不同保存期悬浮红细胞制备洗涤红细胞后质量指标的差异

陈峰 王丽 孙韵 倪慧婷 周华平

不同保存期悬浮红细胞制备洗涤红细胞后质量指标的差异

陈峰 王丽 孙韵 倪慧婷 周华平

2012 年颁布的《全血及成分血质量要求》（G18469-2012）于7月1日开始实施，新版对洗涤红细胞制品部分质量控制项目和要求作了调整，新增了上清液蛋白质含量和溶血率两项指标。本文分析了不同保存期悬浮红细胞制备洗涤红细胞该两项指标检测情况，报道如下。

1 材料和方法

1.1 材料 （4±2）℃保存的悬浮红细胞来源于浙江省血液中心，（4±2）℃冷藏1 000ml四联0.9%氯化钠溶液和ACD-B抗凝血袋（四川南格尔生物医学股份有限公司）。

1.2 仪器 SORVALL 12BP大容量离心机、泰尔茂TSCD-Ⅱ无菌接管机、紫外分光光度计。

1.3 方法

1.3.1 分组 用于制备洗涤红细胞2U/袋的悬浮红细胞按保存期5～9d、10～14d、15～19d、20～24d依次分为A、B、C、D组，每组各10袋。

1.3.2 洗涤方法 将悬浮红细胞经无菌接管连接上四联0.9%氯化钠溶液，第1次离心2 000r/min，共8min，去除上清液及白膜层，加入200ml左右的0.9%氯化钠溶液后混匀；第2次离心3 000r/min，共8min，去除上清液并加入200ml左右的0.9%氯化钠溶液后混匀；第3次离心3 000r/min，共8min，去除上清液并加入0.9%氯化钠溶液至总容量约为（250±25）ml。混匀留取血样待检测。

1.3.3 蛋白质测定和溶血率检测 按卫生部颁布的《血站技术操作规程（2012版）》中有关方法进行检测[1]。

1.3.4 统计学处理 采用SPSS12.0统计软件，计量资料用表示，样本均数比较采用t检验。

2 结果

4组不同保存期悬浮红细胞制备的洗涤红细胞上清液蛋白质含量和溶血率指标检测结果见表1。A、B组两项指标均符合国家标准，C、D组溶血率符合国家标准，但上清液蛋白质含量符合率分别为60%、40%，呈明显的下降趋势。统计分析显示A组与B组的两项指标差异无统计学意义（P＞0.05）；A组与C组、D组的两项指标比较，差异均有统计学意义（均P＜0.05），B组与C组、D组的两项指标比较，差异均有统计学意义（均P＜0.05）。

3 讨论

悬浮红细胞在2～6℃保存条件下会发生贮存损伤，随保存期的延长，红细胞逐渐由双面凹变为椭圆形，边缘不整齐或锯齿状，并从锯齿I型向Ⅱ型、Ⅲ型转化，最后变成圆形；而保存25～30d的全血，在电镜下可见红细胞有锯齿形、棘形，细胞膜中间出现点状漏孔。这可能与贮存期氧自由基增多、自由基对红细胞膜的损伤以及红细胞保存过程中发生溶血有关[2]。洗涤红细胞是采用特定的方法将保存期内的全血、悬浮红细胞用大量等渗溶液洗涤，去除几乎所有的血浆成分和部分非红细胞成分，并将红细胞悬浮在氯化钠注射液或红细胞添加液中所制成的红细胞成分血，可减少非溶血性发热反应和HLA同种免疫反应的发生。研究显示保存15d以后的全血制备洗涤红细胞，其形态发生异常变化，泡化后的红细胞易溶血，红细胞寿命缩短，影响洗涤红细胞的质量[3]。本实验结果表明，保存期＜14d的悬浮红细胞制备洗涤红细胞，上清液蛋白质含量和溶血率均符合国家标准[4]。随着保存期的延长，该两项指标的合格率逐渐下降，提示贮存时间会影响洗涤红细胞最终的质量，因此在选择悬浮红细胞应注意其保存期。

表1 4组洗涤红细胞检测结果

[1]中华人民共和国卫生部.血站技术操作规程(2012版),78-80.

[2]靳鹏,韩颖.野战运输中震荡性溶血的机理及防护研究进展[J].中国输血杂志,2003,16(5):359.

[3]王爱梅,梁文华,王群,等.不同保存期全血制备洗涤红细胞的超微结构变化[J].临床输血与检验,2004,7(3):176-179.

[4]GB18469-2012.全血及成分血质量要求[M].北京:中国标准出版社, 2012:8.

2012-11-16）

（本文编辑：胥昀）

310006 杭州，浙江省血液中心制备供应部