老年下肢深静脉血栓患者血清Gas6、IL-1β、NETs水平与介入治疗效果的关系

吴邮电,李 宁

许昌医院介入科,河南许昌 461000

下肢深静脉血栓(DVT)属于血管外科疾病,可累及全身主干静脉,经皮导管介入溶栓治疗是其常用治疗手段,能够有效纠正血液循环,溶解血栓,但仍有部分患者疗效欠佳[1-2]。早期预测DVT患者介入治疗预后情况对调整治疗方案及改善患者预后尤为关键。白细胞介素-1β(IL-1β)是一种促炎性细胞因子,可通过激活炎症-免疫细胞,影响血管内皮细胞活性[3]。中性粒细胞胞外陷阱(NETs)在多种炎症及免疫系统中起重要调节作用,已有研究证实,其可加快血小板、红细胞凝结,促进纤维蛋白生成[4]。生长停滞特异性基因产物6(Gas6)是一种分泌型蛋白,其水平与动脉斑块高度和斑块总面积明显相关,这说明Gas6在动脉粥样硬化形成过程中发挥重要调控作用[5]。但有关血清Gas6、IL-1β、NETs与DVT患者介入治疗效果关系的研究较少见。因此,本研究通过分析Gas6、IL-1β、NETs与DVT患者介入治疗效果的关系,以期为疾病诊治提供参考依据,现报道如下。

1 资料与方法

1.1一般资料 选取2021年2月至2023年1月本院收治的120例老年DVT患者作为研究对象。纳入标准:符合DVT相关诊断标准[6],经下肢彩色多普勒超声检查确诊;年龄≥60岁;发病在14 d内且为单侧下肢血栓。排除标准:伴有下肢损伤或下肢血管病变;既往存在下肢骨折;有先天或获得性凝血障碍疾病史;存在精神障碍、意识模糊;合并严重肝肾功能不全;对介入治疗不能耐受;近6个月内服用过影响凝血功能、血小板功能的药物。根据治疗7 d后临床疗效将研究对象分为无效组(22例)和有效组(98例)。无效组中男15例,女7例;年龄65～75岁,平均(67.87±2.74)岁;体质量指数(BMI)18.7～24.1 kg/m2,平均(22.05±0.75)kg/m2;病因:创伤性关节炎10例,类风湿关节炎5例,膝骨关节炎7例。有效组中男61例,女37例;年龄65～77岁,平均(68.01±2.80)岁;BMI 18.5～24.0 kg/m2,平均(21.95±0.70)kg/m2;病因:创伤性关节炎40例,类风湿关节炎22例,膝骨关节炎36例。两组一般资料比较,差异无统计学意义(P>0.05),具有可比性。所有研究对象均知情同意本研究,并签署知情同意书,本研究经本院医学伦理委员会审批通过(伦理审批号:20201245)。

1.2疗效评价标准 参考《深静脉血栓形成的诊断和治疗指南(第三版)》[6]评价疗效:疼痛、肿胀消失,超声检查结果显示深静脉通畅,无血栓,血管壁光滑,静脉管径正常为治愈;活动后轻微疼痛,超声检查结果显示深静脉基本通畅,静脉管径正常,血栓明显缩小为显效;超声显示大部分血栓消失,深静脉部分再通,患肢周径缩小≥2 cm为有效;未达上述标准为无效。

1.3治疗方法 均经导管介入溶栓,患者取平卧位,股静脉穿刺健侧,进行下腔静脉造影检查,明确病变位置后,于下腔静脉处放置滤器,保证滤器顶端距深静脉开口距离为0.5～1.0 cm,经浅静脉留置针,选取适宜溶栓导管,置入血栓远心端,使末端与微量泵相连,以每次100 000～200 000 U尿激酶经溶栓导管持续微量泵入,于2 h内泵入完毕,间隔6 h进行下一次泵入,溶栓12 h后,进行静脉造影,随后每间隔24 h静脉造影1次,以便调整导管位置。待血栓2 d无变化或完全溶解时治疗停止,疗程5～7 d。

1.4检测方法 治疗前及治疗3、7 d后取3 mL空腹静脉血,离心处理,离心半径为10 cm,离心转速为3 000 r/min,离心时间为10 min,取上清液备用。采用酶联免疫吸附试验检测血清Gas6、IL-1β水平,MPO-DNA复合物捕捉酶联免疫吸附试验检测NETs水平,试剂盒均购自美国R&D SYSTEMS公司,所有操作严格遵循试剂盒说明书。

1.5观察指标 (1)比较两组治疗前及治疗3、7 d后血清Gas6、IL-1β、NETs水平;(2)分析Gas6、IL-1β、NETs与老年DVT患者介入治疗效果关系;(3)血清Gas6、IL-1β、NETs联合检测预测DVT患者介入无效的价值。

2 结 果

2.1两组血清Gas6、IL-1β、NETs水平比较 无效组与有效组Gas6、IL-1β、NETs水平存在时间与组间的交互效应,差异有统计学意义(F交互=15.214,P<0.001);两组Gas6、IL-1β、NETs水平均随着治疗时间变长而逐渐降低,差异有统计学意义(F=12.375、12.271、13.277,P<0.001);无效组Gas6、IL-1β、NETs水平均明显高于有效组,差异有统计学意义(F=23.537、22.851、23.213,P<0.001)。见表1。

