复方精油在肉兔日粮中适宜添加量的研究

苏翔宇，郭升岚，何剑波，吕继蓉，余 淼，黄明亚，史海涛，郭春华*

（1.西南民族大学畜牧兽医学院，四川成都 610041；2.成都大帝汉克生物科技有限公司四川省动物采食调控工程技术研究中心，四川成都 611130）

抗生素自面世以来为人类的健康带来了美好福音，也为养殖产业带来了巨大的经济效益。但是随着时间的发展，由于人类大剂量的使用抗生素所造成抗药性和药物残留等问题也表现出来。农业农村部已于2020年7月1日正式禁止在日粮中添加促生长类药物饲料添加剂，现阶段寻找一种新型饲料添加剂来替代抗生素已经成为饲料研究者不可避免、亟待解决的问题。植物精油广泛存在于芳香植物体内，是易挥发、有着浓烈香味的油状液体，密度比水小、不溶于水、易溶于有机溶剂（王巨媛，2010）。有研究表明，复方精油独特的芳香性气味，能够刺激肉兔消化系统的感受器，增强肉兔的食欲，从而提高采食量（王栋得，2013）。董兵等（2011）发现，加入0.04%的大蒜素可以显著提高獭兔的日增重，且可降低腹泻率和饲料消化率。也有研究发现，在肉兔日粮中添加100 mg/kg的百里香酚，可以改善兔肉的氧化稳定性（Ahmed，2018）。现阶段复方精油应用于畜禽日粮的研究较多，但由于添加种类不同，导致添加的浓度还未有明确的界定。本研究旨在研究日粮中添加不同浓度（150～600 mg/kg）的复方精油对肉兔生产性能、健康状况、屠宰性能、肉品质、血清免疫指标和抗氧化指标等的影响，以期为复方精油的合理利用提供试验数据和理论依据，更好地为肉兔产业服务。

1 材料与方法

1.1 试验材料 复方精油（CEO），由成都大帝汉克生物科技有限公司提供，主要成分有肉桂醛12.0%，香芹酚6.0%，天然精油提取物3.0%。

1.2 试验设计 试验采用完全随机化单因素试验设计，选取240只35日龄断奶、体重相近、公母各半的健康新西兰兔，分为5个处理组，每组16个重复，每个重复3只兔子，1组作为空白对照组，采用当地兔场自用日粮作为基础饲料，其他四组分别添加150、300、450、600 mg/kg的 复方精油。五组试验兔光照、温度、湿度饲养管理一致，正式试验期为56 d。

1.3 日粮配方及营养水平 肉兔日粮在参照NRC（1998）和法国AEC（1993）兔营养需要的基础上，结合生产实践配制。饲料形态为颗粒饲料。基础日粮组成及营养水平见表1。

表1 基础日粮组成及营养水平（干物质基础）

1.4 饲养管理 兔舍共分为上下两笼，每笼饲养3只，采用颗粒料饲喂，自由采食与饮水。试验期间按兔场规定进行防疫驱虫和消毒，密切观察试验兔的日常行为，发现异常立即处理。

1.5 测定的指标及方法

1.5.1 生长性能 记录试验肉兔初始体重和终末体重，每两周在肉兔空腹下称重1次，记录每组肉兔的生长情况和每日耗料量，记录肉兔粪便、精神状况、生长发育等情况，每天记录环境温度。

1.5.2 屠宰性能、肉品质 待饲养阶段试验完成后，每组抽选出12只接近试验平均体重的试验兔，将试验兔禁食12 h后屠宰取样。记录屠宰前样兔活体重、胴体重及其分别内脏器官重。将试验兔剥皮后，除去腕关节处的前肢、跗关节处的后肢、肠道及内容物（保留其头部、胸腔、肝脏和肾脏及肾脏周围的脂肪）称重，即为半净膛重，半净膛重去除所有内脏器官（保留肾脏及肾脏周围脂肪）即为全净膛重，分别计算半净膛率和全净膛率。宰后剥离两侧全部背腰最长肌，冷冻保存待测。

pH：于宰后24 h采用PHSJ-3F型pH计从肉样的上、中、下3个部分各取1个点测量pH，将探头插入肌肉3 mm读数，最后求统计数据的平均值。

肉色：采用HP-C210型色差仪，从肉样的上、中、下3个部分各取1个点分别测量亮度（L*）、红度（a*）、黄度（b*）值，取平均值。

蒸煮损失：将新鲜肉样称重记为m1（g）后，放入封口袋密封，袋口向上放入80℃恒温水浴锅内蒸煮1 h后，取出肉样，吊挂于室内，冷却30 min后，将袋内液体排出，取出肉样称重记为m2（g）。

蒸煮损失/%＝[（m1-m2）/m1]×100。

剪切力：将肉样装入封口袋密封中，放入80℃恒温水浴锅内水浴2 h后，取出肉样，用流水冷却30 min，将肉样顺肌肉纤维方向截取长宽厚分别为1.5、1.0、0.5 cm的肉样，此项试验数据借助器材为南京铭奥仪器设备有限公司，产品型号：MAQC-12，剪切力仪。

