30%苍耳素EC对两种蔬菜病害的药效评价试验

丁德芳，杨顺义，符海波，沈慧敏

（甘肃农业大学草业学院草业生态系统教育部重点实验室中-美草地畜牧业可持续发展研究中心，甘肃 兰州 730070）

番茄灰霉病（Botrytis cinereaPers.）和黄瓜黑星病（Cladosporium cucumerinumEll.）是日光温室蔬菜的常发性病害，随着规模蔬菜产业的快速发展，二者已成为蔬菜生产中的主要病害，严重影响了蔬菜产业的发展。生产上主要使用化学杀菌剂对其进行防治，化学农药的长期使用,不但增强了病原菌的抗药性，而且带来了农药高残留和环境污染等一系列问题。因此，使用低毒、低残留、无公害的药剂来替代化学药剂，是绿色蔬菜生产的迫切要求。植物源农药以其低残留、低毒或无毒、不易产生抗药性以及易与其他药剂混配等特点受到人们的青睐[1]。

甘肃农业大学草业学院农药系研制的30%苍耳素EC是以苍耳有效抑菌成分—苍耳素为原料开发出的植物源杀菌剂,该药剂对蔬菜常见病害具有较高的抑菌作用[2-3]。为了明确30%苍耳素EC对蔬菜病害的防治效果，笔者以番茄灰霉病、黄瓜黑星病为供试菌，进行了药效评价试验，旨在为该药剂的大面积使用提供科学依据。

1 材料与方法

1.1 供试药剂

30%苍耳素EC，甘肃农业大学农药系加工；50%扑海因WP，连云港市德伦农药有限公司生产。

1.2 供试病菌

番茄灰霉病菌（Botrytis cinereaPers.），黄瓜黑星病菌（Cladosporium cucumerinumEll.），由甘肃农业大学农药实验室提供。

1.3 30%苍耳素EC对供试病菌的药效评价方法

1.3.1 30%苍耳素乳油的加工 30%苍耳素EC由苍耳提取液、溶剂、助溶剂、紫外保护剂、乳化剂按一定比例加工配制而成。

1.3.2 室内毒力测定[4]采用含毒介质培养法测定乳油的抑菌效果。在培养好的番茄灰霉病菌和黄瓜黑星病菌菌落边缘用内径6 mm的打孔器打取菌饼，置于含系列药剂质量浓度的PDA平板上（见表1），每处理重复3次，以加无菌水的培养基为空白对照。然后，将其放入25℃恒温箱中培养3 d，用十字交叉法定期测量菌落直径。计算病菌生长抑制率和 EC50。抑制率的计算见公式（1）、（2）。

1.3.3 离体组织测定 参考李树正[5]方法并有所修改，用黄瓜子叶测定供试药液对供试菌的药效,叙述如下。（1）菌种制备。将供试菌接种于PDA培养基中部，在（23±1）℃条件下培养 4 d 后备用；（2）子叶制备。供试黄瓜品种为“津研5号”，培育子叶期黄瓜幼苗，待子叶充分展开后摘取生长一致的子叶，将脱脂棉浸水后包裹叶柄，然后置于90 mm培养皿中（培养皿底部垫有浸水海绵，上覆一层滤纸）备用；（3）处理及对照设置。每处理一片子叶，重复3次，以50%扑海因WP 1 000倍为药剂对照，清水为空白对照；（4）保护作用。采用浸渍法（将子叶于药液内浸2～3 min）进行处理，药液荫干后用打孔器在菌落外缘打取菌饼（Φ=6.0 mm）并置于子叶中心部，在人工气候箱中（温度为（23±1）℃，光照 13 h、黑暗 11 h交替）培养至空白对照充分发病后测量病斑直径；（5）治疗作用。子叶接种供试菌后，在人工气候箱中培养至初见病斑时，采用浸渍法进行处理，其它方法同保护作用。防治效果的计算见公式（3）。

