补骨脂酚对链脲佐菌素诱导的大鼠糖尿病心肌病保护机制研究

康永建 郑权友 王兮

1.陆军第九五八医院麻醉科，重庆 400000；2.陆军第九五八医院泌尿外科，重庆 400000；3.陆军第九五八医院呼吸内科，重庆 400000

糖尿病是一种以长期高血糖为特征的慢性内分泌代谢性疾病，心脏损伤是其主要并发症和死亡原因之一[1]。高血糖引起的糖尿病心肌病，是指在无高血压、无明显器质性疾病的情况下，心肌功能障碍的一种特殊形式[2]，其发展缓慢并隐匿，病理特征表现为心肌细胞凋亡，间质纤维化及左室功能障碍[3]。补骨脂酚是一种具有生物活性单萜苯酚，可从豆科植物补骨脂的种子获得[4]。近来研究表明，补骨脂酚具有广泛的药理学作用，包括抑菌、抗感染、抗衰老、抗肿瘤等效应[5-9]。研究指出，补骨脂酚可抑制脂多糖引起的心肌细胞凋亡[10]，但其能否预防糖尿病心肌病引起的心肌凋亡鲜见报道。本研究采用糖尿病心肌病大鼠，探讨补骨脂酚对糖尿病心肌病的保护作用及其信号通路。

1 材料与方法

1.1 实验材料

选取45 只8 周龄雄性SPF 级SD 大鼠（体重180～220 g），由陆军军医大学动物实验中心提供，动物生产许可证号：SCXK（渝）20170002。经实验动物福利伦理审查委员会审核通过（AMUWEC9031）。45%高糖高脂饲料（high sugar and fat diet，HFD）（南通特洛菲饲料科技公司）；BAK（Sigma-Aldrich-SMB00604）；链脲佐菌素（Sigma-Aldrich-S0130）；TUNEL（Roche-11 684809910）。DAPI（Sigma-Aldrich-D9542）。兔抗Bcl-2抗体（Proteintech-26593-1-AP），兔抗Bax 抗体（CST-14796），兔抗caspase-3 抗体（CST-9662），兔抗Cleaved caspase-3 抗体（CST-9661）及鼠抗β-actin 抗体（CST-3700），辣根过氧化物酶标记的二抗山羊抗兔（Proteintech-SA00001-4）、山羊抗鼠抗体（Proteintech-SA00001-1）。使用仪器包括：超高频分辨小动物超声成像系统（Visual Sonics，Vevo 2100），高分辨率显微镜（ZEISS，X-Cite SERIES-120Q）。苏木精-伊红染色试剂盒（C0105S）及4%多聚甲醛（P0099-500 ml）购于上海碧云天生物技术有限公司，Masson 染色试剂盒（BSBA-4079A）购于北京中杉金桥生物技术有限公司。……