子宫内膜异位症动物模型应用研究进展

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(1.黑龙江中医药大学，黑龙江 哈尔滨 150040；2.黑龙江中医药大学附属第一医院 妇产科，黑龙江 哈尔滨 150040)

子宫内膜异位症(endometriosis,EM)多发于生育期妇女，临床主要表现为痛经、不孕和性交痛等，是一种良性疾病，却有着一些类似恶性疾病的生物学特征。限制该疾病研究的一个主要原因是这种疾病仅发生于人类和灵长类动物。由于实际操作与伦理学方面的约束，很难在人体中进行内异症的对照研究，更不能反复进行创伤性检查，所以人们不停地在探索能够复制该疾病的模型。动物模型种类有大鼠、小鼠、家免、猕猴、狒狒、小毛猴、巴马香猪、鸡胚尿素膜(CAM)等[1-5]。本文就EM动物模型应用研究进展，综述如下。

1 在EM发病机制的应用研究

1.1 种植学说 Hooghe[6]成功地在狒狒体内将经血中的子宫内膜自体移植入腹腔，并通过外源性激素的支持，使种植的内膜得以存活，该实验有利地支持了子宫内膜种植学说。

宗利丽等[7]成功构建了猕猴模型,发现猕猴内膜异位生长，从大体形态到组织病理改变与人类子宫内膜异位症很相似。肠套叠是实验猕猴死亡的主要原因，说明子宫内膜种植在盆腔不仅仅产生盆腔黏连，对猕猴全身状态均有明显的影响，这一现象也为子宫内膜种植学说提供了一个客观依据。

1.2 遗传因素 宗利丽等[7]研究发现并不是所有异位的内膜均能形成内异症，4只建模型的猕猴中有1只未形成盆腔内异症，重要的是这只猕猴盆腔无任何黏连(对照猕猴有盆腔黏连)，此现象说明内异症的发生与个体遗传因素有关。

1.3 激素影响 通过在裸鼠腹腔种植培养的人子宫内膜细胞后发现，混合培养细胞未经过任何处理，种植成功率为25%。种植前用孕激素处理细胞不影响种植成功率;而用雌激素处理后成功率提高达66%,证明雌激素能促进异位病灶的形成。异位子宫内膜中存在细胞色素芳香化酶p450的表达,可以促进局部雌激素产生增加[8]。这些实验都提示EM是雌激素依赖性疾病。

1.4 免疫因素与炎症 免疫因素在内异症的发生发展中起重要作用。NK细胞具有多种免疫功能，可杀伤和清除机体病原微生物及其他异物,在免疫监护中起重要作用。Ota等[9]将EM大鼠模型的脾切除，并将脾细胞再注入大鼠静脉中，然后测量脾细胞中NK细胞的活性；结果显示该模型中NK细胞活性较正常大鼠明显下降，但比未注入脾细胞的EM大鼠模型的NK细胞活性下降要小；证实EM大鼠中NK细胞活性下降，清除异位内膜的能力降低，使得异位内膜得以种植和生长。

补体C3在免疫反应中参与炎症反应,可活化巨噬细胞、介导淋巴细胞功能。

1.5 血管形成和神经因素 子宫组织在异位必须经过“黏附、侵袭和血管形成”才能生存、生长[10]。异位灶的形成需要有血管的建立来提供能量。Gashaw等[11]应用狒狒模型研究发现，异位病灶内的血管生成因子前体CYR61水平升高，进一步认为,种植病灶存在反馈机制，升高了CYR61水平，促进了局部病灶的生长。微血管密度(MVD)是对新生血管生成做出定量描述的一个指标。张颖等[12]对皮下筋膜层与腹壁肌层之间移植自体子宫内膜制作的EM模型进行评估，检测EM模型大鼠的在位与异位子宫内膜MVD的变化,发现异位内膜病灶区的MVD值明显增高，证实病灶的出现及维持与局部血供密切相关。

Berkley等[13]将大鼠自体子宫内膜移植于肠系膜根部血管周围诱导EM模型,证实异位内膜生长过程中不但形成本体感觉神经，而且有交感神经传出。这些神经不仅导致EM相关的症状，且可能维持着异位病灶的生长。并且这些大鼠都表现有阴道痛觉增敏。

另外,近年已有学者将EM的机制研究深入到基因水平。Konno等[14]进行自体子宫移植建立SD大鼠EM模型，进行病灶和子宫cDNA微陈列比对，发现骨桥蛋白、Lyn、Vav 1、Runx1以及I-选择蛋白的cDNA量明显增高，认为其在EM的发病中发挥作用。

2 在EM引起不孕的应用研究

史常旭[15-16]报道EM患者腹腔液在不孕中的作用，将患EM而不孕妇女的腹腔液作用于小鼠的胚胎植入期，小鼠的植入数减少且白细胞抑制因子在植入时表达。观察腹腔液涂片，模型鼠腹腔液巨噬细胞增多，同时被包裹的卵泡液中亦见大量的巨噬细胞、淋巴细胞和粒细胞。说明EM的腹腔液对不孕有一定的作用。

