川楝子及其炮制品中川楝素含量测定研究*

周乐华， 李迎春，窦志英

( 1.天津市药材集团公司， 天津 300110 ； 2.天津中医药大学，天津 300193)

川楝子为楝科植物川楝MeliatoosendanSieb．et Zucc．的果实[1]，苦，寒；有小毒，具有舒肝、行气止痛、驱虫的作用，是理气止痛的常用中药[2]。本研究以川楝素为检测指标，通过对其炮制品中川楝素的测定研究，建立了简便、可靠的高效液相色谱法测定川楝子中川楝素的含量。

1 仪器与试药

1.1仪器 美国SoftaHPLC系统(6000 LDI PUMP；6000 PVW UV/VLS DETECTOR)；手动进样系统；烘箱DHG78-1(湖北省黄石市医疗器械厂)；粉碎机(武义县屹立工具有限公司)，FA 1004N型电子天平(上海精密科学仪器有限公司)，KQ-500E型医用超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司)，HH-S型水浴锅(巩义市英峪予华仪器厂)。

1.2试药 川楝子饮片(天津市中药饮片厂，批号1001084)；川楝素对照品(中国药品生物制品检定所，批号58812-37-6)。乙腈为色谱纯(天津市康科德科技有限公司)，其他试剂均为分析纯，水为超纯水。

2 方法与结果

2.1川楝子炮制品的制备 炒川楝子：取净川楝子，切厚片或碾碎，置热锅中，用文火炒至规定程度时，取出，放凉。需炒焦者，一般用中火炒至表面焦黄色，断面色加深为度，取出，放晾[1]。醋炙川楝子：净川楝子加20%醋拌润，待醋液吸尽后，文火炒干[2]。盐炙川楝子：净川楝子加20%盐，加适量水稀释拌润，待盐水吸尽后，文火炒干[2]。酒蒸川楝子：净川楝子加30%黄酒拌润，罐中蒸8 h至酒尽，文火炒干。

2.2各炮制品中川楝素含量测定

2.2.1色谱条件 色谱柱为Hypersil ODS2(250 mm×4.6 mm, 5 μm)，流动相为乙腈-水(30∶70)，流速为1 ml/min，检测波长为210 nm，柱温为35 ℃，进样量10 μl。理论塔板数按川楝素峰计算应不低于3 000。空白溶剂色谱图中在与川楝素色谱峰相应位置上无峰, 说明此系统条件无干扰。色谱图见图1。

2.2.2溶液制备

2.2.2.1对照品溶液的制备 精密称取川楝素对照品适量，加甲醇制成0.270 mg/ml的溶液，作为对照品储备液。

2.2.2.2供试品溶液的制备 精密称定川楝子生品和各炮制品粉末(过40目筛)约1 g，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇25 ml，称定重量，在一定条件下超声提取30 min，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过。重复提取3次，合并滤液蒸干，甲醇溶解定容至10 ml的量瓶中，摇匀即得。

2.2.3线性关系考查 精密吸取0.270 mg/ml川楝素对照品溶液，以甲醇配制质量浓度为0.270、0.135、0.067 5、0.033 75、0.016 875和0.008 437 5 mg/ml，在上述色谱条件下测定川楝素的峰面积值，以峰面积和质量浓度进行回归处理，得回归方程Y=2064.7X+1053.3(r=0.999 9)，在0.084 375～2.70 μg范围内呈良好的线性关系。

2.2.4精密度考查 精密吸取对照品溶液，重复进样6次，测定川楝素的含量，结果RSD为0.146%。

2.2..5稳定性考查 取同一供试品，分别于0、2、4、6、8和10 h进样测定，测得川楝素峰面积，计算RSD为2.641%。

2.2..6重现性考查 取同一批号样品, 按照供试品溶液的制备方法, 分别制备6份供试品溶液, 测定川楝素的峰面积，计算RSD为1.831%。

2.2.7加样回收率考查 精密称定己测知含量的样品6份各1 g，分别精密加入一定量的川楝素对照品，按含量测定方法进行测定，计算加样回收率，结果平均回收率100.46%，RSD为1.069%，见表1。

1. 川楝素 2.川楝素

表1 加样回收率试验结果

2.2.8样品含量测定 取各供试品溶液，按上述色谱条件，进样10 μl，测定峰面积，计算含量，结果见表2。

表2 川楝子生品及不同炮制品中川楝素含量(n=6)

3 讨论

本实验发现，通过四种不同炮制方法的成品川楝素含量比较，各炮制品中川楝素含量较生品均有所降低，川楝素可能是川楝子中的毒性成分之一，川楝素含量的降低可能与炮制后能降低毒性有关。其中醋品和酒品的含量较低，可能与其炮制过程中长时间闷润，炮制时需较长时间加热干燥，从而导致成分破坏有关。

不同炮制品具有不同的功能与主治,与其化学成分有密切的关系。炒川楝子时川楝子炒焦后可缓和苦寒之性，降低毒性，减少滑肠之弊，以疏肝理气止痛，用于胁肋疼痛及胃脘疼痛，如治肝郁化热，心腹胁肋诸痛和肝肾阴亏而又肝气横逆所致之胸脘胁肋疼痛，吞酸吐苦。盐川楝子能引药下行，作用专于下焦，长于疗疝止痛，常用于疝气疼痛，睾丸坠痛。醋川楝子能行气散疲，使疏肝理气止痛功效增加[4]。酒川楝子能理湿热之喘闷,治疗脾脏久虚, 积冷不散, 及阴气伤寒,喘闷坚胀, 四肢厥逆”。各制品均具抗炎作用，其中以盐制品镇痛抗炎作用最强[5]。

目前对川楝子的炮制研究不多，其具小毒的成分及理气止痛的有效成分尚不清楚，需结合药物化学和药理实验等做进一步的研究，以确保川楝子药用的安全性和有效性。

1 中国药典.一部．2005：29,附录20

2 龚千峰.中药炮制学．北京：中国中医药出版社，2003：117

3 赵春艳.川楝子炮制工艺改革.时珍国药研究,1997，8(6)：531

4 王尚科.川楝子应加醋拌炒一项建议.时珍国药研究,1997，8(1)：57

5 纪青华,陆兔林. 川楝子不同炮制品镇痛抗炎作用研究.中成药, 1999, 21 (4) : 181