氯化钴模拟法构建绒毛外滋养细胞缺氧模型*

尹春月,龙 禹

(广西医科大学第一附属医院妇产科,南宁 530021)

整个妊娠期胎盘微环境中的氧气水平不是恒定的,妊娠早期生理性氧张力为2%～3%,妊娠中期和晚期为6%～8%[1]。这个缺氧阶段与胎盘发育的最关键阶段重叠,即胚泡植入、绒毛外滋养细胞(extravillous trophoblast,EVT)侵袭和螺旋动脉重塑。在胎盘早期发育过程中,细胞滋养层细胞(cytotrophoblast,CTB)增殖并形成细胞柱,该细胞柱远端的CTB在孕早期开始分化为两种唯一与母体接触且具有迁移和侵袭能力的EVT,包括血管内绒毛外滋养细胞(endovascular extravillous trophoblast,eEVT)和间质绒毛外滋养细胞(interstitial extravillous trophoblast,iEVT),eEVT侵入螺旋动脉形成EVT栓,阻止母体血液流入绒毛空间,从而创造持续10周的低氧妊娠环境[2]。在妊娠头3个月末,这些栓子逐渐消散,eEVT开始沿着血管向近端迁移,将螺旋动脉重塑成低阻力高流速的血管,逐渐将局部子宫氧张力水平升高并恢复到其“正常”生理水平;iEVT则侵袭至子宫肌层的上1/3处。这种缺氧缺血/再氧合过程是正常的、生理的,并且对于正常的胎儿和胎盘发育至关重要[3]。氧张力水平的变化与胚胎发育结局密切联系。先兆子痫、早产、复发性流产等妊娠相关疾病的发生发展与氧合异常有关[4]。

氯化钴(cobalt chloride,CoCl2)已被广泛应用于模拟缺氧环境的化学试剂,能产生与缺氧缺血相似的反应[5],其诱导的化学性缺氧模型具有稳健性好、可重复性高的优点。本研究拟分离和培养原代人早孕EVT,探讨其在CoCl2不同浓度和处理时间条件下的增殖、活力及缺氧相关反应基因的变化,以建立一个可靠、检测方便的EVT细胞缺氧模型,为探索及防治EVT侵袭缺陷与缺氧的疾病奠定体外实验的细胞学基础。……