澳洲茄碱通过MAPK/ERK信号通路调控肝癌细胞增殖、迁移和侵袭的研究Δ

刘英琦，施 喆，孙树刚#，周丽媛，杨 勇，王晓辉(.河北工程大学附属医院普外科，河北 邯郸056000； .河北工程大学附属医院妇科，河北 邯郸 056000)

原发性肝癌是全球最常见的恶性肿瘤之一，主要包括肝细胞肝癌、胆管癌、肝母细胞瘤以及其他罕见类型的肝癌，其中肝细胞肝癌是原发性肝癌最常见的类型，据统计，肝癌在全球肿瘤相关性死亡中居第2位[1]。澳洲茄碱提取自中药龙葵，研究结果发现，澳洲茄碱具有广泛抗肿瘤作用，如膀胱癌、胆管癌以及肺癌等[2-4]。Liu等[5]的研究结果表明，澳洲茄碱可在肝癌中发挥抗肿瘤作用。丝裂原激活的蛋白激酶(MAPK)/胞外信号调节激酶(ERK)信号通路主要参与调控细胞分化和凋亡，已有研究结果表明，该信号通路在肝癌中活化，ERK特异性抑制剂可减弱肝癌细胞增殖、侵袭和迁移能力[6]。因此，本研究以肝癌HepG2细胞为研究对象，探讨澳洲茄碱是否能通过调节MAPK/ERK信号通路抑制肝癌细胞的恶性生物行为学。

1 材料与方法

1.1 细胞系

人肝癌细胞株HepG2购自美国ATCC公司。

1.2 仪器

SpectraMax iD5型多功能酶标仪(美国MD公司)；DYY-6C型电泳仪(北京六一仪器厂)；CKX53型倒置显微镜(日本Olympus公司)；OPTIMA XPN型低温超速离心机(美国Beckman Coulter公司)；311型二氧化碳培养箱(美国Thermo Fisher公司)。

1.3 试剂

澳洲茄碱(纯度≥98%，成都曼思特生物科技有限公司，批号：A0620)；四甲基偶氮唑盐(MTT)试剂盒(美国Sigma公司，批号：M2003-1G)；超敏型BCA法蛋白定量试剂盒(上海碧云天生物科技有限公司，批号：P0012S)；胎牛血清和DMEM培养基(美国Gibco公司，批号：6140079和12634010)；Matrigel基质胶(美国BD公司，批号：356234)；MAPK/ERK信号通路激活剂异丙肾上腺素(ISO，美国MCE公司，批号：HY-12028)；……