LC-MS/MS 法测定食品接触材料中12 种N-亚硝胺迁移量的不确定度分析★

周 雷，魏小春，陈海园

（1.温州方圆检验认证有限公司，浙江 温州 325007；2.温州市质量技术检测科学研究院，浙江 温州 325007）

0 引言

我国食品接触材料新国标将食品接触材料分为9 大类[1]。其中食品接触用橡胶材料因耐腐蚀、高弹性、对流体渗透性低等优点，常被应用于婴儿用牙胶，碗勺和奶嘴等，但由于使用加工助剂等原因，会使有毒有害的物质从橡胶材料中迁移到食品中，如亚硝胺等[2]。

N-亚硝胺是含有-N-N=O 官能团的物质，引发多种类动物不同器官的肿瘤[2]。对于其测定的检测手段有薄层层析法、紫外光谱法、热能分析法、质谱法等[3-5]，其中LC-MS/MS 法是以液相色谱-串联质谱仪为检测仪器，该方法前处理简便、可行性高、回收率好，避免了N-亚硝胺因有机溶剂洗脱及浓缩造成的损失，也避免了出现假阳性的结果。因此，对该方法的测定量不确定度进行评定来验证检测结果的可信度，是非常有必要的。

1 材料与方法

材料为橡胶奶嘴。

前处理采用人工模拟唾液[6]，将N-亚硝胺迁移到含亚硝酸盐的人工唾液盐溶液中，测试溶液中的N-亚硝胺含量。

主要仪器采用液相色谱-质谱联用仪；试剂为甲醇、甲酸、超纯水；标准品为12 种N-亚硝胺混标，以甲醇作溶剂配制工作曲线。

前处理方法及仪器条件依据文献[7]中的规定。

2 结果与分析

2.1 模型

测定奶嘴中中亚硝胺含量的模型公式见式（1）：

式中：A 为亚硝胺含量，mg/kg；C 为由标准工作曲线所得的试样溶液中亚硝胺的质量浓度，μg/L；V 为定容体积，mL；m 为样品质量，g。

2.2 不确定度来源分析

分析试验过程和数学模型，不确定度来源如下[8]：称重；标准溶液纯度；配制标准储备溶液；配制标准工作曲线；试液定容体积；样品重复测定；拟合工作曲线。

2.3 测定结果不确定度分量的评定

2.3.1 样品称量

2.3.2 标准溶液实验使用的N-亚硝胺各物质浓度为100 mg/L。根据标准溶液检测证书，其不确定度urel(2)见表1。

表1 各分量相对标准不确定度

2.3.3 标准工作溶液

标准溶液稀释得到标准储备溶液。以1 mL 移液器[10]移取1.000 mL 标准溶液至10 mL 单标容量瓶[11]中，以甲醇定容，得到10.0 mg/L 的标准储备溶液1。从标准储备液1 中，以100 μL 移液器移取100 μL至10 mL 单标容量瓶中，再以甲醇定容至10 mL，得到100 ng/mL 标准储备溶液2。则配制过程中产生的相对标准不确定度分量μrel(3)为：

2.3.4 标准工作溶液曲线

将标准储备液2 进行稀释，配置成标准工作溶液曲线，使用时将混标工作溶液用甲醇稀释，制作质量浓度为1.0、2.0、5.0、10.0、20.0 μg/L 的标准工作曲线。按照移液器检定规程，按照均匀分布处理配制过程中产生的相对标准不确定度为：urel(4.1)=0.017 40；urel(4.2)=0.015 63；urel(4.3)=0.014 23；urel(4.4)=0.014 23；urel(4.5)=0.015 36。

2.3.5 试液定容体积

以100 mL 量筒移取50 mL 的模拟唾液，试液定容过程中引入的标准不确定度

2.3.6 测量重复性

由于样品中未检出N-亚硝胺的迁移量，故对样品进行加标后重复性测试7 次。采用贝塞尔（Bessel）公式，见式（2）：

具体结果见表1。

2.3.7 标准工作曲线拟合

配制浓度为1.0、2.0、5.0、10.0、20.0 μg/mL 的标准工作溶液1～5，进行上机测试。

由校准曲线拟合产生的标准不确定度可由式（3）表示：

其中，s 计算公式见（4）：

由校准曲线拟合产生的相对标准不确定度可由式（5）表示：

12 种亚硝胺物质相对标准不确定度urel(7)见表1。

2.4 合成不确定度的计算

12 种亚硝胺物质合成相对标准不确定度按照式（6）进行计算：

样品中亚硝胺物质含量A 的计算公式见式（7）：

式中：A1为试样溶液中亚硝胺的质量浓度，μg/L。

合成标准不确定度计算公式见式（8）：

当置信度为95%，置信因子k=2，扩展不确定度计算为式（9）：

具体结果见表2。

表2 12 种亚硝胺不确定度计算结果

3 结语

合成标准不确定度的来源依次为：工作曲线的拟合、标准曲线的配制、样品重复性测量以及标准溶液的纯度、标准溶液的配制、移液和定容以及因称量产生的不确定度，其中工作曲线的拟合、标准曲线的配制、样品重复性测量以及标准物质的纯度是不确定度的主要来源，影响最小的是因称量产生的不确定度，可以忽略不计。