浅淡药品生产企业无菌检验方法验证

陈万胜

浅淡药品生产企业无菌检验方法验证

陈万胜

目的探讨药品生产企业无菌检验方法验证。方法对左氧氟沙星氯化钠注射液的无菌方法验证进行总结汇报。结果通过实验建立的方法验证试验，可作为盐酸左氧氟沙星氯化钠注射液的无菌检查法。结论无菌检验方法验证能够全面掌握测定方法和能够准确检测方法达到能够全面适用于该供试品的检验，避免产生假阴性和假阳性，更有利于对药品质量的控制保证药品安全。

药品生产企业;无菌检验;方法验证

《中国药典》2005年版规定，对药品生产企业进行“无菌检查”和“微生物限度检查”时，未经过方法学验证的药物品种，按照《国药典发［2005］98号》对药品“无菌检查”和“微生物限度检查”的方法进行合理的验证，首先进行方法学验证［1］。药品生产企业无菌检验方法验证非常重要是保证药品质量的重要的措施［2］，为了能够进一步了解药品生产企业无菌检验方法验证，我们对左氧氟沙星氯化钠注射液的无菌方法验证进行汇报如下。

1 样品及设备

1.1 仪器 HTY一Ⅲ型智能集菌仪、HTY-K型培养器专用振荡仪、集菌培养器(均为杭州高得医疗器械有限公司);LRH-250一Ⅱ生化培养箱(广东医疗器械厂)。

1.2 样品 盐酸左氧氟沙星注射液规格100ml 0.2 g，批号2010268961.1.3试验用菌株:金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌、生孢梭菌、白色念珠菌及黑曲霉菌。所有菌株均来自中国生物制品检定所。

2 方法与结果

2.2 方法的验证 取样量:每管3瓶(50ml＜V＜100ml;培养基:100ml/管)。取一次性全封闭集菌器两联3套，在各套中取一管中先泵入培养基并夹紧管口，作为阳对照管。

2.2.1 将本品3瓶按薄膜过滤法滤［3］至另一管并泵入相同培养基，于两管中分别接入小于100 cfu的试验菌作为试验管1组。

2.2.2 将本品3瓶按薄膜过滤法滤至另一管，用pH7.0氯化钠-蛋白胨缓冲液作冲洗剂，分3次冲洗，每次100ml泵入相同培养基后，于两管中分别接入小于100 cfu的试验菌为试验管2组。

2.2.3 将本品3瓶按薄膜过滤法滤至另一管，用pH7.0氯化钠-蛋白胨缓冲液作冲洗剂，分5次冲洗，每次100ml泵入相同培养基后，于两管中分别接入小于100 cfu的试验菌为试验管3组

2.2.4 再取硫乙醇酸盐培养基及改良马丁培养基分别泵入另两管集菌器中作为阴性对照管。所有试验管均按规定温度将上述集菌器培养3～5 d行观察试验用菌株生长情况。

2.3 方法验证试验结果 试验管1组显示两霉菌正常生长、细菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单孢菌%枯草芽孢杆菌%生孢梭菌均不能生长;显示本品的抑菌作用将对无菌检查结果的判断有影响，应使用一定量冲洗剂消除干扰。试验管2组显示铜绿假单孢菌在48 h内生长＆金黄色葡萄球菌至第5天后才被观察到枯草芽孢杆菌及生孢梭菌仍不能生长，表明本品的抑菌作用仍未消除需进一步加大冲洗液用量。试验管3组各管按规定温度培养14d逐日观察，供试品管均澄清，阳性管生长良好，判供试品符合规定。通过实验建立的方法验证试验，可作为盐酸左氧氟沙星氯化钠注射液的无菌检查法。具体见表1。

表1 方法验证试验结果

3 讨论

2005年10月我国对药品在进行无菌检查及微生物限度检查时发布了《国药典发［2005］98号》［4］文要求药品检验应对药品检测进行方法学验证。不进行方法学验证的不能出具“符合2005年版中国药典的规定”的结论［5］。本验证方法主要是对供试品在该实验条件下有、无抑菌活性，主要通过适采取积极的方法降低和消除对实验结果的影像，以达到和避免产生假阴性和假阳性。通过无菌检验方法验证能够全面掌握测定方法和能够准确检测方法达到能够全面适用于该供试品的检验，避免产生假阴性和假阳性，更有利于对药品质量的控制保证药品安全。

作者单位:461000 河南省许昌市食品药品检验所

［1］汤光．现代药物学．中国医药科技出版社，1997，3，75．

［2］国家药典委员会．中国药典二部．人民卫生出版社，2005，12，附录89．

［3］杜平华．新编细菌检验用培养基手册．青岛海洋大学出版社，1994，5，27．

［4］中国药品生物制品检定所．中国药品检验标准操作规范．中国医药科技出版社，2005:313．

［5］国家药典委员会．中国药典临床用药须知·化学药和生物制品卷．人民卫生出版社，2005，12，544．