川芎蛋白-葡聚糖共聚物的制备工艺优化及其抗氧化性

王海燕，李佳璇，韦利芬，阮婧华，唐东昕，辛加敏，查鑫

（1.贵州中医药大学 药学院，贵州 贵阳 550025；2.贵州中医药大学第一附属医院，贵州 贵阳 550001）

川芎蛋白（Ligusticum chuanxiong protein，LCP）为伞形科植物川芎的干燥根茎的分离蛋白。前期研究表明，LCP 提取率较高，且具有较好的抗氧化能力，但其溶解度较差，限制了其作为天然抗氧化剂在食品行业的应用[1]，所以有必要对LCP 进行有效地改性处理。相比物理法（高压加工、高压均质化和高强度超声）和酶法（谷氨酰胺转胺酶、氧化酶和酶修饰）的改性方式，糖基化改性被称为“绿色工艺”，是自发进行的反应，无需添加化学物质，具有绿色、安全的优势。反应实质是蛋白质氨基与还原糖羰基的共价结合[2]，使得糖基化共聚物同时具有蛋白质的大分子特性和多糖的亲水特性，从而改善蛋白质溶解度，提高蛋白质的抗氧化性。

葡聚糖（dextran，Dex）是一种中性多糖，具有还原性，是糖基化反应的必要条件之一，并且中性电荷可抑制蛋白质与多糖之间静电络合的形成[3]。其葡萄糖残基由α-1，6 键连接成线性链，具有很高的灵活性，可与蛋白质紧密缠绕，为糖基化下的分子间聚集提供强大的空间位阻[4]，是制备蛋白质-多糖共聚物的理想材料。本研究以接枝度（degree of grafting，DG）为评价指标，通过Box-Behnken 响应面法优化川芎蛋白-葡聚糖共聚物（glycosylated Ligusticum chuanxiong protein，GLCP）制备条件，并对在最优条件下所得的GLCP 进行抗氧化性研究。

1 材料与方法

1.1 材料与试剂

川芎：四川千方中药股份有限公司；葡聚糖、考马斯亮蓝R250、四硼酸钠、邻苯二甲醛、溴酚蓝：上海阿拉丁生化科技股份有限公司；……