EV71与CoxA16感染手足口病患儿体液免疫研究

吴 娜 张慎荣 滕 淑 朱妍艳 杭州市儿童医院 杭州310000

EV71与CoxA16感染手足口病患儿体液免疫研究

吴 娜 张慎荣 滕 淑 朱妍艳 杭州市儿童医院 杭州310000

手足口病 肠道病毒71型 A组柯萨奇病毒 体液免疫

手足口病（hand-foot-and-mouth disease，HFMD）是儿童尤其是婴幼儿常见传染病之一，主要由肠道病毒尤其以EV71及CoxA16感染最为常见。HFMD患儿的临床经过及转归差别较大，与患儿机体免疫状况可能存在一定关系。本研究对我院2012年4月—10月收治的112例EV71阳性、53例CoxA16阳性HFMD患儿的临床资料进行分析，探讨EV71和CoxA16感染后患儿体液免疫水平的变化。

1 临床资料

112例EV71阳性及53例CoxA16阳性HFMD患儿均为我院感染科住院病例，其中男95例，女70例，年龄3个月～7岁，平均年龄（2.18±1.34）岁。112例EV71阳性病例按临床表现、并发症分为三组，其中危重症组22例（占19.6%），重症组40例（占35.7%），轻症组50例（占44.6%）。诊断及分度标准均符合卫生部颁布的手足口病预防控制指南（2010年版）[1]。另设健康儿童15名为正常对照组。EV71各组、EV71组与CoxA16组、正常对照组年龄、性别差异均无统计学意义（P＞0.05）。

2 方法

2.1 检测指标及方法 标本采集：各组患儿均于入院后2h内（均未静脉使用丙种球蛋白）采集静脉血送检体液免疫功能。采集患儿咽拭子（48小时内）或粪便进行病毒核酸的提取。主要试剂和仪器：体液免疫功能采用HITACHI 7600型全自动生化分析仪检测，试剂采购于芬兰ORION DIAGNOSTICA公司，采用免疫比浊法测定。病毒核酸检测采用Geneaid公司的Viral Nucleic Acid extraction KitII、上海辉睿生物科技有限公司的荧光RT-PCR试剂盒，在ABI 7500荧光定量PCR仪上进行。

2.2 统计学方法 应用SPSS13.0软件进行统计分析，计量资料以（±s） 表示，两组样本均数比较采用独立样本t检验，多组样本均数间的比较采用单因素方差分析（ANOVA），方差齐性者两两比较采用LSD检验。P＜0.05认为差异有统计学意义。

3 结 果

EV71各组及正常对照组组间IgG、IgM水平不同（P＜0.05）。两两比较提示危重症组IgG、IgM水平高于轻症组及正常对照组；重症组IgG水平高于轻症组及正常对照组，EV71各组IgM水平均高于正常对照组，差异有统计学意义（P＜0.05）；危重症组与重症组比较，IgG、IgM水平差异均无统计学意义（P＞0.05）。见表1。

表1 EV71感染各组及正常对照组体液免疫水平比较（±s） g/L

注：与正常对照组比较*P＜0.05；与轻症组比较，#P＜0.05

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与CoxA16组比较，EV71组IgA、IgG、IgM水平升高，差异有统计学意义（P＜0.05），两组C3、C4水平差异无统计学意义（P＞0.05），见表2。CoxA16组与正常对照组比较，各指标差异均无统计学意义（P＞0.05）。

表2 EV71与CoxA16感染手足口病患儿体液免疫水平比较（±s） g/L

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4 讨论

HFMD以发热和手、足、口腔等部位出现斑丘疹、疱疹为主要特征，部分患儿可出现脑炎、脑膜炎、脑脊髓炎、神经源性肺水肿和心肌炎等严重并发症。目前引发手足口病的肠道病毒共有多种，以EV71和CoxA16等肠道病毒最常见[2-4]，其中EV71更易引起HFMD的中枢神经系统（CNS）并发症[5-6]。

