超声造影参数联合血清FGF23和FGFR1水平检测对乳腺癌的临床诊断价值研究

荣 鹿，周 敏，于鲁欣，吕 娟，万 静（新疆维吾尔自治区人民医院超声科，乌鲁木齐 830002）

近年来，我国乳腺癌发病率和死亡率分别位列肿瘤第1位和第4位，由此引起的负担日益加重。我国女性乳腺腺体偏小、致密型腺体多见，超声造影技术成为乳腺疾病首选的影像学检查方法[1-2]。新生血管的生成可加快肿瘤的生长与转移，促进肿瘤恶性进展，超声造影技术对血流具有高敏感性，可显示微小血管灌注状态，为肿瘤的诊断提供可靠依据[3]。近年来多有超声造影参数联合血清标志物用于评估肿瘤治疗效果及肿瘤诊断可提高诊断效能的报道[4]。成纤维细胞生长因子-23（fibroblast growth factor-23，FGF23）参与肿瘤血管形成，在恶性肿瘤中分泌可引起骨软化症或致癌性低磷性骨软化症，研究显示，在乳腺癌转移灶中FGF23表达水平升高[5]。成纤维细胞生长因子受体1（fibroblast growth factor receptor 1，FGFR1）可参与调节肿瘤细胞增殖、血管生成等，在乳腺癌等多种肿瘤中高表达，成为肿瘤的治疗靶点[6]。研究显示，在三阴乳腺癌中，FGFR1高表达，且与TNM分期、淋巴转移、微血管密度水平相关[7]。但目前关于超声造影参数联合FGF23，FGFR1诊断乳腺癌的研究较少，因此本研究探讨超声造影参数联合血清FGF23，FGFR1检测对乳腺癌的诊断价值，旨在为乳腺癌的诊治提供理论参考。

1 材料与方法

1.1 研究对象 选择2020年8月～2022年6月在新疆维吾尔自治区人民医院就诊的87例乳腺癌患者作为观察对象（恶性组），均为女性，年龄36～72（53.20±12.50）岁，病理类型：浸润性导管癌54例，乳头状癌15例，浸润性小叶癌12例，髓样癌4例，乳腺肉瘤2例。选取同期90例乳腺良性病变患者作为良性组，均为女性，年龄32～74（52.8±12.72）岁，病理类型：导管内乳头状瘤17例，乳腺纤维瘤32例，乳腺腺病19例，乳腺增生8例，良性分叶状瘤9例，乳腺囊肿5例。纳入标准：①恶性组符合乳腺癌诊断标准[8]，且经病理学诊断证实；②单侧病灶，均行超声造影检查，无手术、放化疗等治疗史；③良性组经病理学诊断证实。排除标准：①伴有其他类型恶性肿瘤或转移复发者；②并发其他乳腺弥漫性病变者；③心肝肾功能不全者；④临床资料不全者。本研究经本院伦理委员会批准，伦理批号2020-0722。

1.2 仪器与试剂 LOGIQ E9超声诊断仪（美国GE公司），法国声科声蓝E超诊断仪（上海聚慕医疗器械有限公司），人FGF23（货号：EH3058）和人FGFR1（货号：EH0715）ELISA试剂盒武汉菲恩生物科技有限公司）。

1.3 方法

1.3.1 超声造影检查：采用LOGIQ E9超声诊断仪和法国声科声蓝E超诊断仪，探头频率3～9MHz，机械指数为0.06～0.08，造影剂为注射用六氟化硫冻干粉。患者采取仰卧位，充分暴露双乳及腋下，先常规超声检查患者的肿瘤位置、大小、形态、回声、肿瘤数目及血流情况，选取病灶最佳切面切入造影状态，用5ml生理盐水稀释六氟化硫粉末，经肘静脉推注造影剂2.4ml，随后注入生理盐水5.0ml冲管，观察病灶造影声像图情况并记录，动态图像存储时间为2min。使用Philips QLab定量分析软件对图像进行分析，选取乳腺癌病灶及正常区域作为感兴趣区，获取时间-强度曲线（time-intensity curve，TIC），记录达峰时间（time to peak，TTP）、峰值强度（peak intensity，PI）、曲线下面积（area under curve，AUC）等。

