复方伊维菌素乳液的毒性试验研究

姜晓文，张春燕，于文会*，冯国峰，徐 利

（1.东北农业大学动物医学学院，哈尔滨 150030；2.哈尔滨和平兽药有限公司，哈尔滨 150039）

复方伊维菌素乳液是一种口服的广谱驱虫药，其主要成分为伊维菌素和阿苯达唑。伊维菌素为新型大环内酯类抗生素类驱虫药，具有广谱、高效、低毒等优点，对马、牛、羊、猪的消化道和呼吸道线虫，马盘尾丝虫的微丝蚴以及猪肾虫等均有良好的驱虫效果。对马胃蝇和羊鼻蝇的各期幼虫以及牛羊的疥螨、痒螨、毛虱、血虱、腭虱以及猪疥螨、猪血虱等外寄生虫具有良好的杀灭作用[1-2]，是畜牧生产中应用最广泛和使用量最大的一种广谱、高效、安全、理想的抗体内外寄生虫药物[3]。阿苯达唑，广泛用于治疗及预防人和动物所患的钩虫、蛔虫、鞭虫、蛲虫、旋毛线虫、绦虫及囊虫等寄生虫病[4]。为了获得更安全高效的驱虫效果，将动物体内寄生虫感染率降至更低水平，制成复方伊维菌素乳液。本文通过对复方伊维菌素乳液的毒性试验研究，为临床用药安全提供依据。

1 材料与方法

1.1 实验动物

Wistar大白鼠80只，大白鼠180～220 g，雌雄各半，购自哈尔滨医科大学实验动物中心。试验前，在实验室环境下饲养7 d。

1.2 主要药品和试剂

复方伊维菌素乳液（哈尔滨和平兽药厂提供）；丙氨酸氨基转移酶（ALT/GPT）试剂盒（购自四川省迈克科技有限责任公司）；天门冬氨酸氨基转移酶（AST/GOT）试剂盒（购自上海申索佑富医学诊断用品有限公司）；尿素氮（BUN）试剂盒（购自南京建成生物工程研究所）；肌酐（CR）液体试剂盒（购自西化仪北京科技有限公司）。

1.3 急性毒性试验

大白鼠40只，随机分4组，每组10只，称重，每组分别按 1.5、3、6 和 12 mL·kg－1剂量（LD100=50 mL·kg－1，哈尔滨和平兽药厂提供数据）一次口服复方伊维菌素乳液，给药前禁食12 h，给药后禁食3 h，但要保证正常给水。

观察试验大白鼠的临床症状及死亡情况，并计算大白鼠的死亡率（P），按改良寇氏法公式进行计算[5]：LD50=lg－1[Xm－i（∑P－0.5）]，LD50的平均可信限=LD50±（LD50的 95%可信限的高限－低限）/2，LD50的 95%平均可信限=LD50±4.5LD50·SX50，其中 SX50为LD50的标准误，其中n=各组动物数，ΣP2=各组死亡率平方的总和。

1.4 亚急性毒性试验

大白鼠40只，随机分4组，称重，一组为对照组，其余三组为试验组，试验每组分别按0.2、0.4和0.6 mL·kg－1剂量口服复方伊维菌素乳液，对照组以0.6 mL·kg－1剂量灌服生理盐水，给药前禁食12 h。连续14 d，停药后观察14 d。试验过程中，观察试验大白鼠的临床症状及生命体征。通过眼球采血，检测血液常规和肝肾功能。剖检尸体，观察心、肝、脑、肺、肾、脾、睾丸/卵巢等脏器；取不同脏器组织做病理切片。

1.5 数据处理

试验数据应用SPSS 13.0统计软件进行分析，结果用平均数±标准差（X±S）表示。

2 结果与分析

2.1 急性毒性试验结果

LD50的平均可信限=4.241±1.518 mL·kg－1（见表1）。由表1可知，乳房伊维菌素乳液用药剂量和大白鼠死亡率呈线性正相关增长。当药物浓度达到4.241 mL·kg－1时，大白鼠的死亡率到达50%。

表1 LD50试验数据Table 1 Results of determination of LD50

2.2 亚急性毒性试验结果

2.2.1 大白鼠的一般状况及体重变化

中、低剂量组动物采食量无明显影响，给药7 d，高剂量组（0.6 mL·kg－1）大白鼠有呆滞表现，且有部分大白鼠出现粪便变软。在体重变化方面，高剂量组体重下降明显，与对照组相比差异明显（P＜0.05），而中、低剂量组与对照组相比，体重变化无显著差异（P＞0.05）（见表 2）。

表2 对各组大白鼠体重影响的检测结果Table 2 Effects of ivermectin emulsion compound on rats'body weight

2.2.2 大白鼠血细胞的变化

高剂量组白细胞显著低于对照组（P＜0.05），中、低剂量组白细胞与对照组相比无显著差异（P＞0.05）。各剂量组红细胞（RBC）和血小板（PLT）与对照组比较差异不显著（P＞0.05）（见表 3）。

