血清25-羟维生素D 和白细胞介素-22 对急性肺炎患儿病情的诊断价值

陈 喻 温友利 余建洪 张肃川

肺炎是5 岁以下儿童常见死亡原因［1］。虽然大多数儿童病情易于控制，但其中一小部分患儿会发展为严重疾病并可能导致死亡［2］。早期发现有助于更加积极的转诊和治疗，降低病死率。因此早期识别十分重要。儿童微量营养素在肺炎的临床管理中具有重要作用［3-4］，25-羟维生素D［25-hydroxyvitamin D，25（OH）D］可调节免疫和炎症反应［5］，补充25（OH）D 是预防和治疗肺炎的一种潜在策略。在肺炎患儿中进行的25（OH）D 补充试验不多，且结果不一致［6-7］。白细胞介素-22（Interleukin-22，IL-22）由辅助性T17 细胞等产生［8］，在肺炎中起保护作用［8-9］。关于25（OH）D、IL-22与急性重症肺炎患儿病情的关系目前研究较少，本研究检测肺炎患儿血清25（OH）D、IL-22 水平，并分析二者诊断患儿病情的价值，旨在为有严重病情发生风险患儿的早期识别提供理论依据。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2021 年3 月至2022 年3 月自贡市第一人民医院收治的96 例急性重症肺炎患儿作为重症肺炎组，男患儿50 例，女患儿46 例；年龄1～10岁，平均（3.24±0.25）岁；经病原学检查多为金黄色葡萄球菌及肺炎链球菌，部分患儿伴支原体感染，合并胸腔积液、败血症、肝损伤及心肌损害等。根据危重病例评分法［10］分为非危重症组（＞90 分，69 例）和危重症组（≤90 分，27 例）。纳入标准：①符合重症肺炎［11］诊断标准者；②监护人知情同意；③支气管镜适应证者。排除标准：①合并智力障碍者；②合并先天性疾病者；③哮喘者。另选96 例普通肺炎患儿作为普通肺炎组，其中男患儿51 例，女患儿45 例；年龄1～11 岁，平均（3.33±0.31）岁，经病原学检查多为肺炎链球菌，无并发症。纳入标准：符合普通肺炎［11］诊断标准；其他纳入排除标准同重症肺炎组。选取96 例体检健康儿童为健康对照组，其中男患儿53 例，女患儿43 例；年龄1～9 岁，平均（3.31±0.62）岁。3 组对象性别、年龄比较，差异无统计学意义（P＞0.05）。本研究经医院伦理委员会同意（批准文号：20210119003）。

1.2 方法

1.2.1 血清样本采集 所有儿童入组后翌日清晨使用EDTA 抗凝管采集5 mL 静脉血，2 500 r/min 离心10min（30 min 内进行），取上层无杂质血清，-80℃环境保存待测。

1.2.2 血清25（OH）D 和IL-22 水平检测 25（OH）D以化学发光微粒子免疫检测法进行，IL-22 水平检测以酶联免疫吸附法（enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA）进行，试剂盒购自赛默飞（中国），操作严格遵守试剂盒规范步骤。

1.2.3 急慢性健康状况评分Ⅱ（Acute and chronic health status score II，APACHE Ⅱ评分）、序贯器官衰竭评分（Sequential organ failure score，SOFA 评分） 患儿入组后第2 天，按照APACHE Ⅱ评分［12］（急性生理评分、年龄评分、慢性健康评分3 项之和，总分71 分，≥15分为重症，＜15 分为非重症，得分越高则代表病情越严重）、SOFA 评分［13］（呼吸系统、血液系统、肝脏系统、心血管系统、神经系统、肾脏系统6 大类，每项0～4 分，分值越高，病情越严重、预后越差）所需数据，检测相关指标［动脉压、体温、血常规、血气分析、C 反应蛋白（Creactive protein，CRP）、降钙素原（procalcitonin，PCT）、血生化、尿量及格拉斯哥昏迷评分等］，依据APACHE Ⅱ评分、SOFA 评分的评估条件进行。

