规模化猪场PRRSV不同感染状态下防控实践探讨

张欣 崔敏 杨雷 赵立伟 王云龙 尉成鑫

摘  要：本文针对猪群中猪繁殖与呼吸综合征病毒（porcine reproductive and respiratory syndrome virus，PRRSV）不同感染状态，通过不同防控措施（接种疫苗、药物保健和生产组织优化），探讨了猪繁殖与呼吸综合征（porcine reproductive and respiratory syndrome，PRRS）的防控经验。试验结果：PRRSV阳性不稳定猪群，接种PRRS灭活疫苗连续2次，1个月可实现猪群抗原阴性，阴性维持时间大约100 d；PRRSV阴性猪群采用PRRS弱毒活疫苗半数低剂量免疫，排毒时间约28 d，免疫猪群100％转阳，而未免疫猪转阳率为30％～40％。

关键词：PRRSV；疫苗；半数低剂量

中图分类号：S851.33 文献标志码：A 文章编号：1001-0769（2024）01-0028-04

猪繁殖与呼吸综合征（porcine reproductive and respiratory syndrome，PRRS）是影响养猪业的重要经济性疾病，按照猪繁殖与呼吸综合征病毒（porcine reproductive and respiratory syndrome virus，PRRSV）感染狀态可将猪群分为4类：阴性群、假定阴性群、阳性稳定群、阳性不稳定群^[1]。针对不同感染状态的猪群，采取的防控措施亦不相同，主要防控措施有：闭群生产、清群和重新组群、血清驯化、接种疫苗、药物保健等，结合管理变革以减少风险从而消除损失（mangement changes to reduce exposure to eliminate losses，McREBEL）管理模式，降低PRRSV感染导致的损失。PRRSV是RNA病毒，其病毒重组和变异速度较快，优势毒株PRRSV NADC30株及NADC34株^[2]，为疾病的防控带来更大的挑战。本文通过临床实践案例，旨在提供不同感染状态下的PRRS防控思路。

1  材料与方法

1.1 试验样本

某规模化猪场母猪存栏10 000头，分为   4条生产线，一胎线2 000头，实施周批次生产，断奶后转入经产线；三条经产线，每条经产线分为3栋猪舍，每栋猪舍存栏800头，经产线实施3周批次生产；独立公猪站。生产线中的一胎线和经产线母猪分别于2022年5月19日、6月18日检测到PRRSV抗原阳性，立即接种PRRS（CH-1a株）灭活疫苗，间隔3周进行二次免疫，母猪群PRRS疫情不稳定阶段饲料中添加500 mg/kg泰万菌素，连续使用1周，生产组织上暂停猪群流动，实施相对闭群管理。接种疫苗后采集母猪口腔液，持续监测PRRSV抗原。

对于4 510头PRRSV抗原和抗体阴性的断奶仔猪，为降低PRRSV抗体突然转阳的风险，启动PRRS弱毒活疫苗（modified-live virus vaccine，MLV疫苗）接种干预，按照每栏50％的仔猪接种，接种剂量为0.25头份/头。仔猪接种疫苗后采集其口腔液，监控PRRSV抗原，连续监控5周，第6周每栋猪舍各采集30头免疫和未免疫仔猪血清，检测PRRSV抗体转阳情况。

1.2 试验方法

1.2.1 RNA的提取

取母猪口腔液200 μL，按照MagaBio Plus病毒DNA/RNA纯化试剂盒提取总样本RNA，冻存于－80 ℃备用。

1.2.2 Real-Time PCR法检测PRRSV抗原

反应体系：上/下游引物各0.4 μL；探针0.8 μL；2×One step RT-PCR Buffer Ⅱ 10 μL；Ex Taq Hs热启动酶0.4 μL；Prime Script RT Enzyme Mix Ⅱ 0.4 μL；模板RNA 2.5 μL；ddH2O 5.2 μL。反应条件：45 ℃ 5 min，95 ℃ 30 s，95 ℃10 s，55 ℃ 31 s，72 ℃ 20 s，40个循环。

