两种肺炎衣原体抗体检测方法的比较及临床应用分析

李 航 李政国 马春燕

(河南开封市第一人民医院检验科，河南 开封 475000）

肺炎衣原体(Chlamydia pneumoniae)是急性呼吸系统感染性疾病 的常见病原体之一，易引起肺炎、支气管炎、咽炎和鼻窦炎等。起病缓慢，临床症状与肺炎支原体相似，表现为咽痛、咳嗽、咳痰、发热等，一般症状较轻。CP不但可以导致呼吸系统疾病，还可引起神经系统，循环系统等肺外其它系统的严重并发症。因肺炎衣原体病原菌缺乏细胞壁，对临床上常规治疗肺炎的药物不敏感，仅对大环内酯类，四环素，氯霉素，强力霉素等抗菌素治疗有效，为指导临床正确合理应用抗菌素，对是否为肺炎衣原体感染的血清进行早期快速诊断显得尤其重要。我们对2011年10月至2012年3月收治入院的226例疑似CP感染的呼吸道感染患者，同时进行间接荧光法和间ELISA法的检测，并分析对肺炎衣原体感染早期诊断的临床应用价值。

1 仪器与材料

1.1 一般资料

2011年10月至2012年3月收治入我院呼吸科的疑似CP感染的226例(男132，女94)呼吸道感染患者，男：女=1.4ı1；年龄23～94岁。

1.2 仪器安图生物全自动酶标仪2010型；安图生物全自动洗板机，德国莱卡荧光显微镜。

1.3 试剂欧蒙肺炎衣原体抗体诊断试剂盒(间接荧光法)(德国欧蒙生产)；肺炎衣原体(CP)诊断试剂盒(ELISA间接法)深圳博卡生物技术研究所生产)。

1.4 样本采集患者入院第二天采静脉血3mL，分离血清于-20℃冰冻保存，用于CP IgM抗体检测。

2 方法和结果

2.1 间接免疫荧光试验(indirect immunofluorescent assay，IIF)采用德国欧蒙间接荧光试剂盒测定CP IgM抗体滴度，结果判定：IgM≥1∶10为阳性。

2.2 酶联免疫吸附试验(ELISA)按试剂盒说明书测定，S/CO值≥2.1为阳性。结果见表1。

表1 两种不同方法检测血清中CPIgM抗体的比较

χ2=1.841(P＞0.05)经过 χ2检验，两种方法差异无显著性(P＞0.05)

2.3 根据临床病情严重程度将CP感染分为3级：①轻度：仅存在呼吸道症状、体征，肺部X线改变轻微；②中度：以呼吸道症状、体征为主，肺部X线改变明显；③重度：除②临床表现以外，同时合并有神经系统、循环系统等严重肺外并发症。收集70例确诊CP感染患者血清进行间接免疫荧光试验，用Spearman等级相关统计方法，分析血清CPIgM抗体滴度与患者病情严重程度之间相关性，结果见表2。

表2 70例患者病情严重程度与CPIgM抗体滴度的统计

70例CP感染患者中，轻度CP感染38例(54.3%)，中度感染17例(24.3%)，重度感染15例(21.4%)；CP抗体滴度1∶10有24例(34.3%)，滴度1∶32有15例(21.4%)，滴度1∶100有3例(4.3%)，滴度1∶320有9例(12.9%)。滴度1∶1000有19例(27.1%)，经SPSS17.0统计分析，血清CP抗体滴度与CP感染患者的病情分级呈正相关r=0.894，P＜0.05)。

3 讨 论

肺炎衣原体(Chlamydia pneumoniae Cp)是一类严格真核细胞内寄生，具有独特发育周期，并能通过细菌滤器的原核细胞型微生物，具高度传染性。肺炎衣原体属严格的人类病原体，无动物储存宿主。主要传播途径是通过人与人之间的呼吸道飞沫进行传播，感染后潜伏期平均为30d左右，期间该病原体可以刺激体内能产生特异性的体液免疫和细胞免疫，但这种免疫保护性很弱，容易造成呼吸道反复和持续感染。有研究表明肺炎衣原体在机体内持续感染可长达9年，甚至在应用抗生素治疗期间仍存在持续感染[1]。CP感染在普通人群中很常见，是成人和儿童呼吸道感染及非典型性肺炎的重要病原体之一，可以引起的疾病包括肺炎、咽炎、喉炎、支气管炎，以及百日咳样疾病与反应性关节炎[2，3]等。研究表明，随着患者年龄增长CP的感染率也会随之升高，成年人感染率大于50%，老年人可达到75%[4]。CP感染分布呈双峰型，临床上小儿患者感染后症状，体征较轻，而合并有心脑肾等基础疾病患者或者老年人感染后病情较重。有研究表明.肺炎衣原体感染还与肺气肿[5]，慢性阻塞性肺疾病(COPD)[6]以及动脉粥样硬化相关[7，8]。

近年来，肺炎衣原体感染的发病率逐渐增高，其感染初期症状不典型，临床上常规用药治疗效果欠佳，因此，早期快速诊断对于临床选择恰当的治疗方案十分重要。目前对肺炎衣原体的检测方法主要有两种，一种是病原学检查：直接涂片，镜下观察包涵体，或以荧光或酶标记的种特异性单克隆抗体直接检测标本中肺炎衣原体抗原；另外就是血清学方法，主要包括ELISA法和微量免疫荧光试验（microimmunofluorescence test，MIF），其中被MIF公认为“金标准”。通过我们的试验研究和分析表明，间接ELISA法适用于检测CP感染患者血清中特异性抗体的变化，其敏感度好，特异性强，方法成熟，操作简便，价格低廉与间接荧光免疫法检测结果比较，阳性率无显著差异(P＞0.05)，适合临床大批量筛查，以及流行病学调查。间接荧光法能准确测定出CP感染患者血清中抗体滴度的高低，有助于指导临床医师判断患者的病情发展程度，为临床制定有效的诊疗方案提供科学依据。

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