1.4 田间药效试验

1.4.1 试验方法 依30%苍耳素EC浓度的不同，试验设 834、1 070、1 500、2 550、7 500 mL/hm2共 5个处理，以50%扑海因WP 750 g/hm2为对照药剂，以清水为对照（CK），小区面积15 m2，各小区间设有保护行，每处理4次重复,共计28个小区，小区采用随机区组排列。

黄瓜黑星病第1次施药时间为2009年5月10日，第2次施药时间为5月17日；番茄灰霉病第1次施药时间2009年6月1日，第2次施药时间为6月8日。选用奥晟WFB-18AC型背负式喷雾机按750 kg/hm2的药液量喷于叶片正、背面均匀喷雾。

1.4.2 调查时间与方法[6-7]每小区5点取样，每点确定2株进行标记，每株上、中、下部各取5片叶。根据每个小区番茄叶片灰霉病和黄瓜黑星病的发生情况，以每片叶上的病斑面积占整个叶面积的百分率进行分级，调查病叶级数并观察药剂对作物的直接影响。按分级标准记载并计算病情指数及防治效果，见公式（4）、（5）。

2 结果与分析

2.1 30%苍耳素乳油对供试病菌的室内毒力测定结果

30%苍耳素乳油对供试病菌的室内毒力测定结果见表1。结果表明：30%苍耳素EC对番茄灰霉病菌和黄瓜黑星病菌都有较高的抑菌作用。在供试浓度为3 mg/mL时，对番茄灰霉病菌和黄瓜黑星病菌的抑制率分别达到81.77%、82.34%，抑菌毒力EC50值分别为0.471 8、0.958 6 mg/mL。对照药剂50%扑海因WP 0.5 mg/mL对番茄灰霉病菌和黄瓜黑星病菌的抑制率分别达到97.24%、98.94%。30%苍耳素EC对番茄灰霉病菌和黄瓜黑星病菌的抑制率略低于50%扑海因WP。

表1 30%苍耳素乳油对供试病菌的抑菌作用

2.2 离体组织测定

2.2.1 30%苍耳素乳油对番茄灰霉病的保护作用和治疗作用测定结果 如表2所示，在保护作用和治疗作用下，供试药剂对番茄灰霉病的防效随浓度的提高而递增，呈现明显的剂量效应关系。对照药剂50%扑海因WP在0.5 mg/mL浓度下，处理48 h后对番茄灰霉病的保护作用和治疗作用的防效分别为45.52%、48.53%。与对照药剂相比，30%苍耳素EC 1 mg/mL的处理对番茄灰霉病的保护作用未表现出显著性差异，而治疗作用显著低于对照药剂；30%苍耳素EC 3 mg/mL的处理对番茄灰霉病的保护作用显著高于对照药剂，而治疗作用未表现出显著性差异。

表2 30%苍耳素乳油对番茄灰霉病的室内毒力测定结果（黄瓜子叶法）

2.2.2 30%苍耳素EC对黄瓜黑星病保护作用和治疗作用测定结果 如表3所示，30%苍耳素EC对黄瓜黑星病均有一定的保护作用和治疗作用。在保护作用和治疗作用下，供试药剂对黄瓜黑星病的防效随浓度的提高而递增，呈现明显的剂量效应关系。对照药剂50%扑海因WP在0.5 mg/mL浓度下，处理48 h后对黄瓜黑星病的保护作用和治疗作用的防效分别为40.21%、43.44%。30%苍耳素EC 3 mg/mL的处理，对黄瓜黑星病的保护作用显著高于对照药剂，而治疗作用极显著低于对照药剂。