1.2.3 PRRSV抗体检测方法

按照猪繁殖与呼吸综合征抗体检测试剂盒说明书进行检测，试剂盒购自IDEXX。

2  结果与分析

母猪流产率按以下公式计算：

流产率（％）=当月流产数/当月配种数×100％

设定警戒线为1.5％。一胎线和经产线母猪PRRSV抗原检测阳性，当月流产率分别为3.84％和4.31％（图1）。

通过两次接种疫苗和药物保健的干预措施，一胎线母猪30 d后抗原检测阴性，阴性维持时间100 d。经产线母猪27 d后抗原检测阴性，阴性维持时间103 d（图2）。

接种疫苗前检测猪群PRRSV抗原和抗体均为阴性。接种疫苗后1周，猪群排毒量达到80％，说明PRRS MLV疫苗能够有效实现阳性猪的感染，且通过口腔液进行排毒，通过持续检测，发现排毒时间最长可达28 d（表1）。对于同栏未接种疫苗的猪进行抗体检测和监测，免疫猪抗体阳性率100％，而未免疫猪抗体阳性率为30％～40％（不同猪舍存在差异），未达到100％转阳。

3  讨论

灭活疫苗在PRRS的防控上仍存在争议，本研究采用PRRS灭活疫苗连续接种2次可以快速稳定阳性不稳定群，归因于接种灭活疫苗后可以再次激活母猪的免疫系统，增强先前的免疫力^[3]。随着疫苗抗原含量和佐剂的研究，灭活疫苗的应用也日趋广泛，匈牙利某大型PRRSV抗原阳性猪场通过使用灭活疫苗和隔离饲养后代，成功净化了PRRS^[4]。

生产不稳定期间，应用大环内酯类药物可以降低由PRRSV引起的母猪流产所造成的损失，有利于缩短疾病持续期。生产组织上启动闭群生产，一胎线断奶母猪不进入经产线，可以降低不同来源猪混群引起的生产波动。

本研究发现，对于PRRSV双阴性（抗原、抗体均阴性）后备猪群接种PRRS灭活疫苗，不同PRRSV抗体检测试剂盒检测抗体，均为阴性。免疫猪群转入生产群后出现发烧、厌食和流产症状，PRRSV抗原和抗体检测均为阳性，因此双阴猪群进入阳性群不建议使用PRRS灭活疫苗。

PRRSV阴性猪群的风险来自于外部感染的风险，对于地理位置不佳和猪群密度高的区域，需要采取活疫苗免疫策略来实现人工转阳，以降低PRRSV侵入阴性猪群后暴发疾病的损失。本研究采用同栏半数猪接种低剂量PRRS MLV疫苗的措施，实现了至少80％的猪群抗体转阳，通过连续跟踪排毒，PRRS MLV疫苗在阴性猪群免疫后的排毒时间大约是28 d，此结果与Linhares等^[5]的研究基本一致。未免疫猪的PRRSV抗体未完全转阳，可能与接种劑量和疫苗株相关。由此可见，PRRSV的水平传播足以实现猪群的感染。在非洲猪瘟常态化的背景下，此研究可为双阴性猪群的人工转阳提供借鉴。

参考文献

[1] HOLTKAMP D J，POLSON D D，TORREMORELL M，et al．Terminology for classifying the porcine reproductive and respiratory syndrome virus （PRRSV） status of swine herds[J]．Tieraerztliche Praxis Ausgabe Grosstiere Nutztiere，2011，39（2）：101-12．

[2] XU H，SONG S，ZHAO J，et al．A potential endemic strain in China：NADC34-like porcine reproductive and respiratory syndrome virus [J]．Transboundary and Emerging Diseases，2020，67（4）：1730-1738.

[3] MART?N-VALLS GE，MORTENSEN P，CLILVERT H，et al．The use of a whole inactivated PRRS virus vaccine administered in sows and impact on maternally derived immunity and timing of PRRS virus infection in piglets[J]．Veterinary Record Open，2022，9（1）：e34.

[4] PERTICH A，BARNA Z，MAKAI O，et al．Elimination of porcine reproductive and respiratory syndrome virus infection using an inactivated vaccine in combination with a roll-over method in a Hungarian large-scale pig herd [J]．Acta Veterinaria Scandinavica，2022，64（1）：12.

[5] LINHARES D C，CANO J P，WETZELL T，et al．Effect of modified-live porcine reproductive and respiratory syndrome virus （PRRSv） vaccine on the shedding of wild-type virus from an infected population of growing pigs[J]．Vaccine，2012，30（2）：407-413.

作者简介：张欣（1980－ ），男，博士，主要从事规模化猪场健康管理和疾病防控工作