硫酸沙丁胺醇缓释微丸的制备及其释放度研究

周翔 余楚钦 杨燕 章伟胜

硫酸沙丁胺醇(salbutamol sulfate，SS)是一种选择性β2-受体激动剂，用于治疗支气管哮喘、喘息性支气管炎、肺气肿患者的支气管痉挛，是经典治疗哮喘病的一线用药［1，2，3］。哮喘病常在夜间或清晨发作、加剧，普通制剂服药不便，依从性较差。本研究将该硫酸沙丁胺醇制成的缓释制剂，可有效抑制哮喘病的发生，提高患者用药的依从性。本实验是在已有研究工作(正交实验)的基础上，以释放度为评价指标，对硫酸沙丁胺醇缓释微丸处方组成的关键因素进一步研究，优选出更适于中试生产的处方工艺，为硫酸沙丁胺醇缓释微丸工业化生产提供依据。

1 材料与仪器

1.1 材料 SS(常州亚邦制药有限公司)；硫酸沙丁胺醇对照品(中国药品生物制品检定所)；SS对照品(中国药品生物制品鉴定所)；空白丸芯(杭州高成生物营养技术有限公司)；乙基纤维素(EC，上海 Colorcon公司)；Eudragit L100、Eudragit S100(德国Rohm公司)；共聚维酮(Plasdone S-630，美国国际特品公司)；奎二酸二丁酯(DBC，美国 Sigma公司)；微粉硅胶(SiO2，德国德固赛公司)；甲醇为色谱纯，其他试剂均为分析纯。

1.2 仪器 STREA-流化床(瑞士NIRO-AEROMATIC)；ZRS-8G智能溶出试验仪(天津大学无线电精密仪器厂)；Ultimate高效液相色谱仪(美国戴安公司)；恒温恒湿培养箱(金坛市孵化仪器有限公司)；PB-10 Sartorius pH计(广州来普达克化玻仪器有限公司)；BS224S型十万分之一电子天平(北京赛多利斯仪器系统有限公司)。

2 方法与结果

2.1 处方(1000粒胶囊)

2.1.1 含药微丸处方 空白丸芯78 g，SS 10 g，SiO22 g，3%Plasdone S-630乙醇溶液103 g。

2.1.2 缓释包衣液处方 EC 6.3 g，Eudragit L100 0.2 g，Eudragit S100 0.2 g，DBC 1.1 g，Plasdone S-630 q．s，SiO20.1 g，H2O 24.98 g，95% 乙醇溶液 75 g。

2.2 制备工艺

2.2.1 共聚维酮乙醇溶液的配制 将适量的共聚维酮加入搅拌状态下的70%乙醇溶液中，不断搅拌至共聚维酮完全溶解，溶液呈均一澄清状态，制成含共聚维酮3%的乙醇溶液，备用。

2.2.2 含药溶液的配制 在搅拌状态下将SS加入共聚维酮乙醇溶液中，使完全溶解，再加入SiO2，继续搅拌制成均匀的混合溶液，备用。

2.2.3 缓释包衣液的配制 用少量水将EC润湿后，在搅拌状态下加入95%乙醇溶液中，待EC溶解后，依次加入Eudragit L100、Eudragit S100、Plasdone S-630、剩余的水、DBC，继续搅拌至溶液呈半透明均一状态，再加入SiO2，搅拌均匀，备用。

2.2 .4 缓释微丸的制备 将空白丸芯加入流化床物料槽中，43℃预热10 min；喷入备用的含药溶液，上药结束后，物料于43℃继续流化15 min；喷入备用的缓释包衣液进行包衣，喷完缓释包衣液后，物料于43℃继续流化15 min，出料。40℃烘箱中固化12 h，检测，填充于2号胶囊。流化床技术参数为：流速2.0～3.0 g/min、雾化压力1.5～1.8bar、回风压力4.5bar、进风温度40～45℃、进风压力3～4bar。

2.3 含量测定方法学考察

2.3.1 色谱条件 色谱柱：Diamonsil C18柱，4.6 mm ×250 mm，5μm；流动相：0.005 mol/L 磷酸二氢铵溶液(pH3.0)-甲醇(85∶15)；流速：1.0 ml/min；检测波长：224nm；柱温：室温。

2.3.2 对照品溶液配制 精密称取SS对照品约20 mg，置于100 ml量瓶中，加0.1 mol/L盐酸溶液适量，超声，放冷，稀释并定容，摇匀。精密量取2 ml置于25 ml量瓶中，用0.1 mol/L盐酸溶液稀释至刻度，摇匀。

2.3.3 空白辅料溶液配制 取空白缓释微丸，研细，称取适量，置于100 ml量瓶中，其余同“对照品溶液配制”项下操作。

2.3.4 供试品溶液配制 取SS缓释胶囊10粒的内容物，研细，精密称取适量(约相当于沙丁胺醇1.6 mg)置于100 ml量瓶中，加0.1 mol/L盐酸溶液适量，超声，放冷，稀释并定容，摇匀。

2.3.5 系统适应性试验 分别取空白溶液、对照品溶液、供试品溶液各20 μl，按“2.3.1”项下色谱条件，进样，测定。见色谱图1，结果表明，辅料在检测波长处吸收峰的保留时间与主峰保留时间不一致，说明辅料不干SS的测定。

图1 高效液相色谱

2.3.6 标准曲线的制备 分别精密称取SS对照品适量，配制成浓度为 2 μg/ml、4 μg/ml、8 μg/ml、16 μg/ml、24 μg/ml、32 μg/ml、40 μg/ml的溶液，用 0.45 μm 的滤膜滤过，进样 20 μl，按“2.3.1”项下色谱条件测定，记录色谱图。以SS浓度对其峰面积进行线性回归，得回归方程为Y=0.5379x-0.0359，r2=1，结果表明药物在 2～40 μg/ml的范围内线性关系良好。