1.3.2 酶联免疫吸附法（enzyme linked immunosorbent assay，ELISA）检测血清中FGF23和FGFR1水平：采集患者入院后治疗前清晨空腹静脉血5ml，离心机以3 000r/min，离心半径为10cm，离心20min后采集血清，-80℃冰箱保存待检。采用ELISA方法检测血清FGF23和FGFR1水平，具体操作步骤严格按照试剂盒说明书进行。

1.4 统计学分析 采用SPSS 25.0进行统计学分析。经正态分布检验，计量资料均符合正态分布，以均数±标准差（±s）表示，两组间比较采用独立样本t检验；Pearson法分析乳腺癌患者血清FGF23和FGFR1水平与超声造影参数的相关性；ROC曲线分析超声造影参数、血清FGF23和FGFR1对乳腺癌的诊断价值，ROC曲线下面积比较采用Z检验。P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组患者超声造影参数比较 见表1。恶性组的超声造影PI（15.36±3.41dB vs 12.54±2.83dB）和AUC（382.69±90.51dB/s vs 262.95±75.34dB/s）高于良性组，TTP低于良性组（18.46±4.31s vs 24.23±5.25s），差异有统计学意义（t=5.934,9.579,7.977,均P=0.000）。

表1 超声造影参数、血清FGF23和FGFR1对乳腺癌的诊断效能分析

2.2 两组患者血清FGF23和FGFR1水平比较 恶性组患者血清FGF23（t=119.28±26.41pg/ml vs 86.41±20.35pg/ml）和FGFR1（11.36±3.42ng/ml vs 7.24±2.26ng/ml）水平高于良性组，差异有统计学意义（t=9.294,9.486,均P=0.000）。

2.3 乳腺癌患者血清FGF23和FGFR1水平与超声造影参数的相关性 相关性分析显示，乳腺癌患者血清FGF23，FGFR1水平与PI，AUC呈正相关（r=0.493,0.561; 0.603,0.491,均P=0.000），与TTP呈负相关（r=-0.572,-0.545,均P=0.000）。

2.4 超声造影参数、血清FGF23和FGFR1对乳腺癌的诊断价值 见表1，图1。超声造影参数联合血清FGF23，FGFR1诊断乳腺癌的ROC曲线下面积为0.971，联合诊断效能明显高于单独诊断，差异有统计学意义（Z=6.478，5.558，4.839，4.780，4.943，均P＜0.05）。

图1 超声造影参数联合血清FGF23，FGFR1对乳腺癌的诊断价值

3 讨论

乳腺癌的发病率在女性恶性肿瘤中占23%，是女性癌症病死第二大原因，该病发生较为隐匿，多数患者确诊时已至中晚期，患者预后较差，死亡率较高，因此有效诊断乳腺癌，并给予及时治疗，对于改善患者预后具有重要意义[9-10]。

报道显示，新血管生成发生在肿瘤内形态学改变前，尤其是恶性肿瘤，细胞生长速度较快，对氧气、糖类等营养物质需求增多，生成大量血管以满足自身的需求，新血管生成与肿瘤的侵袭与转移密切相关，因此监测血管生成情况有助于肿瘤的早期诊断[11]。超声造影技术具有无创、操作简便等优势，可用于肿瘤的早期筛查。超声造影可动态观察病变血流灌注情况，清晰地反映乳腺肿瘤组织新生畸形血管的数量、直径及肿瘤深度等，尤其对低流速、微小血管具有较高敏感性，可为鉴别肿瘤的性质、术后复发转移提供依据[12]。超声造影TIC中PI可反映血管阻力与微血管密度，AUC可反映病灶组织血流灌注及通透，恶性肿瘤血管密度更高，且血管通透性高，血管壁较薄，超声造影显示PI越高，TTP越短[13]。本研究结果显示，恶性组的超声造影PI和AUC较良性组高，TTP较良性组低，提示乳腺癌组织中血流灌注更多，与报道结果类似[13]，与肿瘤特性相符。本研究还显示超声造影参数PI，TTP和AUC截断值为13.09 dB，21.14s和338.99 dB/s时，诊断乳腺癌的曲线下面积分别为0.685，0.766，0.806，敏感度与特异度均不高，表明超声造影技术在诊断上仍存在一定的局限性。

