律，采用Duncan’s法进行多重比较，显著水平为P<0.05，极显著水平为P<0.01，结果均以“平均值±标准差”表示。

2 结果

2.1饲粮添加不同水平深海鱼油对蛋鸡生产性能的影响 由表3可知，饲喂期至第42天，随着深海鱼油添加水平的增加，蛋鸡日平均采食量呈先增加后降低的趋势，Ⅴ组在第14天时采食量达到最大，各试验组在不同的时间段内差异不显著（P>0.05），第42天时，Ⅵ组蛋鸡日平均采食量明显降低（P<0.05），可能与鱼油添加水平过高有关。饲粮中深海鱼油的添加对蛋鸡蛋重影响较大，随着时间的延长，蛋重逐渐增加，饲喂至第7天，除Ⅵ组外（P<0.05），其他试验组蛋重较对照组极显著提高（P<0.01），饲喂至第14天以后各试验组蛋鸡蛋重较对照组有所降低，但差异均不显著（P>0.05）。饲喂至第7天，除Ⅲ组产蛋率较对照组下降比较明显外（P<0.05），其余各试验组与对照组之间差异均不显著（P>0.05）。饲喂期至第14天后，Ⅳ组产蛋率均高于对照组，Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ组之间差异均不显著（P>0.05），Ⅲ组产蛋率最低，是因为试验期内Ⅲ组有鸡只生病，导致产蛋率下降。饲喂至第7天，各试验组破蛋率较对照组有所增加，Ⅱ组差异比较显著（P>0.05），饲喂至第14天，Ⅵ组破蛋率明显升高（P<0.05）；饲喂至第28天和第42天时，各试验组破蛋率有下降的趋势，各处理组之间差异不显著（P>0.05）。添加深海鱼油可降低蛋鸡料蛋比，且随着时间的延长，各试验组蛋鸡料蛋和破蛋率较对照组均有所降低。

表3 深海鱼油添加水平对蛋鸡生产性能的影响

2.2饲粮添加不同水平深海鱼油对蛋鸡蛋黄脂肪酸富集规律的影响

2.2.1 深海鱼油对鸡蛋黄ALA含量的影响 由表4可知，同一天数不同处理比较，在试验第7、28天和42天时对照组和添加深海鱼油的各处理组蛋黄ALA含量变化不显著（P＞0.05）；第14天时，与对照组相比各试验组蛋黄ALA含量都有增加的趋势，尤以Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ3组增加比较明显（P＜0.05），但3组之间ALA含量差异不显著（P>0.05），与对照组相比分别升高了30.51%、25.42%和38.98%。同一处理不同天数比较，各处理组蛋黄ALA含量呈先增加后降低的趋势。饲喂至第42天，对照组蛋黄ALA含量明显降低（P＜0.05），第Ⅲ组蛋黄ALA含量随时间变化不明显（P＞0.05）；前14天，各试验组随着时间的延长各试验组蛋黄中ALA的含量逐渐升高，Ⅱ、Ⅳ、Ⅴ组变化尤为明显（P＜0.05），第Ⅵ组在第14天时ALA的沉积量达到最大，与第14天时相比，第42天时ALA含量显著降低（P＜0.05）。

表4 深海鱼油添加水平对鸡蛋黄ALA含量的影响（占总脂肪酸的百分比）%

2.2.2 深海鱼油对鸡蛋黄DHA含量的影响 由表5可知，同一天数不同处理比较，第7天时，各试验组DHA含量较对照组升高，第Ⅵ组增加比较明显（P<0.05），各试验组之间DHA含量差异不显著（P＞0.05）。饲喂至第14、28、42天时，各试验组与对照组相比DHA含量均有大幅度的提升（P<0.05），且DHA的沉积量随鱼油添加水平的增加而增加；Ⅵ组蛋黄中DHA含量在第14天时达到最大，与对照组相比升高了312%，Ⅴ、Ⅵ组之间差异不显著（P＞0.05）；第28天时，DHA的沉积量随鱼油添加水平先升高后降低，第Ⅴ组蛋黄DHA沉积量达到3.28%，为全期最高，比对照组相比升高了412.5%。同一处理不同天数比较时，饲喂基础饲粮也可以小幅增加鸡蛋蛋黄中DHA含量，且在第14天时差异比较明显（P<0.05）；在第14、28天和42天时，各试验组蛋黄中DHA含量随着时间的延长都有了大幅度的提升（P<0.05），在第28天蛋黄中的DHA沉积量达到最大，较第7天提高了368.57%。

