利血康的活血和止血作用研究*

邝荔香 ，宫 传 ，朱 红 ，吴樱樱 ，杨 雁 ，陈敏珠

（1.安徽医科大学临床药理研究所，安徽 合肥 230032； 2.安徽医科大学药理学研究生，安徽 合肥 230032）

原发性血小板减少性紫癜（ITP）是以出血和血小板减少为主要表现的一组免疫性疾病，利血康制剂可通过调节体液免疫功能抑制血小板相关抗体的升高等而对其产生肯定的防治作用[1]，临床应用多年疗效良好。现对利血康的治疗机制作进一步研究。

1 试药与动物

利血康浸膏（合肥恒星药物研究所提供，批号为200311120，每克干浸膏含4 g总生药）；血康口服液（江西天狮中药集团贵溪制药厂，批号为20030915，10 mL/支，作为阳性对照药）。Ⅰ型胶原蛋白（Sigam公司）；盐酸肾上腺素溶液1 g/L（上海禾丰药业有限公司）；注射用环磷酰胺（200 mg/瓶，上海华联药业有限公司）。

昆明种小鼠，体重18～22 g，雌雄各半；纯种白色雌性豚鼠，体重250～300 g；新西兰种大耳白兔，体重2.5～3 kg，雌雄各半。均由安徽医科大学动物中心提供。

2 方法与结果

2.1 对胶原蛋白-肾上腺素致小鼠体内血栓形成的影响[2-3]

取小鼠50只，雌雄各半，随机均分成5组，即模型对照组，利血康高、中、低3个剂量组，血康口服液组（5 mL/kg），每组分别灌胃给药，模型对照组予相同体积的蒸馏水，每日1次，连续5 d。于末次给药后1.5 h，每鼠尾静脉注射胶原蛋白（225 μg/只）-肾上腺素（9 μg/只）混合液0.2 mL，立即观察小鼠 5 min内死亡数和15 min内偏瘫数，计算有效率（即对血栓形成的保护率），进行卡方检验，比较各组有效率的差异。结果见表1。可见，高、中剂量利血康和血康口服液均能明显抑制胶原蛋白-肾上腺素诱导的小鼠体内血栓形成，表明利血康有明显的活血作用。

表1 利血康对胶原蛋白-肾上腺素诱发小鼠体内血栓形成的影响（X ± s，n=10）

2.2 对环磷酰胺致血小板减少症小鼠血小板数和出血时间的影响[4]

取小鼠60只，雌雄各半，随机均分成6组，即正常对照组，模型对照组，利血康高、中、低3个剂量组，血康口服液组（5 mL/kg），每组分别灌胃给药，正常对照组和模型对照组予等容量蒸馏水，每日1次，连续10 d。除正常对照组外，其余各组于给药第6天和第7天，腹腔注射环磷酰胺100 mg/kg，第8天和第9天腹腔注射环磷酰胺120 mg/kg，对照组腹腔注射等容量生理盐水。第10天给药1.5 h后，用断尾法测定出血时间。随后摘除眼球，取血20 μL加入0.38 mL血小板稀释液中，摇匀，再加入0.8 mL血小板稀释液，计数血小板。结果见表2。可见，环磷酰胺使小鼠的血小板数明显降低、出血时间明显延长，3种剂量的利血康和血康口服液均能拮抗环磷酰胺所致小鼠血小板减少和出血时间的延长，提示利血康能提高血小板功效和具有止血作用。

2.3 对免疫性血小板减少症家兔凝血时间的影响[1]

制备和提纯豚鼠抗兔血小板血清[5-6]。取家兔48只，雌雄各半，随机均分成6组，即正常对照组，模型对照组，血康口服液组（1.4 mL/kg），利血康高、中、低3个剂量组。先灌胃给药3 d，正常对照组和模型对照组灌胃蒸馏水，第4天除正常对照组外，每兔于耳缘静脉注射豚鼠抗兔血小板血清2.5 mL造模，正常对照组注射等量生理盐水，继续灌胃给药5 d，正常对照组和模型对照组灌胃等量蒸馏水。测定给药前、注射豚鼠抗兔血小板血清造模90 min和第5天的凝血时间。结果见表3。可见，家兔静脉注射豚鼠抗兔血小板血清后90 min，凝血时间明显延长，高、中剂量利血康和血康口服液均能明显拮抗凝血时间的延长，表明利血康有促凝血作用。注射该血清5 d后，各组的凝血时间基本恢复正常。

表2 利血康对环磷酰胺致血小板减少症小鼠血小板数和出血时间的影响（X ± s，n=10）

表3 利血康对免疫性血小板减少症家兔凝血时间的影响（X ± s，n=8）

3 讨论

胶原蛋白-肾上腺素诱导的小鼠体内血栓模型是形成急性血栓的肯定模型[2-3]。利血康制剂由三七、白芨、藕节和血余炭等组成，其高、中剂量能明显抑制该模型小鼠体内血栓的形成，表明利血康有明显的活血化瘀作用。试验中还发现，温度等天气条件对该模型成功率有明显影响，可能是气温影响了血管的柔韧性和血液的黏稠度，从而影响血栓的形成。高血压所致并发症的发病率秋冬季节通常明显高于春夏季节，已说明气候条件对心血管功能是有一定影响的。笔者认为此模型实验应选择在春季进行较适宜。

3个剂量的利血康均能明显对抗环磷酰胺所致小鼠血小板减少，高剂量能明显缩短环磷酰胺致小鼠出血时间的延长，高、中剂量还能明显对抗免疫性血小板减少症家兔凝血时间的延长，表明利血康对化学性和免疫性致出血时间与凝血时间延长的两种模型均有改善作用。利血康药效学研究也表明其有促血小板生成的功效[1]。提示利血康可能通过促血小板生成改善了促凝血功能，从而产生止血作用。

[1]邝荔香，周 明，朱 红，等.利血康治疗免疫性血小板减少症的药效学研究[J]. 安徽中医学院学报，2008，27（6）：45-47.

[2]向茜莲，程 睿，张路晗.血竭的活血与止血作用研究[J].华西药学杂志，2000，15（6）：430-431，434.

[3]陈 奇，邓文龙，孙瑞元，等.中药药理研究方法[M].北京：人民卫生出版社，1996：579.

[4]王安行，朱家谷.血康胶囊升血小板和白细胞作用的实验研究[J].浙江中西医结合杂志，1998，8（3）：144-145.

[5]邝荔香，陈敏珠.药理学动物实验插管扎口方式与固定效果探讨[J].安徽医药，2007，11（3）：278.

[6]李 华，宫 传，邝荔香.血康口服液对家兔免疫性血小板减少症的治疗作用[J]. 安徽卫生职业技术学院学报，2003，2（3）：53-54.