1.5.3 血清免疫、抗氧化指标的测定 在试验结束后第一天，试验兔禁食24 h后，每组随机挑选12只进行心脏采血，每只抽取10 mL心脏血静置后，3500 r/min离心10 min收集上层血清样品，分装于离心管中，-20℃保存。后送至成都里来生物科技有限公司采用酶联免疫分析检测法（ELISA）测定血清中IgA、IgG、IgM含量，检测试剂盒均购于上海茁彩生物科技有限公司。采用南京建成生物工程研究所试剂盒测定血清中超氧化物歧化酶（T-SOD）、丙二醛（MDA）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-PX）、过氧化氢酶（CAT）及总抗氧化能力（T-AOC）。

1.6 数据处理与统计 试验数据用Excel整理，指标通过SPSS 18.0分别进行单因素方差分析（One Way ANOVA）、单一自由度比较和回归趋势分析中的线性（Linear）效应和二次曲线（Quadratic）效应，单因素方差分析达到显著水平采用Duncan’s法进行多重比较。P＜0.05表示差异显著，P＜0.10表示有趋势，结果用平均值表示，变异程度用标准误（SEM）表示。

2 结果

2.1 不同浓度复方精油对肉兔生产性能的影响由表2可知，不同浓度复方精油对各阶段体重、日增重的影响都不显著，但对1～14、15～28、1～56 d的采食量影响显著，且全程试验组显著高于对照组（P＜0.05）。添加复方精油改善了料重比，1～56 d全期下降了5.53%，但差异不显著（P＞0.05）。

表2 不同浓度复方精油对肉兔生产性能的影响

2.2 不同浓度复方精油对肉兔屠宰性能的影响由表3可知，添加不同浓度的复方精油对肉兔活体重、胴体重、全净膛率、半净膛率的影响不显著，但胴体重有高于对照组的趋势（P=0.09），且试验组与对照组在胴体重方面有符合二次曲线的趋势（P=0.06），即肉兔胴体重随着复方精油浓度的增加而增加，后随着浓度的增加而降低。

表3 不同浓度复方精油对肉兔屠宰性能的影响

2.3 不同浓度复方精油对肉兔肉品质的影响由表4可知，添加复方精油试验组的蒸煮损失率显著低于对照组（P＜0.05），且有符合二次曲线的趋势（P=0.07）。试验组肉色a*也显著高于对照组（P＜0.01），即试验组的肉色更加鲜艳，并且符合线性趋势（P＜0.01）。复方精油对滴水损失率、pH24h、肉色L*、b*、剪切力影响不显著（P＞0.05）。

表4 不同浓度复方精油对肉兔肉品质的影响

2.4 不同浓度复方精油对肉兔血清免疫指标的影响 由表5可知，试验组与对照组相比血液中IgG的含量显著提高（P=0.01），且当添加量为300 mg/kg时血液中IgG的含量最高。各组血液中IgA、IgM的含量差异不显著（P＞0.05）。

表5 不同浓度复方精油对肉兔血清免疫指标的影响

2.5 不同浓度复方精油对肉兔血清抗氧化指标的影响 由表6可知，与对照组相比，试验组肉兔血清中MDA的含量显著降低（P=0.03），而复方精油对肉兔血清中GSH-PX、CAT、T-AOC含量的影响不显著（P＞0.05）。

表6 不同浓度复方精油对肉兔血清抗氧化指标的影响

3 讨论

3.1 不同浓度复方精油对肉兔生长性能的影响田梅等（2019）研究发现，添加百里香酚与对照组相比肉兔的采食量提高了6%左右，日增重提高了22%左右，其中150 mg/kg组效果最好。在35 d断奶伊拉兔日粮中加入0.05%大蒜素和0.04%黄芪多糖的植物精油混合物，对平均日增重、平均日采食、料重比有显著的影响（田河，2015）。孙海涛等（2018）研究发现，日粮添加5%的牛至油素可以显著增加日采食和平均日增重，显著降低料重比。Elghalid（2020）在肉兔饮用水中添加混合植物精油提取物（每升含有2.5 g香芹醇、0.75 g百里香酚、17.8 g薄荷醇和50 g丙二醇）。结果表明混合植物精油提取物提高了饲料转化率和日增重。本试验中，试验组与对照组1～14、15～28、1～56 d的采食量差异显著，且全程试验组采食量显著高于对照组。与上述试验结果相似，这可能由于植物精油有着独特的芳香性气味，能够刺激肉兔消化系统的感受器，增强肉兔的食欲提高采食量（王栋得，2013）。可见通过添加复方精油确实能够通过提高肉兔的采食量来提高肉兔的生产性能。本试验中，添加复方精油改善了料重比，1～56 d全期下降了5.53%，有降低的趋势。这与前人的试验结果基本一致，复方植物精油在促进采食降低料重比方面得到进一步证实。