表5 深海鱼油添加水平对鸡蛋黄DHA含量的影响（占总脂肪酸的百分比）%

2.2.3 深海鱼油对蛋黄ω-3PUFA含量的影响由表6可知，蛋黄中ω-3PUFA的沉积规律与DHA的沉积规律相似。同一天数不同处理比较，饲喂至第7天时，饲喂基础饲粮对蛋黄中ω-3PUFA含量变化不明显（P＞0.05）；第14、28、42天时，与对照组相比各试验组均显著提高了蛋黄ω-3PUFA含量（P<0.05）。在第14、42天时，蛋黄ω-3PUFA含量随着添加水平的增加而升高，Ⅵ组蛋黄ω-3PUFA含量在第14天时达到最大，与对照组相比升高了191.79%，Ⅴ、Ⅵ组之间差异不显著（P＞0.05），即Ⅴ组能达到与Ⅵ组同样的效果；第28天时，蛋黄中ω-3PUFA含量随着添加水平的增加先升高后降低，Ⅴ组蛋黄ω-3PUFA富集量达到全期最高3.81%，且富集效果最明显，较对照组提升了209.76%。同一处理不同天数比较时，随着时间的延长，各处理组蛋黄ω-3PUFA的沉积均呈现先升高后降低的规律，Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ这4组在第28天时ω-3PUFA含量达到最大值（P＜0.05），其中Ⅴ组相比于第7天提升了220.17%；Ⅵ组在第14天时ω-3PUFA沉积量达到最大（P＜0.05），较第7天升高了187.5%。

表6 深海鱼油添加水平对鸡蛋黄ω-3PUFA含量的影响（占总脂肪酸的百分比）%

3 讨论

3.1饲粮中深海鱼油添加水平对蛋鸡生产性能的影响 本试验发现，在蛋鸡基础饲粮中添加不同水平的深海鱼油对蛋鸡的产蛋率影响不显著，蛋鸡日平均采食量呈先增加后降低的趋势，鱼油添加水平过高，采食量降低；饲粮添加深海鱼油可降低蛋鸡料蛋比和破软壳蛋率，随着时间的延长，蛋重逐渐增加，试验期内产蛋率较对照组下降可能是试验期间多为阴雨天气，气温骤降，从而导致产蛋率下降。饲粮中添加富含ω-3PUFA的原料，能显著影响蛋黄ω-3PUFA的组成，但对蛋鸡生产性能的影响也一直是人们所关注的重点。喻礼怀等（2014）在花凤蛋鸡基础饲粮中添加3%深海鱼油，结果表明添加鱼油对蛋鸡生产性能无不良影响，试验组蛋重和产蛋率较对照组有所降低，但差异不显著，本试验结果与其一致。这是因为提高基础饲粮中ω-3PUFA水平会导致蛋黄中ω-6PUFA的沉积量降低，ω-6PUFA的不足导致脂质向卵巢的转运速度减慢，脂蛋白合成减少，血浆雌二醇水平降低，从而抑制卵泡发育（卢元鹏，2009；Herber，1996），导致蛋重降低。

3.2饲粮中深海鱼油添加水平对鸡蛋黄ω-3PUFA含量的影响Cruickshank（1934）发现，基础饲粮中的脂肪酸组成及含量可以影响鸡蛋蛋黄中脂肪酸的组成。Konieczka等（2017）报道，用鱼油、猪油、亚麻籽以及油菜籽相结合方式来饲喂蛋鸡，可诱导鸡肉脂质中EPA和DHA的沉积。Elswyk等（2010）研究发现，添加3%鱼油可使蛋黄中的ALA和DHA含量大幅度提高，EPA的含量亦显著上升；也有研究表明蛋黄中ω-3PUFA沉积效率为：ALA>DHA>EPA（齐广海，1995）。在本试验中蛋黄EPA含量很少所以忽略不计，可能是由于蛋鸡体内存在着EPA的血卵屏障，将EPA阻挡在屏障之外，几乎不能进入卵黄内，对DHA却无明显屏障作用，这与人体内EPA的血脑屏障作用一致，也可能与蛋鸡品种、饲喂方式、试验时间短从而转化不完全有关。本试验结果表明，随着深海鱼油添加水平的增加，各处理组蛋黄中ALA、DHA含量随添加量增加而增加，ω-3PUFA含量也升高，1.5%鱼油组表现出较好的沉积效果，但随着时间延长脂肪酸并不会无限富集，到达高峰以后会有所下降，这说明ω-3PUFA在蛋黄中的富集具有一定的时间效应和剂量效应，添加量过高或时间过长反而会抑制其吸收代谢。综合本试验蛋黄中ω-3PUFA的富集规律，在基础饲粮基础上深海鱼油最佳添加量为1.5%。

4 结论

本试验条件下，蛋鸡基础饲粮中深海鱼油最适宜添加量为1.5%，可有效促进ALA、DHA和ω-3PUFA在蛋黄中的沉积，且对蛋鸡的生产性能无不良影响。