表3 30%苍耳素乳油对黄瓜黑星病的室内毒力测定结果（黄瓜子叶法）

2.3 田间药效试验

2.3.1 30%苍耳素乳油对番茄灰霉病的田间防效由表4结果显示,30%苍耳素EC在药剂用量为834～7 500 mL/hm2，第 1 次和第 2 次施药 7 d 后，对番茄灰霉病的防效分别为25.91%～62.60%和27.12%～67.76%，第2次施药14 d后，对番茄灰霉病的防效略有升高，为28.93%～72.03%。这表明苍耳素前期药效缓慢，速效性一般，持效佳。对照药剂50%扑海因WP在药剂用量为 750 g/hm2时，第2次施药14 d后，对番茄灰霉病防效为64.17%。30%苍耳素EC 7 500 mL/hm2的防治效果高于对照药剂的同期防效。从总体来看，30%苍耳素EC各药剂处理对番茄灰霉病的防效明显,14 d后仍有防效，且防效高于前期，表现出很好的持效性。

2.3.2 30%苍耳素乳油对黄瓜黑星病的田间防效

由表5可知,30%苍耳素EC在药剂用量为834～7 500 mL/hm2时，第1次和第2次施药7 d后，对黄瓜黑星病的防效分别为24.18%～53.82%和25.50%～56.88%，14 d后，对黄瓜黑星病的防效略有升高，为28.84%～60.12%。这表明苍耳素前期药效缓慢，速效性一般，持效佳。对照药剂50%扑海因WP 750 g/hm2，第2次施药7 d和14 d后，对黄瓜黑星病防效分别为62.92%和62.07%。30%苍耳素EC 7 500 mL/hm2施药14 d后对黄瓜黑星病的防效与对照药剂50%扑海因WP无显著差异，表现出良好的持效性。

表4 30%苍耳素乳油对防治番茄灰霉病田间防效

表5 30%苍耳素乳油对防治黄瓜黑星病田间防效

3 结论与讨论

30%苍耳素EC是从植物苍耳中提取出来的杀菌活性成分，是一种植物源杀菌剂，具有保护和治疗双重作用。30%苍耳素EC对番茄灰霉病菌和黄瓜黑星病菌具有一定的抑菌毒力（EC50分别为0.471 8、0.958 6 mg/mL），也有一定的保护作用和治疗作用，且保护作用优于治疗作用。田间药效试验表明：第2次施药14 d后，30%苍耳素EC 7 500 mL/hm2对两种病害的田间防效分别为72.03%和60.12%，对番茄灰霉病的防效显著高于对照药剂50%扑海因WP常用剂量的防效，对黄瓜黑星病的防效与对照药剂50%扑海因WP无显著差异。这表明30%苍耳素EC对两种病害有良好的防效，速效性一般，持效性好，14 d后仍有防效。

室内毒力测定结果与田间实际防效存在一定差异，其原因可能是田间防效受作物、病菌、环境条件等多种因素影响。30%苍耳素EC田间防治蔬菜病害具有良好的效果，对试验作物无任何不良影响，可在生产中使用。最佳施药时期是在发病前或初见病斑时，施药越早，防病效果越好。在生产上，施用30%苍耳素EC 2 550～7 500 mL/hm2，7 d左右喷洒1次，连续施药2～3次，可达到理想的防治效果。

[1]段晓明，尹 卫.植物源农药的研究进展[J].青海大学学报（自然科学版），2006，24（5）：56-59.

[2]王兴全，张新虎，杨顺义.苍耳提取物对番茄灰霉病菌抑制机理的研究[J].甘肃农业大学学报，2008，43（3）：107-110.

[3]杨顺义，郭东艳，沈慧敏，等.苍耳等14种植物对植物病原菌的抑菌活性[J].植物保护，2006，32（3）：68-71.

[4]刘爱群.番茄早疫病菌的室内药剂筛选 [J].辽宁农业科学，2004，（1）：41.

[5]李树正.黄瓜子叶法筛选蔬菜灰霉病杀菌剂的研究[J].华北农学报，1991，6（3）：94-99.

[6]农业部农药检定所生测室.农药田间药效试验准则（一）[M].北京：中国标准出版社，1993.

[7]王立君，陈 国，杨 挺，等.几种杀菌剂防治番茄灰霉病试验[J].浙江农业科学，2009，（1）：162-163.