手足口病传染源主要是患者和隐性感染者，多数人感染后呈隐性感染状态。而手足口病在儿童及婴幼儿，尤其3岁以下婴幼儿普遍易感，且显性感染比例明显高于成人[7]。其原因考虑与婴幼儿消化道及呼吸道屏障功能弱及黏膜表面SIgA含量低，病毒感染后容易入侵有关。肠道病毒在体内的复制、清除过程与机体免疫功能相关。其中体液免疫系统发挥着免疫监视与防御病毒感染的作用，是机体特异性免疫的重要组成部分[8]，尤其以IgA、IgG、IgM起重要作用，而补体主要参与机体免疫应答及自稳功能，在血清中含量相对稳定。

国内外研究显示，HFMD发病后存在免疫功能亢进，机体处于免疫紊乱和动态失衡状态[9]。本研究中，EV71危重症组IgG、IgM水平高于轻症组及正常对照组，重症组IgG水平高于轻症组及正常对照组，EV71各组IgM水平均高于正常对照组，差异具有统计学意义。提示随着病情加重，体液免疫进一步亢进。重症HFMD患儿产生强烈的免疫反应，在保护机体及促进疾病恢复的同时，可能对机体造成一定程度的损伤，使部分患儿病情向危重症进展。EV71组IgA、IgG、IgM水平高于CoxA16组，差异具有统计学意义（P＜0.05）。提示不同肠道病毒感染后，患儿体液免疫功能状态不同，EV71感染后免疫系统反应较CoxA16感染后明显活跃。其机制可能与EV71具有显著的嗜神经性，可通过神经通路侵犯中枢神经系统导致神经内分泌肽分泌紊乱，而部分神经内分泌肽可通过神经-内分泌-免疫系统调节通路，对体液免疫起到调节作用有关[6-7]。CoxA16感染所致手足口病临床症状多轻微，本研究中53例CoxA16阳性HFMD患儿仅3例重症、2例危重症，与正常对照组比较各指标均无差异，提示CoxA16感染后HFMD患儿体液免疫功能无明显亢进。

EV71感染的HFMD患儿存在体液免疫功能紊乱，随着病情进展，体液免疫水平变化更加显著，而CoxA16感染的HFMD患儿体液免疫功能无明显紊乱。在临床工作中，应加强HFMD患儿病原学及体液免疫功能水平监测，这对于判断及改善患儿疾病转归、预后有一定的意义。

［1］中华人民共和国卫生部.手足口病预防控制指南（2010年版）[S/OL].[2010-4-21].http://www.moh.gov.cn.

［2］Chong CY，Chan KP，Shah VA，et al.Hand,foot and mouth disease in Singapore：a comparison of fatal and non-fatal cases［J］.Acta Paediatr，2003，92（10）：1163-1169.

［3］Linlin Li，Yaqing He，Hong Yang，et al.Genetic Characteristics of Human Enterovirus 71 and Coxsackievirus A16 Circulating from 1999 to 2004 in Shenzhen，People's Republic of China［J］.J Clin Microbiol，2005，43（8）：3835-3839.

［4］Wits E，Palacios G，Cinek O，et al.High prevalence of human enterovirus a infections in natural circulation of human enterviruses［J］.J Clin Microbiol，2006，44（11）：4095-4100.

［5］McMinn PC.An overview of the evolution of enterovirus 71 and its clinical and public health significance［J］.FEMS Microbiol Rev，2002，26（1）：91-107.

［6］Sun LM，Zheng HY，Zheng HZ，et al.An enterovirus 71 epidemic in Guangdong Province of China，2008：epidemiological，clinical,and virogenic manifestations［J］.Jpn J Infect Dis，2011，64（1）：13-18.

［7］田野，予毅，叶宁，等.手足口病合并病毒性脑膜炎160例临床分析［J］.江苏医药，2010，36（2）：220-221.

［8］陈慰锋.医学免疫学［M］.北京：人民卫生出版社，2001：32.

［9］ Wang SM，Lei HY，Huang KJ，et al.Pathogenesis of enterovirus 71 brainstem encephalitis in pediatric patients:roles of cytokines and cellular immune activation in patients with pulmonary edema［J］.J Infect Dis，2003，188（4）：564-570.

2013-04-20