1.3 观察指标 比较重症肺炎组、普通肺炎组、健康对照组血清25（OH）D、IL-22、APACHE Ⅱ评分及SOFA 评分情况；比较重症患儿不同病情血清25（OH）D、IL-22、APACHE Ⅱ评分及SOFA 评分情况；分析重症患儿血清25（OH）D、IL-22 与APACHE Ⅱ评分、SOFA 评分的相关性；探讨各指标及指标联合预测胸腔积液的诊断效能和最佳诊断界值。

1.4 统计学方法 应用SPSS 25.0 软件对数据进行统计分析，计量资料均符合正态分布以±s表示，两组间均数比较采用独立样本t检验，多组间比较采用单因素方差分析，两两比较SNK-q检验；采用Pearson 法分析重症肺炎患儿血清25（OH）D、IL-22 水平与APACHEⅡ评分、SOFA 评分的相关性；MedCalc 软件绘制25（OH）D、IL-22 联合预测的曲线下面积（area under curve，AUC），以AUC＞0.5 作为有无预测价值的指标界点，AUC＞0.9 时认为具有较高的诊断价值。以P＜0.05 为差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 3 组对象血清25（OH）D、IL-22 水平、APACHE Ⅱ评分及SOFA 评分比较 3 组血清检测结果、APACHEⅡ评分及SOFA 评分进行比较，差异均有统计学意义（P＜0.05）。重症肺炎组血清25（OH）D、IL-22 水平均高于普通肺炎组、健康对照组，差异有统计学意义（P＜0.05），APACHE Ⅱ评分及SOFA 评分均高于普通肺炎组，差异有统计学意义（P＜0.05）。见表1。

表1 3组对象血清25(OH)D、IL-22、APACHE Ⅱ评分及SOFA评分比较（±s）

表1 3组对象血清25(OH)D、IL-22、APACHE Ⅱ评分及SOFA评分比较（±s）

注：25(OH)D 为25-羟维生素D，IL-22为白细胞介素-22，APACHE Ⅱ评分为急慢性健康状况评分Ⅱ，SOFA评分为序贯器官衰竭评分，与健康对照组比较，①P＜0.05；与普通肺炎组比较，②P＜0.05。

组别健康对照组普通肺炎组重症肺炎组F/t值P值例数96 96 96 25（OH）D（ng/mL）30.15±5.12 24.48±5.37①18.66±5.90①②105.785＜0.001 IL-22（pg/mL）79.36±22.93 45.25±15.64①31.05±8.35①②211.341＜0.001 APACHE Ⅱ评分（分）-8.13±2.58 16.97±5.17②14.990＜0.001 SOFA评分（分）-2.36±0.66 6.89±1.54②26.491＜0.001

2.2 重症患儿不同病情血清25（OH）D、IL-22 水平、APACHE Ⅱ评分及SOFA 评分比较 危重组血清25（OH）D、IL-22 水平低于非危重组，APACHE Ⅱ评分及SOFA 评分高于非危重组，差异有统计学意义（P＜0.05）。见表2。

表2 重症患儿不同病情血清25(OH)D、IL-22、APACHE Ⅱ评分及SOFA评分比较（±s）

表2 重症患儿不同病情血清25(OH)D、IL-22、APACHE Ⅱ评分及SOFA评分比较（±s）

注：25(OH)D为25-羟维生素D，IL-22为白细胞介素-22，APACHE Ⅱ评分为急慢性健康状况评分Ⅱ，SOFA评分为序贯器官衰竭评分。

组别危重组非危重组t值P值例数27 69 25（OH）D（ng/mL）14.61±4.12 20.24±6.61 4.116＜0.001 IL-22（pg/mL）24.05±6.79 33.79±8.96 5.098＜0.001 APACHE Ⅱ评分（分）20.89±6.68 15.43±4.58 4.585＜0.001 SOFA评分（分）8.99±2.29 6.07±1.25 8.007＜0.001

2.3 重症患儿血清25（OH）D、IL-22 与APACHE Ⅱ评分及SOFA 评分相关性分析 重症患儿血清25（OH）D与APACHE Ⅱ评分及SOFA 评分呈负相关（r=-0.521、-0.484，P＜0.05），血清IL-22 与APACHE Ⅱ评分及SOFA 评分呈负相关（r=-0.614、-0.419，P＜0.05）。见表3。