3.2 不同浓度复方精油对肉兔屠宰性能的影响屠宰性能的优劣在畜禽生产上面具有重要意义，是反映畜禽生产性能的主要指标之一。Al-Ramamneh（2018）发现，在热应激肉鸡饲粮中添加洋葱提取物，可提高其胴体重、胸肌重和腿肌重，并改善肌肉品质。权根花（2019）研究日粮中添加不同水平大蒜素作为促生长剂对肉仔鸡屠体性能影响时发现，2%、4%的大蒜素对肉仔鸡屠宰率无显著影响，2%大蒜素组胸肌重量最高，而4%大蒜素组胸肌重最低。田梅等（2019）发现，日粮添加百里香酚显著提高了肉兔的屠体标准，显著降低了肾和肩胛周围脂肪含量，但对其他器官重量无显著影响。初汉平（2019）等在济宁青山羊日粮中添加200、500、800 mg/kg牛至油发现，500 mg/kg试验组的屠宰率显著高于对照组，各组间的净肉率、肉骨比和眼肌面积没有显著差异。

通过前人的试验发现，复方精油对畜禽屠体性能的改善有一定的影响，本试验发现添加不同浓度的复方精油对肉兔的活体重、胴体重、全净膛率、半净膛率的影响差异不显著，可能是由于试验屠宰时，已经超过了新西兰肉兔生长发育快速的时期，肉兔生长放缓，导致复方精油的优势没有体现出来。

3.3 不同浓度复方精油对肉兔肉品质的的影响此次试验添加复方精油试验组的蒸煮损失率显著低于对照组，这与单琪涵（2020）、武进（2012）的研究结果基本一致，这可能是由于复方精油提高了细胞的抗氧化能力，减少了细胞的氧化损伤，保护了对兔肉肌肉纤维完整性（田梅，2019），降低了兔肉的蒸煮损失率。肉色即肌肉表面的颜色，是消费者非常关心的指标之一。有研究发现畜禽在屠宰时会发生应激，从使肌肉的L*出现先上升后下降的现象，肉色b*和肉色a*则会出现下降的趋势，但整体在一个正常的范围（单琪涵，2020），而低于这个范围就会出现白肌肉（PSE）和黑干肉（DFD）的现象，影响肉品质。此次研究中通过添加复方精油发现，试验组肉色a*显著高于对照组，可见添加复方精油不仅可以使兔肉颜色更加鲜艳，也有利于缓解肉兔的屠宰应激。

3.4 不同浓度复合精油对肉兔血清免疫指标的影响 周洪彬等（2020）研究发现，肉桂醛和百里香酚的复合精油可以显著提高肉仔鸡血清中IgM的含量。朱晓磊（2014）研究也发现，添加0.25 mg/kg的百里香精油（主要成分为香芹酚、百里酚等）在麻花鸡饲粮中 可以显著提高肉鸡血清IgA、IgG和IgM含量。周选武等（2017）研究发现，在断奶仔猪日粮中添加200 mg/kg的植物精油（主要成分是3.5%百里香酚和4.5%肉桂醛）其血清中免疫球蛋白G（IgG）含量与其他组相比最高。李万利等（2007）研究发现，添加0.1%、1%、2.5%、5%的牛至精油在断奶伊拉兔日粮中能显著增加血清中IgA、IgG、IgM的含量。

此次试验发现添加不同浓度的复合精油对肉兔血液中IgA的含量影响不显著，对肉兔血液中的IgG含量影响显著，且当添加量为300mg/kg时血液中IgG的含量最高。此次试验组对血液中IgM的含量影响不显著，但IgM的含量符合线性曲线，血液中IgM的含量随着复方精油浓度的增加而增加。可见在肉兔日粮中添加复合精油能够增强肉兔机体的免疫力。3.5 不同浓度复方精油对肉兔血清抗氧化指标的影响 有研究发现添加150 mg/kg的迷迭香精油在畜禽日粮中显著提高了血清中GSH-Px和T-SOD活性，显著降低了血清MDA含量（Jang，2004），秦国栋等（2021）研究发现，在白羽肉鸡日粮中添加桉树精油能极显著降低血清中的MDA含量。姚佳等（2016）发现，在日粮中添加300 mg/kg的肉桂醛也能显著提高东北白鹅血清中的TAOC、GSH-Px和SOD活性，降低MDA含量。此次试验与上述试验的结果相似，试验组肉兔血清中MDA的含量显著降低，其中丙二醛（MDA）是脂质的降解产物，可作为脂质过氧化和氧化应激的生物标志物（Chen，2009），通过检测丙二醛的含量高低，能够了解到动物机体氧化损伤的程度（唐镇海，2021），可见通过此次试验在肉兔日粮中添加复方精油能够减少脂质过氧化水平，提高肉兔的抗氧化能力，促进生产力的提高。

4 结论

本试验结果表明：（1）复方精油可以提高肉兔的采食量、降低料重比，提高肉兔的生产性能。（2）复方精油提高了肉品质，改善了肉色。同时在肉兔日粮中添加复方精油能够增强肉兔机体的免疫力、提高肉兔的抗氧化能力。（3）日粮中添加0～600 mg/kg的复方精油，其中胴体重、蒸煮损失率与肉色a*等呈现出二次曲线的剂量效应，即随添加量的增加，效应增强，但复方精油添加过高，则表现出负面效应。因此，本试验条件下，适宜添加量为300 mg/kg。