HPLC法测定复方氨酚烷胺胶囊中氯苯那敏的含量

2012-11-21 08:25刘杰彦雷双燕涂小玲唐芳
中国现代药物应用 2012年15期
关键词:那敏氯苯量瓶

刘杰彦 雷双燕 涂小玲 唐芳

HPLC法测定复方氨酚烷胺胶囊中氯苯那敏的含量

刘杰彦 雷双燕 涂小玲 唐芳

目的 建立复方氨酚烷胺颗粒中马来酸氯苯那敏的含量的测定方法。方法 色谱柱:ZORBAX EclipseXDB-C18(4.6 mm×150 mm,5 μm),流动相:乙腈-0.2%十二烷基磺酸钠溶液 (60∶40)(0.1%磷酸调节pH值至3.0),检测波长215 nm。结果 马来酸氯苯那敏在30.8~154 μg范围内线性关系良好,回归方程为A=2155.2C+512.87,相关系数r=0.9992。平均回收率为99.4%,RSD为0.29%。结论 本方法简便、灵敏、准确。

复方氨酚烷胺胶囊;马来酸氯苯那敏;高效液相色谱

复方氨酚烷胺胶囊主要用于缓解普通感冒或流行感冒引起的发热、头痛、咽痛、鼻塞、打喷嚏等症状,效果较好,临床上得到了广泛的应用,但其部颁标准中仅对乙酞氨基酚和盐酸金刚烷胺的含量进行了控制[1]。马来酸氯苯那敏具有较强的抗组织胺作用,可引起嗜睡及轻度抑制中枢神经系统,严重者则表现为室性心动过速,甚至心室纤颤[2]。为了更好地保证药品质量,有必要对该品种中的马来酸氯苯那敏进行含量测定。我们参照相关文献,制定了本品马来酸氯苯那敏的测定方法,取得满意效果。

1 仪器与试剂

WATERS 515高效液相色谱仪,配2996 PAD检测器,717plus自动进样器,Empower工作站;马来酸氯苯那敏对照品(中国药品生物制品检定所购买),复方氨酚烷胺胶囊为市售品,乙腈为色谱纯,水为重蒸水,其它试剂均为分析纯。

2 方法与结果

2.1 色谱条件

色谱柱:ZORBAX EclipseXDB-C18(4.6 mm×150 mm,5 μm),流动相:乙腈-0.2%十二烷基磺酸钠溶液(60∶40)(0.1%磷酸调节 pH值至3.0);流速为1.0 ml/min;进样量:20 μl。检测波长215 nm,柱温为30℃。理论板数以各组分峰计均不低于3000,各色谱峰的分离度均符合要求。(色谱图1B中马来酸峰在前,氯苯那敏峰在后)。

2.2 对照品溶液制备

精密称取105℃干燥至恒重的马来酸氯苯那敏对照品适量,加流动相溶解并稀释制成每1 ml中含马来酸氯苯那敏80 μg的溶液,作为对照品溶液。

2.3 供试品溶液的制备

取胶囊20粒,求得平均粒重,将内容物研细,精密称取适量(相当于含马来酸氯苯那敏4 mg)置50 ml量瓶中,加流动相适量,振摇使溶解并稀释至刻度,摇匀,滤过,作为供试品溶液。

2.4 阴性对照液的制备

按处方比例及制备工艺制备的不含马来酸氯苯那敏的阴性对照样品,按供试品溶液制备方法制备,为阴性对照溶液。

2.5 系统适用性试验

分别精密量取阴性对照液、对照品溶液、供试品溶液各3 ml,置三个50 ml量瓶中,加流动相稀释至刻度,摇匀,取20 μl注入液相色谱仪,按上述色谱条件测定,结果见图1。空白对照溶液色谱图中无与氯苯那敏色谱峰保留时间相同的色谱峰,说明处方中其它成分对氯苯那敏的测定无干扰。

图1 马来酸氯苯那敏的HPLC图谱

2.6 线性关系考察

精密称取105℃干燥至恒重的马来酸氯苯那敏对照品约16 mg置50 ml量瓶中,加流动相溶解并稀释至刻度,摇匀,精密量取 1.0,2.0,3.0,4.0和 5.0 ml置于10 ml量瓶中,用流动相稀释至刻度,精密吸取上述对照品溶液各20 μl注入高效液相色谱仪,测定,以色谱峰面积为纵坐标、浓度为横坐标,绘制标准曲线,得线性回归方程为A=2155.2C+512.87,相关系数r=0.9992。结果:马来酸氯苯那敏在30.8~154 μg范围内线性关系良好。

2.7 精密度试验

精密吸取同一份马来酸氯苯那敏对照品溶液重复进样6次,测定氯苯那敏的峰面积,计算峰面积值的RSD=0.92%,结果表明仪器的进样精密度良好。

2.8 稳定性试验

取同一批供试品溶液适量置室温下,每间隔2 h测定1次,连续测定6次。结果马来酸氯苯那敏色谱峰面积的RSD分别为0.56%(n=6)。表明该药物溶液在12 h内稳定性良好。

2.9 重复性试验

取同一批号的样品6份,按供试品溶液制备方法制成6份溶液,并按以上色谱条件测定,测得氯苯那敏平均含量为标示量的99.0%,RSD为0.8%。

2.10 加样回收率试验

精密称取己知含量的样品适量(批号:20110301,含马来酸氯苯那敏为标示量的99.0%),置25 ml量瓶中,另精密称取105℃干燥至恒重的马来酸氯苯那敏对照品25.2 mg置25 ml量瓶中,加流动相溶解并稀释至刻度,摇匀,分别精密量取0.8、1.0、1.2 ml置上述供试品量瓶中,加流动相稀释至刻度,摇匀,滤过。照样品测定项下方法测定,结果见表1。

表1 加样回收率结果(n=9)

由表1可知,平均回收率为99.4%,RSD为0.29%,表明准确度良好。

2.11 三批供试品马来酸氯苯那敏含量测定

分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液,按上述色谱条件测定,以外标法计算,结果见表2。

表2 氯苯那敏含量测定

3 讨论

3.1 供试品溶液和对照品溶液中马来酸氯苯那敏呈解离状态存在,故在色谱图中出现有马来酸峰(如图1B)。因此在马来酸氯苯那敏的含量测定时是以氯苯那敏峰面积[3]来计算的。

3.2 曾试用马来酸氯苯那敏的最大吸收波长作为检测波长,但灵敏度很低。还曾试用200、205 nm等波长作为检测波长,马来酸氯苯那敏的吸收度增大,但基线噪声明显增大。在215 nm波长处,基线噪声不是很大,故选215 nm作为波长。

3.3 通过对本文流动相体系和文献[4]磷酸二氢钾溶液-甲醇体系流动相的比较,发现乙腈-0.2%十二烷基磺酸钠溶液(60∶40)(0.1%磷酸调节pH值至3.0)体系所得色谱图,马来酸氯苯那敏的峰形优,分离效果好,保留时间适中。

[1]地标升国标第三册:195

[2]何鸽飞,张顺芝,何仲春.复方氨酚烷胺致精神症状1例.药物流行病学杂志,2007,16(2):120.

[3]南楠,朱霁虹,等.HPLC法测定万辉化痰止咳露中磷酸可待因、盐酸麻黄碱和马来酸氯苯那敏的含量.药物分析杂志,2000,(1):7.

[4]罗萍,曾昭宁,罗灼雨.HPLC法测定复方氨酚烷胺胶囊中马来酸氯苯那敏的含量.中国药业,2006,7(1):37-38.

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