表1 两组血清Gas6、IL-1β、NETs水平比较

2.2老年DVT患者介入治疗无效的影响因素分析 以老年DVT患者介入治疗效果为因变量(有效=0,无效=1),将治疗3、7 d后血清Gas6、IL-1β、NETs水平作为自变量,对自变量进行赋值(以120例研究对象检测结果的平均值为界:≤平均值=0,>平均值=1)。赋值如下,治疗3 d后:Gas6≤12.05 ng/mL=0,>12.05 ng/mL=1;IL-1β≤4.84 mg/L=0,>4.84 mg/L=1;NETs≤0.58=0,>0.58=1。治疗7 d后:Gas6≤9.86 ng/mL=0,>9.86 ng/mL=1;IL-1β≤2.96 mg/L=0,>2.96 mg/L=1;NETs≤0.32=0,>0.32=1。多因素Logistic回归分析结果显示,治疗3 d后血清Gas6>12.05 ng/mL、IL-1β>4.84 mg/L、NETs>0.58,治疗7 d后血清Gas6>9.86 ng/mL、IL-1β>2.96 mg/L、NETs>0.32是老年DVT患者介入治疗无效的危险因素(P<0.05)。见表2。

表2 多因素Logistic回归分析老年DVT患者介入治疗无效的影响因素

2.3血清Gas6、IL-1β、NETs联合检测预测DVT患者介入无效的效能 以治疗无效老年DVT患者为阳性样本,以治疗有效老年DVT患者为阴性样本,绘制ROC曲线。结果显示,治疗3 d后血清Gas6、IL-1β、NETs联合检测预测老年DVT患者治疗无效的曲线下面积(AUC)为0.904,灵敏度、特异度分别为81.82%、98.98%,联合检测的AUC明显大于单独检测(P<0.05);治疗7 d后血清Gas6、IL-1β、NETs联合检测预测老年DVT患者治疗无效的AUC为0.941,灵敏度、特异度分别为86.36%、87.76%,联合检测的AUC明显大于单独检测(P<0.05)。见表3、图1、图2。

表3 血清Gas6、IL-1β、NETs联合检测预测DVT患者介入无效的效能

图1 治疗3 d后血清Gas6、IL-1β、NETs预测DVT患者介入无效的ROC曲线

图2 治疗7 d后血清Gas6、IL-1β、NETs预测DVT患者介入无效的ROC曲线

3 讨 论

既往研究报道,炎症反应与DVT形成密切相关,一方面炎症反应可引起凝血因子大量生成,从而加快血液高凝状态形成,另一方面血栓生成又可加剧炎症反应[7-8]。IL-1β是一种促炎性细胞因子,广泛参与人体组织破坏、水肿形成等多种病理损伤过程,其可通过改变巨噬细胞、内皮细胞,以及聚集活化血小板、白细胞,加重凝血、纤溶系统失衡而促进血栓形成[9-10]。Gas6主要在巨噬细胞、内皮细胞及血管平滑肌细胞中表达[11],有研究通过分析864例静脉血栓栓塞患者血清Gas6水平,发现老年患者高Gas6水平与静脉血栓栓塞复发、大出血和病死风险明显相关[12]。严志强等[13]报道,非肿瘤DVT患者治疗前IL-1β水平明显高于健康人群,抗凝治疗后明显下降,但仍明显高于健康人群。在此基础上,本研究发现,治疗3、7 d后无效组血清Gas6、IL-1β水平均高于有效组,表明Gas6、IL-1β在DVT演变过程中发挥重要作用。考虑原因在于以下方面:IL-1β可诱导内皮细胞与血小板发生黏附,同时可促进中性粒细胞迁移并黏附内皮细胞,导致血液纤溶能力下降,从而引起血栓生成;Gas6可通过作用于GP Ⅱ b/Ⅲ a,磷酸化AKT和PI3K,启动“自内而外”信号转导机制,激活下游信号分子β3整合素,促进颗粒释放,使纤维蛋白原交连相近血小板,进而形成牢固血小板栓。本研究还发现,血清Gas6、IL-1β水平升高可影响老年DVT患者介入治疗效果,提示临床可于疾病早期动态监测血清Gas6、IL-1β水平变化情况,为评估病情变化、预测预后提供有效信息[14-15]。

NETs是由中性粒细胞颗粒和细胞外DNA、组蛋白组成的复合物,能够杀灭和捕获细胞外病原菌[16-17]。THAKUR等[18]报道,NETs可激活血小板和凝血级联反应,对诱导血栓生成具有促进作用。本研究结果表明,无效组治疗3、7 d后血清NETs水平高于有效组,且其水平与治疗效果呈负相关,与张银龙等[19]研究论点相近,说明血清NETs水平变化不仅与病情变化联系紧密,还能影响预后。推测原因,NETs可通过作用于凝血因子XⅡ、血管性血友病因子等分子,促进红细胞、血小板聚集及纤维蛋白形成;还可通过与组织因子相结合,激活外源性凝血途径[20]。已有相关研究证实,NETs可裂解、氧化血栓调节蛋白和组织因子通道抑制剂,导致体内天然抗凝物质降解失活,加剧凝血反应[21]。

此外,ROC曲线分析结果证实,血清Gas6、IL-1β、NETs对DVT患者介入治疗无效均具有良好预测价值,但可能目前还无法满足临床实际应用,仍有较大提升空间。为此,本研究创新性探讨3项指标联合检测的预测价值,结果发现,治疗7 d后,血清Gas6、IL-1β、NETs联合检测预测DVT患者介入治疗无效的AUC达0.941,较各项血清指标单独检测的AUC明显提高,可为临床提供更为可靠的诊断途径。

综上所述,血清Gas6、IL-1β、NETs水平变化对预后有明显影响,3项指标联合检测可作为预测DVT患者介入治疗效果的重要辅助途径。但本研究不足之处在于纳入样本量偏少,可能造成数据的偏倚,仍需后续扩大样本量进行进一步的验证。