AB-8大孔树脂-C18柱联用分离干腌牛肉抗氧化肽的研究

张迎阳,陈文涛,徐莹,孙承骏,邹林玲,邹平,满在伟

(常州大学 药学院/生物与食品工程学院,江苏 常州,213164)

有氧生物的新陈代谢和呼吸过程中会产生活性氧[1](reactive oxygen species,ROS), 当ROS自由基产生过多且没有被完全清除时,它们可以攻击附近的分子,造成细胞的氧化损伤[2]。目前,因天然抗氧化肽结构简单,同时比酶类抗氧化剂更稳定,不会产生危险的免疫反应,可以作为外源性抗氧化剂维持体内的氧化还原平衡[3]。

肉类蛋白是一种极佳的抗氧化肽来源,与豆类蛋白相比,肉类蛋白富含更多的人体必需氨基酸,如Arg、Lys和Gly等[4],不同肉类制备的水解液可以作为必需氨基酸的良好来源[5],且其容易被人体吸收[6]。与其他蛋白资源相比,肉类蛋白具有不同的氨基酸的种类和水平,这为制备出不同结构的抗氧化肽带来更多的可能性。近年来,针对抗氧化肽制备、分离纯化和鉴定序列方面的研究较多[7],分离纯化抗氧化肽的方法有很多,凝胶过滤色谱和反相高效液相色谱法较为常见,但随着研究的深入,大孔树脂也被用于抗氧化肽的分离纯化。WANG等[8]通过凝胶色谱法从鲭鱼内脏中分离出了具有抗氧化活性的三肽MVH;YANG等[9]利用色谱法从鳄鱼肉水解物中分离出了4种具有抗氧化活性的肽:SSLTIQFVEGQFVDSYDPTIENTFTK、VPPHIY、VAPEEHPVLLTEAPLNPK和RNGLPGPIGPAG;CAI等[10]从干腌宣威火腿中分离出了7种具有活性肽;LI等[11]选用XAD-7HP大孔树脂分离出了紫花芸豆中的抗氧化肽。

本课题以干腌牛肉为原料,以盐酸提取法提取多肽,通过AB-8型大孔树脂及C18球形硅胶柱的分离纯化出抗氧化肽,借助质谱的技术进行了抗氧化肽的鉴定,利用分子对接4种抗氧化肽与SOD的结合方式,为后续开发干腌牛肉制品提供了理论依据。……