蒲公英甾醇粗提物抗炎作用研究

刘婧陶，韩 普，刘利本，程 瑶，张雪梅＊

（1.延边大学农学院动物医学系，吉林延吉133002；2.永吉县畜牧业管理局，吉林永吉132200）

蒲公英（Herba Taraxaci）为菊科植物蒲公英（Taraxacum mongolicum Hand-Mazz）的 干 燥 全草，具有清热解毒、消肿散结、利湿、利尿通淋等功效，用于疔疮肿痛、乳痈、眼痛目赤、肺痈、湿热黄疸和热淋涩痛等症的治疗［1］。现代药理研究表明，其具有抗氧化、抗菌和抗炎等多种作用［2-4］。蒲公英含有多种有效成分，蒲公英甾醇为其主要有效成分之一［5］。本试验从体内抗炎角度探讨蒲公英甾醇对醋酸致小鼠毛细血管通透性增强，二甲苯致小鼠耳廓肿胀和角叉菜胶致大鼠足趾肿胀的保护作用，为蒲公英甾醇的药理研究和进一步开发利用提供试验依据。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 药品 蒲公英购于吉林省延吉市延西大药房。

1.1.2 主要试剂 伊文思蓝为北京索莱宝科技有限公司产品；角叉菜胶为Sigma公司产品；醋酸、二甲苯、无水乙醇、乙醚等均为天津市科密欧化学试剂有限公司产品。

1.1.3 实验动物 昆明种小鼠，雌雄各半，18g±2 g，Wistar大鼠，200g±20g，均购自延边大学实验动物中心。

1.1.4 仪器 RE-52AA旋转蒸发器为上海亚荣生化仪器厂产品，U-3900紫外-可见分光光度计为日本天美株式会社日立制作所生产，6mm打孔器。

1.2 方法

1.2.1 蒲公英甾醇的提取 蒲公英干燥全草100g粉碎，无水乙醇浸泡过夜，加热回流，过滤，重复2次，合并滤液，浓缩。100mL／L氢氧化钠水解，40℃恒温过夜。乙醚萃取，分离，回收乙醚得到蒲公英甾醇粗提物［6］。

1.2.2 小鼠腹腔毛细血管通透性试验 小鼠30只，随机分为模型组，药物高、中、低剂量组和阳性组，每组5只。药物组分别给予蒲公英甾醇粗提物750、375、187.5mg／kg，连续灌胃5d，模型组给予同体积生理盐水，阳性组一次性腹腔注射地塞米松2.5mg／kg。末次给药后1h各组小鼠尾静脉注射5mL／L伊文思蓝0.2mL／只，并立即腹腔注射6mL／L醋酸0.1mL／10g。20min后处死小鼠，生理盐水冲洗腹腔，收集洗液，离心，取上清，分光光度计于590nm处测OD值［7］。

1.2.3 二甲苯致小鼠耳廓肿胀试验 小鼠30只，分组与给药方法同1.2.2。末次给药后1h，将二甲苯50μL／只涂于小鼠右耳廓两面致炎，左耳不涂为对照。30min后处死小鼠，用6mm打孔器分别在小鼠左耳和右耳同一位置打下组织块，称重，计算肿胀度。肿胀度=右耳组织块重-左耳组织块重［8］。

1.2.4 角叉菜胶致大鼠足趾肿胀试验 大鼠30只，分组与给药方法同1.2.2。末次给药后1h，各组大鼠右后足足趾同一位置注射10g／L角叉菜胶0.1mL／只，分别在注射后0.5、1、2、4、6h测量足趾厚度，计算肿胀率。肿胀率=（致炎后足趾厚-致炎前足趾厚）／致炎前足趾厚［9］。

2 结果

2.1 蒲公英甾醇提取率

100g蒲公英全草中提取到5.36g蒲公英甾醇粗提物，即蒲公英甾醇提取率为5.36%。

2.2 蒲公英甾醇对醋酸致小鼠腹腔毛细血管通透性的影响

与模型组小鼠相比，蒲公英甾醇粗提物低剂量组和中剂量组腹腔洗液OD值降低但无显著差异，而高剂量组与模型组相比存在显著性差异（P＜0.05）。结果表明，蒲公英甾醇对醋酸致小鼠腹腔毛细血管通透性有一定抑制作用（表1）。

2.3 蒲公英甾醇对二甲苯致小鼠耳廓肿胀的影响

与模型组小鼠相比，蒲公英甾醇粗提物低剂量组耳廓肿胀程度减轻但无显著差异（P＞0.05），而中剂量组与模型组相比存在显著性差异（P＜0.05），高剂量组与模型组相比存在极显著性差异（P＜0.01）。结果表明，蒲公英甾醇能够有效抑制小鼠耳廓肿胀程度（表1）。