2.2.3 大白鼠血液生化指标的检测结果

高剂量组、中剂量组、低剂量组谷草转氨酶（AST）、谷丙转氨酶（ALT）、肌酐（CR）、 尿素氮（BUN）与对照组比较无明显差异（P＞0.05）（见表4）。

表3 血液学检查结果Table 3 Results of blood examination

表4 血液生化检测结果Table 4 Results of blood biochemistry examination

2.2.4 大白鼠部分脏器病理组织学观察结果

将试验组和对照组的大鼠处死后，取心、肝、肾、脾等器官，肉眼观察未发现明显出血、坏死等病变。同时对上述组织做组织切片，400倍光学显微镜观察，也未发现组织变性、坏死及间质炎细胞浸润等病理损害性改变，与对照组比较，均未见明显差异。结果见图1～4。

图1 肝脏的组织切片（HE，10×10）Fig.1 Liver biopsy

图2 肾脏的组织切片（HE，10×10）Fig.2 Kidney biopsy

图3 脾脏的组织切片（HE，10×10）Fig.3 Spleen biopsy

图4 心脏的组织切片（HE，10×10）Fig.4 Myocardial biopsy

3 讨论

邵新玺等报道，伊维菌素大鼠急性经口试验LD50为140 mg·kg-1，在较高剂量时对受试大鼠动物体重及肝、肾、脾功能有一定影响;该送检药物亚慢性经口对大鼠最大无作用剂量为0.4 mg·kg-1[6]。徐霞等研究表明，伊维菌素注射剂的LD50为24.2493 mg·kg-1[7]。因为伊维菌素具有广谱高效性，较高的安全性等优点，在畜牧生产中得到了广泛的应用。

但是近年来，偶有因用量过大引起动物中毒的报道；少数犬种敏感，正常用量即可出现中毒症状；也有个别犬种偶见过敏，引起死亡的报道[8]。为更好地利用伊维菌素的优点，增加药物疗效，进一步降低药物毒性，人们正致力于改变其剂型或药物配伍的研究。如伊维菌素脂质体，与其他药物配伍使用，制成长效注射剂等[7,9]。

阿苯达唑主要对线虫、绦虫和吸虫具较强驱杀作用，是广谱、高效、低毒的驱虫药。为更好地利用伊维菌素的优点，将伊维菌素和阿苯达唑复合用药，以达到更好的预防家畜体内外寄生虫病的目的。方悦怡等报道应用国产伊维菌素伍用阿苯达唑治疗钩虫、鞭虫、蛲虫感染效果显著，对鞭虫疗效明显优于阿苯达唑，对钩虫、蛲虫疗效明显优于伊维菌素，并且有排虫快、不良反应少而轻等优点[10]。

复方伊维菌素乳液是以伊维菌素和阿苯达唑为主要成分的是一种新型药物，为了给临床用药提供理论依据，本试验通过对复方伊维菌素乳液的急性和亚急性毒理试验对其毒性进行了研究。急性试验表明该药毒性弱、毒性反应小，LD50的平均可信限为4.241±1.518 mL·kg-1。亚急性毒性试验中，中、低剂量组体重、血常规、血液生化指标及组织切片均正常，高剂量组体重及白细胞数低于对照组，但均未见明显的毒性反应。说明将伊维菌素和阿苯达唑复合用药，未见其毒性增强的试验结果。但本次试验对复方伊维菌素乳液在生殖毒性、致畸、繁殖等方面未进行研究，关于这方面的毒性，今后有待于进一步研究。

4 结论

通过复方伊维菌素乳液的急性和亚急性毒理试验，表明复方伊维菌乳液毒性弱、反应小，是一种安全的口服驱虫药。

[1] 冯明教,马满堂,岳磊,等.伊维菌素研究进展[J].上海畜牧兽医通讯,2006(6):15-16.

[2] 吴树清.伊维菌素对不同品种赛马体内寄生虫的驱虫效果观察[J].畜牧与饲料科学,2006(4):22-24.

[3] 周良生,李术,朱蓓蕾,等.阿维菌素亚急性中毒致鸽子脑组织细胞凋亡的研究[J].东北农业大学学报,2009,40(2):75-78.

[4] 王建华,温浩,孙殿甲.阿苯达唑的体内过程和剂型研究进展[J].中国寄生虫病防治杂志,2002,15(3):187-189.

[5] 楼宜嘉.药物毒理学[M].北京:人民卫生出版社,2003:151-157.

[6] 邵新玺,黄清臻,周鑫,等.伊维菌素亚慢性经口毒性试验[J].医学动物防制,2001,17(1):26-28.

[7] 徐霞,匡光伟,邓辉,等.伊维菌素脂质体的急性毒性试验[J].中国兽医寄生虫病,2006,14(4):11-13.

[8] 杨怀,简嘉.一例犬伊维菌素中毒的治疗心得[J].湖北畜牧兽医,2006(1):33.

[9] 弓广智,张海亮,高娟,等.伊维菌素长效注射液对小鼠的急性毒性试验[J].动物医学进展,2008,29(12):41-42.

[10] 悦怡,张启明,邓卓晖,等.伊维菌素和阿苯达唑伍用驱除肠道线虫感染的效果观察[J].中国寄生虫病防治杂志,2008,16(4):214-215.