LUFS(黄素化未破裂卵泡综合征)是引起不孕症的原因之一。徐邦生等[17]对EM模型鼠进行观察，发现大量的卵泡液被结缔组织包裹，卵泡液不能排出。

3 在EM治疗方面的应用研究

Efstathiou等[18]证实，不同非甾体抗炎药抑制病灶生长的程度不同，而且不影响小鼠的发情周期。与控制组相比，塞来昔布、消炎痛、萘普生、枢力达、罗非昔布、布洛芬均不同程度减小了病灶面积。而阿司匹林无明显疗效。建议临床医生应选择性应用非甾体抗炎药，以达到抑制病灶的最大疗效。

徐颖等[19]用大鼠模型做研究发现，芳香化酶抑制剂单用及联合环氧化酶抑制剂治疗可短暂(1周)降低大鼠血清雌激素水平，但随着治疗时间的延长(4周)该作用消失而使血清雌激素水平恢复至与未治疗组相近。鼠类雌激素主要来源于卵巢，说明芳香化酶抑制剂并不能彻底抑制卵巢来源的雌激素水平。单用芳香化酶抑制剂、联合环氧化酶抑制剂治疗均使异位囊肿缩小，联合治疗囊肿消失率高于单用组。

动物模型对EM研究意义重大，克服了许多对人体进行直接研究的实践问题。但在选择动物模型时要权衡各种模型的利弊，充分发挥不同动物模型的长处，为临床研究提供指导。

[1]易晓芳,徐丛剑,刘惜时.子宫内膜异位症动物模型的研究进展[J].现代妇产科进展,2001,10(4):291-293.

[2]刘学军,何援利.子宫内膜异位症动物模型的建立及应用[J].中国实用妇科与产科杂志,2002,18(7):444-445.

[3]Einspanier A,Lieder K,Bruns A,et al.Induction of endometri osis in the marmoset monkey(Callithrix jacchus) [J].Mol Hum Reprod,2006,12(5):291-299.

[4]罗刚,张乐,刘连生,等.我国实验用小型猪的应用研究前景[J].实验动物科学与管理,2004,6(2):37-38.

[5]马玉霞,王琳,孔燕,等.巴马香猪腹腔皮下种植子宫内膜建立子宫内膜异位症模型的研究[J].第三军医大学学报,2008,30:530-532.

[6]D'Hooghe TM,Bambra CS,Raeymaekers BM,et al.Intrapelvic injection of menstrual endometrium causes endometriosis in baboons(Papio cynocephalus and Papio anubis).Am J Obstet Gynecol,1995,173(1):125.

[7]宗利丽,李亚里,汪龙霞,等.子宫内膜异位症猕猴动物模型的建立[J].第一军医大学学报,2003,23(10):1006-1009.

[8]Zheng Hui,LiHongyi,et al.A study on the an imalmodel of experim ental endom etriosis [J].AnatRes,2002,23:114-11.8.

[9]Ota,H irotaka,Rong,et al Suppression of natural killer cell activity by splenocyte transplantation in a ratmodel of endometriosis [J].Copyright Oxford University press,2002,17(6):1453.

[10]郎景和.子宫内膜异位症研究的新里程[J].中华妇产科杂志,2005,40(1):3-4.

[11]GashawI,Hasting JM,Jackson KS,et al.Induced endometriosis in the baboon(Papioanubis)increases the expression of the proangio-genic factor CYR61(CCN1)in eutopic and ectopic endometrial [J].Biol Reprod,2006,74(6):1060-1066.

[12]张颖,曹洪,张昌军.改良大鼠子宫内膜异位症模型的建立及微血管密度观察[J].中国实验动物学报,2008,16(1):56-58.

[13]Berkley KJ,Dmitrieva N,Curtis KS,et al.Innervation of ectopic endometriumin a rat model of endometriosis[J].Proc Natl Acad Sci USA,2004,101(30):11094-11098.

[14]Konno R,Fujiwara H,Netsu S,et al.Gene expression profiling of the rat endometriosis mode[J].Am J Reprod Immunol,2007,58(4):330-343.

[15]史常旭.子宫内膜异位症患者腹腔液在不孕中的作用[J].第三军医大学学报,2002,24(1):100.

[16]Illera M J,Juan L,Stew art CL,et al.Effect of peritoneal fluid from women with endometriosis on implantation in the mouse model[J].Fertil-Steril,2000,74(1):41.

[17]徐邦生,鲁晓燕,蔡云平,等.大鼠与兔子宫内膜异位动物模型的比较[J].南通医学院学报,2003,23(1):31-33.

[18]Efstathiou JA,Sampson DA,Levine Z,et al.Nonsteroidal antiinflammatory drugs differentially suppress endometriosis in a murine model[J].Fertil Steril,2005,83(1):171-181.

[19]徐颖,郑志群,马炎辉.芳香化酶及环氧化酶抑制剂对大鼠子宫内膜异位症模型的作用[J].生殖与避孕,2005,25(9):520-526.