2.4 蒲公英甾醇对角叉菜胶致大鼠足趾肿胀的影响

造模后0.5h和1h，蒲公英甾醇粗提物低、中、高剂量对大鼠足趾肿胀的抑制作用不明显（P＞0.05）；2h和4h时，低、中、高剂量组能显著性抑制肿胀程度（P＜0.05）。造模后6h，低、中、高剂量组与模型组比较，对肿胀抑制程度存在极显著性差异（P＜0.01）。结果表明，蒲公英甾醇能够抑制由角叉菜胶诱导的大鼠足趾肿胀（表2）。

表1 蒲公英甾醇对醋酸致小鼠腹腔毛细血管通透性增强和二甲苯致小鼠耳廓肿胀的影响Table 1 The effects of taraxasterol on acetic acid-induced capillary permeability of abdominal cavity and dimethyl benzene-induced ear swelling in mice

表2 蒲公英甾醇对角叉菜胶致大鼠足趾肿胀的影响Table 2 The effect of taraxasterol on carrageenan-induced rat paw swelling

3 讨论

炎症是动物机体对各种致炎因素及其所引起的损伤产生的防御性反应。其早期为急性炎症，病理过程一般表现为毛细血管扩张、通透性亢进、渗出和水肿。从炎症的本质上看，炎症消除与消灭各种致炎因素，促进损伤组织修复，是一种以防御为主的病理过程，但也会给机体带来损害和痛苦，严重的炎症反应可危及生命。因此，在医学理论指导下，抵抗有害性炎症近年来成为热门研究课题［10］。

蒲公英是我国重要的传统中药，在民间和临床上具有广泛的应用，特别是用于多种炎性疾病的治疗。本实验室已证明蒲公英提取物具有明显的体内外抗炎作用［11-12］，但蒲公英抗炎成分不清。蒲公英甾醇是蒲公英的主要有效成分之一，本试验从体内抗炎角度探讨蒲公英甾醇的体内抗炎作用，从而确定蒲公英抗炎成分，为新药开发和临床应用提供理论基础。试验结果显示，蒲公英甾醇对醋酸致小鼠腹腔毛细血管通透性增强、二甲苯致小鼠耳廓肿胀和角叉菜胶致大鼠足趾肿胀炎症反应均有抑制作用。表明蒲公英甾醇对早期炎症有抑制作用，对慢性炎症或炎症后期抗炎效果还有待于研究。

［1］ 路保通，张 鸯，胡新安.蒲公英有效成分提取及其抑菌活性作用［J］.中国兽医杂志，2008，44（5）：45-47.

［2］ Hu C，Kitts D D.Antioxidant，prooxidant，and cytotoxic activities of solvent-fractionated dandelion（Taraxacum officinale）flower extracts in vitro［J］.J Agric Food Chem，2003，51（1）：301.

［3］ 吕俊华，邱士翠，张连同，等.蒲公英体外抑菌作用研究［J］.时珍国医国药，2002，13（4）：215-216.

［4］ Kristo T S，Terdy P P，Simandi B，et al.Efficiency of supercritical fluid extraction for the production of non-volatile terpenoids from Taraxaci radix［J］.Acta Pharm Hung，2001，71（3）：318.

［5］ 姜 宁，宋新波.蒲公英的药理研究进展［J］.中国中医药杂志，2008，6（12）：12-23.

［6］ 庞利苹，徐雅琴.植物甾醇提纯及单体分离工艺的研究进展［J］.中国粮油学报，2010，25（3）：124-128.

［7］ 唐 琼，朱 玲，杨云霞，等.痛风舒浸膏粉对血液流变性及毛细血管通透性的影响［J］.四川生理科学杂志，2002，24（3）：121-123.

［8］ 郝 伟，李田文，张沈平.浓止喘消咳液的抗炎及调节免疫作用的实验研究［J］.沈阳医学院学报，2002，4（1）：19-21.

［9］ 景志杰，牛拴成，张轩萍.化痔灵片对大鼠实验性炎症模型的抗炎作用［J］.山西医科大学学报，2006，37（3）：264-265.

［10］ 陈艳梨.余甘子提取物的抗炎作用研究［J］.国际医药卫生导报，2011，17（1）：17-20.

［11］ 平家奇，刘利本，邹 娟，等.蒲公英提取物体内抗炎作用的实验研究［J］.延边大学农学学报，2010，32（1）：52-55.

［12］ Liu L B，Xiong H Z，Ping J Q，et al.Taraxaum officinale protects against lipopolysaccharide-induced acute lung injury in mice［J］.J Ethnopharmacol，2010，20（2）：392-397.