报道显示，超声造影参数联合血清标志物可提高对肿瘤的诊断效能[14]。FGF23是成纤维细胞生长因子家族成员，在乳腺、胃、肝或肌肉等组织中均可观察到其表达。FGF23通过肾脏和维生素D的反馈回路在磷酸盐稳态中起着至关重要的作用，在多发性骨髓瘤与前列腺癌中表达水平升高，在乳腺癌中，FGF23水平升高可引起骨软化症[15-16]。研究表明，在胃癌组织中FGF23高表达，且与Ki-67增殖指数具有正相关性，体外实验研究显示，FGF23可促进胃癌细胞增殖与侵袭[17]。QUINTELA-FANDINO等[18]通过观察乳腺癌患者血浆FGF23变化水平来评估肿瘤药物治疗效果安全性，本研究结果显示，乳腺癌恶性组患者血清FGF23高表达，且与造影参数PI，TTP和AUC显著相关，提示造影参数的变化可能预示着血清FGF23水平的变化，分析其可能的原因，FGF23表达高的肿瘤中血管增长快速，造影参数可客观地反映肿瘤恶性程度。ROC曲线分析显示，FGF23可作为诊断乳腺癌的血清指标之一，但单独应用的敏感度、特异度和曲线下面积均较低，临床应用需联合超声造影参数或其他血清指标，以提高诊断效能。

FGFR1属于酪氨酸激酶受体家族成员，通过诱导促有丝分裂调节肿瘤细胞增殖、分化、迁移、上皮间质转化和血管生成，研究表明，FGFR1在乳腺癌、头颈部鳞状细胞癌、胃癌等多种肿瘤中表达升高，抑制FGFR1表达可显著抑制肿瘤细胞周期及细胞增殖[19-20]。研究发现，检测外周血中FGFR1水平可用于肿瘤诊断、临床疗效评定及患者预后评估[21-22]。FGFR1的致癌作用通常是基因组异常的结果，如基因扩增、激活突变、基因融合，或通过失调的自分泌/旁分泌信号传导，涉及FGF配体[23]。在雌激素受体阳性乳腺癌中，FGFR1过表达与抗雌激素治疗耐药有关[24]。本研究结果显示，恶性组患者血清FGFR1水平较良性组高，且与造影参数有一定联系，提示超声造影检查和血清FGFR1水平检测共同进行，可能更有利于鉴别乳腺良恶性病变。通过绘制ROC曲线并分析，发现FGFR1单独诊断乳腺癌的效能较低，而超声造影参数联合血清FGF23，FGFR1水平诊断乳腺癌的AUC为0.971，高于超声造影参数、FGF23和FGFR1单独检测，具有较高的诊断效能，提示超声造影参数联合血清FGF23，FGFR1可提高乳腺癌的诊断效能，有一定临床应用价值，临床可考虑在超声造影的基础上进行血清因子FGF23，FGFR1检测，联合诊断乳腺癌，提高准确率。

综上所述，超声造影参数联合血清FGF23，FGFR1对乳腺癌具有较高诊断价值，可为乳腺癌的临床诊治提供参考。但本研究纳入的样本量有限，超声造影参数联合血清FGF23，FGFR1对乳腺癌诊断价值的准确性有待验证，仍需将来纳入更多的样本量，以获得更科学的结论。