针灸干预呼吸机相关性肺炎模型大鼠及NETs机制的研究*

黄 杰 张巧梅 邓扬嘉

（1.湖南中医药大学，湖南 长沙 410036；2.贵州中医药大学，贵州 贵阳 550000；3.重庆市中医院，重庆 400011）

呼吸机相关性肺炎（VAP）指气管插管或气管切开患者接受机械通气48 h 后发生的肺炎，是导致患者脱机困难、住院时间延长、治疗费用增加的疾病［1-2］。研究发现：NETs 水平可作为反映肺组织损伤的重要指标［1-3］；肠源性感染患者感染状态可用NETs 水平来反映［1］。故我们推测，同样属于感染性疾病的VAP，NETs可能参与其发病机制。

针灸通过穴位刺激，具有疏通经络、扶正祛邪等作用［2］。艾灸通过温热刺激，激活穴位局部的热敏感免疫细胞、特异感受器等，达到温通温补的作用［3］。刘兵等提出针灸介入防治COVID-19 的可行性与可靠性，并提出了独特“针灸方案”［4］。研究发现在常规治疗基础上温和灸治疗呼吸机相关性肺炎的疗效显著，可减轻肺部感染［5］。本研究利用VAP 模型大鼠，初步探索针灸减少VAP 模型大鼠炎性反应的作用机制，为深入研究针灸、NETs抑制剂预防和治疗VAP患者的可能机制提供科学依据。现报告如下。

1 材料与方法

1.1 实验动物

SPF 级成年雄性健康大鼠，体质量（300±10）g，由成都药康生物科技有限公司提供，许可证号：SCXK（川）2020-034。SD 大鼠自购回后保持其自由饮水、进食，温度21～25 ℃，适应性喂养1 周后进入实验。实验设计经重庆威斯腾生物实验动物福利伦理委员会审议同意并批准。

1.2 试药与仪器

NETs 抑制剂（盐酸尼索西汀）。大鼠CITH3 酶联吸附测定试剂盒：江莱生物（中国，JL47058）。MPO 比色法测试盒：伊莱瑞特，武汉（CAT：E-BC-K074-M）。Sytox Green：美国Thermo Fisher（S7020）。PBS：上海生工，中国（B040100）。RPMI-1640 培养基：美国Gibco（A4192301）。一次性毫针（华佗牌，0.25 mm×25 mm），艾条（南阳市汉艾艾制品有限公司）。……