35%异菌脲·腐霉利悬浮剂的液相色谱法分析

陈丽金，陈小龙，袁程飞

（广州市农业科学研究院，广东 广州 510308）

异菌脲（Iprodione），3-（3，5-=氯苯基）-1-异丙基氨基甲酰基乙内酰脲，是一种触杀型杀菌剂，具有高效广谱、植物保护性等特点。可以同时作用于孢子、菌丝体、菌核，能够有效抑制病菌孢子萌发以及菌丝生长[1]。腐霉利（procymidone）是一种新型低毒性的杀菌剂。可以通过抑制菌体内甘油三酯的合成，来防治农作物的病虫害[2]。

近年来有不少关于异菌脲、腐霉利农药的含量分析方法的报道[3-5]，但对异菌脲和腐霉利复合农药产品的液相色谱分析方法未见公开报道。本文是使用相同的液相色谱条件来定量分析35%异菌脲·腐霉利悬浮剂。由实验结果可知，本方法可以有效定量分析农药产品中的异菌脲和腐霉利，并且有较好的回收率、准确度和精密度。

1 实验部分

1.1 实器和试剂

仪器：高效液相色谱仪配紫外检测器，安捷伦1260；Waters Symmetry C18 液相色谱柱；分析天平，精确至0.000 1 g，梅特勒；超声波清洗器，昆山市超声仪器有限公司；超纯水机，Millipore；乙腈，HPLC；磷酸，GR；水，超纯水；异菌脲标准物质，质量分数99.4%，沈阳化工研究院有限公司；腐霉利标准物质，质量分数99.0%，沈阳化工研究院有限公司。

1.2 色谱操作条件

液相色谱柱：C 18 150 mm×4.6 mm，粒径5 μm；流量：1.0 mL/min；流动相：V（乙腈）∶V（磷酸，0.04%）=40∶60；柱温：室温（温差变化不大于2 ℃）；检测波长：220 nm；进样体积：5 μL。异菌脲出峰时间约5.9 min，腐霉利出峰时间约6.5 min。异菌脲·腐霉利的典型液相色谱图见图1、图2。

图1 异菌脲·腐霉利标准的液相色谱图

图2 异菌脲·腐霉利试样的液相色谱图

1.3 测定方法

1.3.1 标准溶液配制

分别准确称取0.10 g（精确至0.000 1 g）异菌脲和腐霉利标准物质置于50.0 mL 的容量瓶中，加入乙腈超声溶解并定容，摇匀。然后准确移取5.0 mL 上述溶液置于另一个50.0 mL 容量瓶中，加入乙腈定容，摇匀，最后使用0.45 μm 滤膜进行过滤，备用。

1.3.2 试样溶液的配制

称取约1.0 g（精确至0.000 1 g）异菌脲和腐霉利农药试样置于50.0 mL 容量瓶中，加入乙腈超声溶解并定容，摇匀。然后准确移取5.0 mL 上述溶液置于另一个50.0 mL 容量瓶中，加入乙腈定容，摇匀，最后使用0.45 μm 滤膜进行过滤，备用。

1.3.3 上机测定

采用上述方法条件，直至实验条件稳定后，连续注入多针标准溶液，等到相邻两针的峰面积相对变化小于1.2%后，按照标准溶液、试样溶液、试样溶液、标准溶液的顺序进行上机测定。

1.3.4 结果计算

根据两针试样溶液以及试样前后两针标准溶液中异菌脲（腐霉利）测得的面积分别进行平均。试样中异菌脲（腐霉利）质量分数按式（1）计算：

式中：A1为标准溶液中异菌脲（或腐霉利）峰面积的平均值；A2为试样溶液中异菌脲（腐霉利）峰面积的平均值；m1为异菌脲（腐霉利）标准的质量，g；m2为试样的质量，g；P 为标准中异菌脲（腐霉利）的质量分数，%。

2 结果讨论

2.1 溶剂和流动相的选择

根据相关文献和实验证明，异菌脲和腐霉利易溶于乙腈，而且具有稳定的化学性质。经过对不同组合进行实验研究，由实验结果可知：波长为220 nm 的情况下，流动相为V（乙腈）∶V（磷酸，0.04%）=40∶60时，异菌脲和腐霉利色谱峰可以有效分离，出峰较早，节省溶剂。因此采用V（乙腈）∶V（磷酸，0.04%）=40∶60 作为流动相。

2.2 方法的线性相关试验

分别准确称取异菌脲和腐霉利0.05、0.10、0.15、0.20、0.25、0.30 g（准确至0.000 1 g）的标准物质于6 个50.0 mL 容量瓶中，采用上述方法配制标准溶液母液。然后用移液管准确移取该母液5.0 mL 置于50.0 mL 容量瓶中，配制成6 个不同质量浓度的标准溶液。采用上述方法条件进行测定，可以得到6 个对应的峰面积。然后用质量浓度作为横坐标、峰面积作为纵坐标作图，可知异菌脲和腐霉利的线性回归方程分别为：y=1 940.92x+275.69，r=0.999 0；y=1 568.62x+105.31，r=0.999 7。

2.3 方法的精密度试验

准确称取5 个异菌脲·腐霉利悬浮剂试样，采用上述的方法条件下进行测定，由表1 可知，异菌脲的标准偏差是0.09，咪鲜胺的标准偏差是0.18，异菌脲的变异系数是0.93%，腐霉利的变异系数是0.79%。

表1 方法的精密度实验数据

2.4 方法的准确度实验

准确称取5 个异菌脲·腐霉利悬乳剂试样，加入大概等量的异菌脲和腐霉利标准物质，按上述的方法条件进行测定，由表2 可知，异菌脲平均回收率是99.53%，腐霉利平均回收率是99.63%。

表2 方法的准确度实验数据

3 结论

建立了定量分析异菌脲和腐霉利复合剂型农药中有效成分含量的同一液相色谱分析方法，并且考察了方法的回收率、准确度、精密度。由实验结果可知，本研究的方法简单快速，准确有效，节省成本，可以用于异菌脲和腐霉利复合制剂农药的定量分析。