2.3.7 重复性试验 取供试品溶液，按“4.2”项下色谱条件，连续进样6针，记录其峰面积并计算RSD值，结果RSD=0.18%。

2.3.8 回收率试验 精密称取SS对照品8、10、12 mg各3份，及处方比例量辅料，按“2.3.2”项下方法配制，分别制成高、中、低浓度的溶液各3份，取20 μl进样，记录色谱，计算峰面积。结果，平均回收率为99.36%(RSD=0.29%)。

2.4 释放度测定方法 取SS缓释胶囊6粒，按《中国药典》2010版释放度测定第2法［4］，以磷酸盐缓冲液500 ml为释放介质，转速为每分钟100转，温度37℃，依法操作。分别于1 h、4 h和8 h时取样5 ml，滤过，并即时补充释放介质5 ml。精密量取续滤液20μl注入液相色谱仪，按“2.3.1”项下色谱条件测定，记录色谱图。另取SS对照品适量，精密称定，加释放介质溶解并稀释，制成每1 ml中约含16μg的溶液，同法测定，并将结果与0.8299相乘，计算每粒胶囊在不同时间点的累积释放百分率。

2.5 共聚维酮用量对释放度的影响 按“2.1.2”处方组成(除共聚维酮外)，考察致孔剂共聚维酮在缓释层中的用量分别占该固体总用量的0.18%，0.22%，0.25%时，对药物释放度的影响。结果见图2。

图2 共聚维酮不同用量药物的释放曲线

由图可见，当缓释层增重为8.55%，共聚维酮用量分别为0.18%、0.22%、0.25%时，药物释放度均符合要求。共聚维酮用量为0.22%时，释放度最优。

2.6 缓释层用量对药物释放的影响 按“2.1.2”处方组成，共聚维酮占缓释层中的固体总用量为0.22%时，考察缓释层包衣增重分别为6.39%、7.54%、8.55%、9.46%时，对药物释放度的影响。结果见图3。

图3 缓释层不同用量药物的释放曲线

由图可见，缓释层用量对药物的释放有一定影响，包衣增重为6.39%、7.54%、8.55%、9.46%时，药物释放度均符合要求。缓释层包衣增重为8.55%时，最为合适。

2.7 工艺重现性试验 按照最优的处方组成(EC 6.3 g、Eudragit L100 0.2 g、Eudragit S100 0.2 g、DBC 1.1 g、Plasdone S-630 0.015 g、SiO20.1 g、H2O 24.98 g、95%乙醇溶液75 g)和流化床包衣工艺参数制备3批SS缓释微丸，测定含量和体外释放度，验证处方工艺的可靠性，结果均符合要求，见表1。

表1 3批缓释微丸的累积释放度(%)

由表1可见，该处方工艺所制制剂具有延缓药物释放，其质量稳定可靠。

2.8 加速稳定性试验 SS缓释胶囊用塑料瓶包装，置于相对湿度为75% ±5%，温度为40℃ ±2℃条件下，分别于1个月、2个月、3个月时考察其外观、色泽，含量和释放度的变化。结果微丸的外观、色泽不变，其他见表2。

表2 加速稳定性试验释放度测定结果(%)

由表2可见，硫酸沙丁胺醇缓释胶囊质量稳定可靠。

2.9 SS缓释微丸释药行为的拟合 根据“2.8”项药物体外释放度的测定结果，分别用零级、一级、Higuchi方程作曲线拟合，判断其释药机理，结果见表3。

表3 释药模型的拟合

由表3可见，药物的释放行为最符合一级方程。

3 讨论

文献［5］报道硫酸沙丁胺醇缓释微丸的研制，工艺方法复杂，不易实现工业化生产。本研究工艺方法简单、可控，药物缓释结果符合药典要求，可实现工业化生产。

原处方使用滑石粉作为抗粘着剂制备含药微丸，实验中其使用量为液体量的0.5～3%时，抗粘效果差，微丸间粘连且流化状态异常，严重影响生产效率。通过试验摸索，发现少量微粉硅胶对本实验含药微丸制备能起到非常好的抗粘效果，进风温度在40～55℃均可保证实验的顺利进行。通过加入最佳用量的致孔剂共聚维酮，不仅能调节药物的释放速率，且能降低制剂释药行为对包衣增重的影响。缓释层包衣增重考察，对生产控制具有实际指导意义。

硫酸沙丁胺醇缓释微丸释药模型拟合结果表明，一级方程能较好的描述其体外释药特征。随时间变化由多至少非恒速释放。由于释药前期微丸中的药物浓度大，释放速度相对较快；随着药物的逐渐释放，浓度逐渐减小，药物释放速度也就减慢，因此，药物的整个释放过程表现为一级释药过程。

［1］ 王翠欣，滑千里，刘福利．硫酸沙丁胺醇口腔崩解片的制备及质量评价．中国当代医药，2010，17(8)：113-115.

［2］ 米莹，房志仲，王晶晶，等．硫酸沙丁胺醇口服结肠定位缓释片的含量测定．天津医科大学学报，2008，14(4)：460-465.

［3］ 崔平，于晓光，张向荣，等．硫酸沙丁胺醇延迟释放片的制备与评价．中国医院药学杂志，2010，30(2)：139.

［4］ 国家药典委员会．中华人民共和国药典(二部)．2010年版．北京：化学工业出版社，2010：981.

［5］ 杨翎，毕瑞林，邹积宏．硫酸沙丁胺醇缓释微丸的制备．黑龙江医药，2000，13(6)：339-340.