表3 重症患儿血清25(OH)D、IL-22、APACHE Ⅱ评分及SOFA评分相关性分析

2.4 血清25（OH）D 和IL-22 诊断危重症的价值 以血清25（OH）D 和IL-22 指标作为检验变量，将危重组与非危重组作为参考标准，对上述指标预测重症肺炎患儿出现危重症进行ROC 曲线分析，结果显示，25（OH）D 对危重症诊断的AUC 为0.745，截断值为19.46 ng/mL，其灵敏度、特异度分别为92.59%、53.62%；IL-22 对危重症诊断的AUC 为0.851，截断值为26.79 pg/mL，其灵敏度、特异度分别为96.77%、60.87%；二者联合对危重症诊断的AUC 为0.906，高于二者单独诊断（Z联合vs 25（OH）D=3.335、P=0.001；Z联合vs IL-22=1.972、P=0.048），其灵敏度、特异度分别为96.77%、78.26%。见表4、图1。

图1 血清25（OH）D和IL-22诊断危重症的ROC曲线

表4 血清25(OH)D和IL-22诊断危重症的价值

3 讨论

肺炎作为一种儿科常见疾病，易进展为重症，重症肺炎病情恶化快，并发症较多，早期发现对于病情控制及临床诊疗十分重要。一些传统指标如C 反应蛋白、白细胞计数等在免疫功能不完善的患儿机体中常有较大生理波动，用于评估病情严重程度具有一定局限性。因此，需要寻找新的肺炎患儿病情诊断的生物标志物。

研究表明，出生时25（OH）D 缺乏与出生后第1 年内急性呼吸道感染（非肺炎）的频繁发作有关［14-15］。秦欣等［16］发现25（OH）D 与哮喘关系密切，且与患者肺功能损伤有关。25（OH）D 与患儿免疫功能的提高关系密切［17］。本研究中，重症肺炎组血清25（OH）D 低于普通肺炎患者及健康对照组，证实25（OH）D 水平的降低与肺炎严重程度有关，与既往研究［18］结果类似。分析原因，25（OH）D 可以刺激和调节细胞介导的免疫反应，具有一定免疫调节作用，与免疫功能的升高有关，且25（OH）D 通过调节宿主防御机制以控制免疫反应，并可抑制炎性细胞因子的表达，这些因子与可导致危及生命的肺部炎症和氧合受损有关。同时，重症肺炎组中，危重患儿血清25（OH）D 水平较非危重患儿降低，且重症肺炎患儿血清25（OH）D 水平与APACHE Ⅱ评分及SOFA 评分均呈负相关，APACHE Ⅱ评分及SOFA 评分均是肺炎病情程度评估的方便实用且无创的可靠方法。ROC 曲线分析结果显示，血清25（OH）D 水平诊断重症肺炎患儿危重症的AUC 为0.745，具有一定的诊断价值，但特异度不高，单独诊断具有局限性。

IL-22 主要在组织保护和修复中发挥作用，通过β-防御素、S100 蛋白等的表达增加先天防御，维持跨上皮屏障功能并增强组织再生［19］；IL-22 与肺黏膜免疫和体内平衡有关［20］。本研究中，重症肺炎组血清IL-22水平升高，提示IL-22 与肺炎患儿病情发生发展有关，这可能与IL-22 在黏膜免疫中产生抗微生物肽β-防御素和S100 蛋白等有关。危重组血清IL-22 低表达，IL-22 与APACHE Ⅱ评分及SOFA 评分均呈负相关，表明IL-22 与重症患儿的病情进展有关。ROC 曲线显示，IL-22 与25（OH）D 共同诊断危重症患儿的AUC 为0.906，诊断价值较高，具有一定临床应用价值。

综上所述，25（OH）D 与IL-22 在肺炎患儿血清中低表达，二者联合用于重症肺炎患儿病情的评估价值较高。但本研究纳入病例数较少，关于二者参与肺炎患儿病情进展的具体机制后续仍需加大样本量继续研究，为肺炎患儿病情的早日控制及时诊疗提供依据。