桑叶蛋白活性多肽的酶解制备

贾漫丽，杨雪，王彬彬，李娜，李季生，范伟*

（1.河北省高校特色蚕桑应用技术研发中心，河北 承德 067000；2.承德医学院蚕业研究所，河北 承德 067000；3.承德医学院 基础医学院，河北 承德 067000）

桑叶蛋白含量高、纤维含量低，不仅是传统优质粗饲料的来源，更是国家卫生部认定的功能性食品和药品重要来源的原料之一[1]。桑叶蛋白制备活性多肽的发展潜力巨大，生物活性多肽是一类含2～20 个氨基酸残基、对人体健康有益的蛋白短肽片段，一般其分子量均小于6 kDa[2]。孙崇臻等[3]研究发现，桑叶蛋白（mulberry leaf protein，MLP）组成成分主要为蛋白质和分子量大于6.5 ku 的大分子肽，大分子肽一般不活跃，通过酶解蛋白质的方法可获得0.6～6.5 ku 的多肽和0.3～0.6 ku 的小肽，而这些肽具备一定的抗炎、降压、抗氧化、免疫等生物活性。其中，降血压肽是目前较受关注的研究焦点之一[4]。血管紧张素转化酶（angiotensin I-convening enzyme，ACE）可抑制具有降压作用的缓激肽的分解，使血压升高。食源性ACE 抑制肽是一类大多源自食源性动物、植物、微生物等的天然蛋白多肽，可抑制ACE 活性，临床更安全、无不良反应，是目前ACE 抑制剂领域的新热点[5-6]。制备ACE 抑制肽的方法主要有蛋白酶酶解、分离提取、酸水解、发酵降解、化学法或脱氧核糖核酸（deoxyribonucleic acid，DNA）重组人工合成法等。其中酶解法为目前多肽制备的主要方法[7-8]，已在米渣、大豆、玉米、小麦等植物源蛋白制备ACE 抑制肽研究中取得了一定进展[9-11]。

抗氧化剂可以缓解自由基对机体产生的损伤，目前多为合成抗氧化剂，如丁基羟基甲苯、没食子酸丙酯、丁基羟基茴香醚等，虽然非常高效且成本低，但因其具有潜在毒性和致癌风险导致其难以在医药、食品工业中应用[12-14]。……