饼干中香兰素含量的测定

杨丽霞

(周口师范学院，河南周口 466000)

饼干中香兰素含量的测定

杨丽霞

(周口师范学院，河南周口 466000)

采用紫外—可见分光光度法测定了饼干中香兰素的含量。其最大吸收波长为435.0 nm，吸光度与香兰素含量呈正比，建立线性方程：y=7．493 42 x+0．001 3(r=0．999 7)，线性范围为0.010 4～0.165 2 g/L，加标回收率为99.6%，RSD为0.36%。该方法简便快速、结果可靠，适用于测定饼干中香兰素的含量。

香兰素;可见分光光度法;硫代巴比妥酸;饼干

香兰素是人工合成的第一种香精，又名香草醛，学名3-甲氧基-4-羟基苯甲醛，是一种重要的广谱型香料和有机合成香料，是食品添加剂行业中不可缺少的重要原料。因香气幽雅、爽快，可直接应用于化妆品、香皂、香烟、糕点、糖果、饼干、奶粉以及烘烤食品等。但是大剂量使用香兰素可以导致头痛、恶心、呕吐、呼吸困难，甚至损伤肝、肾，对人体有较大危害。为了加强食品卫生监督，必须建立食品中香兰素的快速测定方法［1-2］。

目前测定食品中香兰素含量的方法主要有分光光度法、薄层法、气相色谱和气质联用法、微分脉冲伏安法、比色法、电化学法、以及高效液相色谱法等［3］。比色法、电化学法操作繁琐，测定结果容易偏高;气相、液相色谱、微分脉冲伏安法预处理麻烦，且实验操作费用贵，不宜推广使用。本实验拟建立紫外—可见分光光度法测定饼干中香兰素含量的方法，此方法不需要繁琐的预处理，仪器设备简单、易操作，实验结果令人满意。

1 实验部分

1.1 仪器与试剂

UV-2102型紫外—可见分光光度计，日本分光公司;KQ-500E型超声波清洗器，昆山市超声仪器有限公司;尼龙有机系滤膜0.45 m，平根教学仪器厂。

香兰素标准溶液：精确称取香兰素(AR)0.074 8 g，溶于体积分数为50%的乙醇溶液中，配成50 mL浓度为1×10-2mol/L的香兰素溶液，然后取10 mL用体积分数为50%的乙醇溶液稀释并定容至100 mL作为香兰素标准溶液。

硫代巴比妥酸(TBA，BR)溶液：称取0.505 0 g TBA固体溶于50 mL体积分数为50%的乙醇溶液中，在35℃水浴使其溶解，然后定容于50 mL容量瓶中配成浓度为1×10-2mol/L的TBA储备液。

盐酸溶液、乙醇溶液(体积分数为50%)、蒸馏水等。

样品：江顺薄脆饼干、江顺夹心饼干、吉人奶香酥饼干、江顺熊仔饼干、三味园香蕉威化饼干。

1.2 测定原理

在盐酸介质中，无色的香兰素与生色试剂硫代巴比妥酸(TBA)反应生成黄绿色缩合物。该缩合物在435.0 nm处有最大吸收，其吸光度与香兰素含量呈正比［4］。

1.3 测定方法

在两支25 mL比色管中各加入12 mL盐酸、4.5mL TBA溶液，其中一支比色管内加入1 mL样品溶液，用水定容至25 mL;另一支比色管直接加水定容至25 mL，作为参比溶液。摇匀，20℃水浴30 min后放至室温，在435.0 nm处测定其吸光度。

1.4 饼干样品的制备

准确称取2.000 0 g饼干样品，加入40 mL 50%乙醇溶液，超声处理20 min，溶液用0.45 μm的滤膜过滤，滤液用体积分数为50%的乙醇溶液定容至100 mL，摇匀，做为样品溶液，待测。

2 结果与分析

2.1 测定波长的选择

在分光光度计上于200～600 nm波长区间按照测定方法进行扫描，确定最大吸收波长435.0 nm为检测波长，扫描结果见图1。

2.2 标准曲线的制作

在25mL比色管中分别准确加入0、0.2、0.4、0.6、0.7、0.8、1.0mL香兰素标准溶液，依次加入4.5mL TBA溶液、12 mL盐酸溶液，用水定容至25 mL，摇匀，20℃水浴30 min后放至室温，在波长435.0 nm处测定吸光度并绘制标准曲线(见图2)。

线性回归方程为y=7．493 42 x+0．001 3(r= 0．999 7)，线性范围0.010 4～0.165 2 g/L。

图1 香兰素吸收光谱

2.3 精密度实验

按照1.3的实验方法在435.0 nm处连续6次测定标准溶液的吸光度，结果见表1。其相对标准偏差(RSD)为0.444 2%，说明精密度良好。

表1 仪器精密度实验结果(n=6)

图2 香兰素含量标准曲线

2.4 稳定性实验

按照1.3的实验方法在435.0 nm处测定标准溶液的吸光度。每间隔10 min测定一次，连续实验1 h，结果见表2。RSD为0.629 8%，说明该反应体系稳定性良好。

表2 稳定性实验结果

2.5 样品分析

准确称取5种饼干样品，江顺熊仔饼干2.005 6 g，江顺夹心饼干2.001 0 g，吉人奶香酥饼干2.0005 g，江顺薄脆饼干2.003 6 g，三和味园香蕉威化饼干2.003 2 g，按照测定方法在435.0 nm处测定其吸光度。

分析结果见表3。由表可知，江顺薄脆饼干的香兰素含量最低，而吉人奶香酥饼干的香兰素含量是最大的。据RSD值也可看出该方法重现性良好。

表3 饼干重现性实验结果(n=5)

2.6 加标回收率实验

准确称取同一批号饼干5份，其中4份加入香兰素固体，依次测定饼干中香兰素含量，并根据加标回收率=(加标样品测定值-样品测定值)/加标量×100%计算加标回收率，结果见表4。

由表4数据可知样品的平均回收率为99.6%、RSD为0.36%，说明此法准确度高。

表4 回收率实验结果(n=4)

3 结论

研究表明，本实验建立的紫外—可见分光光度法是一种简单快速、成本低、容易操作的方法，具有良好的重现性和较高的准确度，可以较好地检测饼干中香兰素的含量。在所测的5种饼干样品中，江顺薄脆饼干的香兰素含量最低，而吉人奶香酥饼干的香兰素含量是最大的。此法亦可以为其他食品中香兰素测定提供一种分析方法。

［1］ 刑晓平，崔 刚.毛细管电泳安培检测法快速测定巧克力中的香兰素［J］.食品工业科技，2006，27(10)：186-188.

［2］ 吴方宁，丁兴梅，丁 敏，等.香兰素的合成及技术展望［J］.化工技术与开发，2006，2(2)：6-11.

［3］ 余达柱.食品中香兰素的薄层色谱法测定［J］.广西预防医学，2001，7(2)：119.

［4］ 张 勇，林国卫，夏瑾华，等.可见分光光度法测定麦片中的香兰素含量［J］.食品科学，2010，(04)：233-235.

O657.32

B

1003-3467(2012)06/08-0052-03

2012-03-21

杨丽霞(1977-)，女，讲师，研究方向为食品分析，E-mail：fcaiting@yahoo.com.cn。