复方林可霉素乳膏质量标准研究*

林 宏，陈贵起

(天津市儿童医院，天津 300074)

复方林可霉素乳膏由盐酸林可霉素、曲安缩松等药物组成，临床用于治疗异位性皮炎，疗效与复方氯霉素乳膏相同，且避免了氯霉素可能出现的不良反应。同时该药也可用于治疗湿疹、接触性皮炎、神经性皮炎和摩擦性苔癣样疹等变态反应性皮肤病[1]。

1 仪器与试药

1.1仪器 Waters高效液相色谱仪，配备600E型泵，486型可变波长检测器，800工作站(美国)；万分之一天平(德国Sartourius BP 110S)。

1.2试药 盐酸林可霉素(华北制药集团华栾有限公司，批号070720)，盐酸林可霉素对照品(中国药品生物制品检定所，批号130432-200407，含量86.2%)，硼酸、磷酸，复方林可霉素乳膏(本院制剂室自制，批号0809071、0809072、0809073)。

2 方法和结果

2.1鉴别 在含量测定项下记录的色谱图中，供试品溶液主峰的保留时间与盐酸林可霉素对照品溶液主峰的保留时间一致，且本品水溶液显氯化物的鉴别反应[2]。

2.2盐酸林可霉素含量测定

2.2.1色谱条件 色谱柱：Bondapak C18(150 mm×4.6 mm,5 μm)；流动相：0.05 mol/L硼酸溶液(磷酸调pH至6.0)-甲醇(5∶5)，流速0.7 ml/min，检验波长214 nm，进样量20 μl。

2.2.2溶液制备

2.2.2.1对照品溶液的制备 精密称取干燥至恒重的盐酸林可霉素对照品500.0 mg，置于100 ml量瓶中，加甲醇适量溶解并稀释至刻度，摇匀，即得浓度为5.0 mg/ml的盐酸林可霉素对照品溶液。

2.2．2.2供试品溶液的制备 精密称取本品2.0 g，置于25 ml三角烧瓶中，加甲醇15 ml，超声使之溶解，置70 ℃水浴中加热提取2次，每次3 min，放冷至室温，用流动相稀释至刻度，摇匀，置于冰浴中冷却2 h，迅速过滤至50 ml量瓶中，定容至刻度，即为供试品溶液。

2.2.2.3阴性对照溶液的制备 “2.2.2.2”项下供试品不加入盐酸林可霉素，其他按供试品溶液的方法制备即得。

2.2.3系统适用性试验 分别吸取对照品溶液、供试品溶液、阴性对照溶液进样测定，盐酸林可霉素的保留时间为 9.16 min，色谱图见图1。结果表明：供试品溶液在对照品溶液盐酸林可霉素保留时间处有一色谱峰，而阴性对照溶液在该处未出现色谱峰，对测定无干扰。

1.盐酸林可霉素

2.2.4标准曲线的绘制 分别精确量取盐酸林可霉素对照品溶液适量，加流动相于量瓶中稀释定容成1.0、1.5、2.0、2.5和3.0 mg/ml的系列对照品溶液。各吸取20 μl进样，记录色谱图。以盐酸林可霉素的浓度(X)与吸收峰高(Y)作线性回归，得回归方程：Y=1.058×106X-0.528 5×105(r=0.991 6)，盐酸林可霉素在1.0～3.0 mg/ml浓度范围内峰高与浓度呈良好的线性关系。

2.2.5精密度试验 取5.0 mg/ml的盐酸林可霉素对照品溶液连续进样6次，测定吸收峰面积，RSD为0.4%(n=6)，表明仪器精密度良好。

2.2.6稳定性试验 取同一批号的样品(批号0809071 )制备成供试品溶液，分别于0、2、4、8、12和24 h测定各自盐酸林可霉素的吸收峰面积，RSD为0.42%，表明供试品溶液在制备24 h内稳定。

2.2.7重复性试验 取同一批号样品，按“2.2.2.2”项下方法制备样品溶液5份，测定盐酸林可霉素含量，RSD为1.82%，符合规定。

表1 样品含量测定结果(n=3)

2.2．8回收率试验 制备不含盐酸林可霉素的空白乳膏，称取空白药膏1.0 g，按处方量的80%、100%、120%分别加入对照品溶液4、5、6 ml各3份，按“2.2.2.2”项下处理后进样，峰面积与等浓度对照品溶液相比，计算回收率，平均回收率101.58%，RSD为1.29%。

2．2.9样品含量测定 取“2.2.2.2”项下制备的样品溶液，再以“2.2.1”项下色谱条件进样，记录色谱图，以回归方程计算盐酸林可霉素含量，见表1。

2.2.10样品稳定性试验 将3批样品(批号0809071、0809072、0809073)于室温条件下保存15个月，分别在第2、4、8、12和15个月月末取样进行稳定性重点考查项目检测[3]。考查结果显示：与0月相比，盐酸林可霉素的含量无显著变化，在第12个月时，颜色有点变深(结果见表2)。

表2 稳定性试验结果(n=5)

3 讨论

3.1测定波长的考查 取盐酸林可霉素对照品溶液在200～300 nm波长范围内进行紫外扫描测定，结果在214 nm处有较大吸收峰，故选择214 nm作为检测波长[3]。

4.2样品的处理方法 本品为乳膏制剂，直接进样会堵塞液相柱，因此样品的处理非常重要。通过试验比较(选择甲醇、流动相、硼酸缓冲液分别提取样品)，以甲醇提取的样品回收率最好(三种溶剂提取样品的平均回收率依次为100.9%、92.5%、97.2%)，最终选择甲醇为提取溶剂。采用高效液相色谱法测定制剂中的盐酸林可霉素的含量，具有色谱分离理想，标准曲线线性关系良好，特异性强，精密，准确，回收率高等特点[4，5]。

3.3留样观察试验 本品室温常规条件下放置15个月，盐酸林可霉素的含量基本未变，在第12个月时外观颜色稍变深，质量基本稳定。

1 陈新谦，新编药物学.第16版.北京：人民卫生出版社，2007：94，626

2 中国药典.二部.2005：531

3 舒冰，方焱.1%盐酸林可霉素乳膏的制备及质量控制.中国药师，2008，11(9)：1047

4 朴淑娟，张纯.HPLC法测定林可霉素乳膏中盐酸林可霉素含量.药学实践杂志，2008，26(5)：357

5 李宁宇.盐酸林可霉素滴眼液含量测定方法的改进.中国药师，2007，10(6)：568