橄榄仁抗氧化肽的分离鉴定及分子对接

张迎阳,董亚云,邹平,郑文武

(常州大学 药学院/生物与食品工程学院,江苏 常州,213164)

我国是世界栽培橄榄最多的国家,主要分布在福建、广东(多属乌榄),橄榄营养丰富,含有17种人体所需要的氨基酸,尤其含钙质和维生素C十分丰富,对孕妇及儿童大有补益[1]。

植物多肽是从植物中分离得到的具有促进免疫、抗氧化、抗菌等生理功能的生物活性肽[3],其来源广泛、获取成本低、营养价值高。当前已有许多植物源抗氧化肽的报道,如桑叶蛋白[3]、猴头菇[4]、紫花芸豆蛋白[5]等。经过蛋白酶水解可将高分子的蛋白质转化为短链的多肽甚至是氨基酸,这些低分子质量的多肽生物活性比原蛋白更高。蛋白质来源、蛋白酶类型,水解条件等因素影响蛋白水解产物的抗氧化活性,因此选择合适的条件水解蛋白具有重要的意义[6]。

本文以橄榄仁为原料,采用酶解法制备抗氧化肽。首先从6种商用蛋白酶中以水解度(degree of hydrolysis,DH)、DPPH自由基清除率为考察指标筛选蛋白酶,利用单因素试验和响应面分析法优化酶解条件,制备橄榄仁抗氧化肽。对最优工艺条件下制得的酶解液进行分离鉴定,得出抗氧化活性较强的肽段,并通过分子对接技术对橄榄仁抗氧化肽与超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)进行对接模拟,对其生物学性质进行评价并确定其分子机制,为进一步对植物抗氧化活性肽的研究和开发应用打下基础。

1 材料与方法

1.1 材料与仪器

橄榄仁,福建;ABTS、DPPH、1,10-菲咯啉,Sigma-Aldrich(上海)贸易有限公司;CuSO4、无水乙醇、牛血……