早产儿缺氧缺血性脑病与血清Tau蛋白及NSE的相关性研究

索有梅，辛 颖

(1.甘肃省武威市人民医院儿科；2.甘肃省武威职业学院，武威 733000)

早产儿因生产时出现窒息而导致脑的缺氧缺血性损害称为缺氧缺血性脑病(hypoxic-ischemic encephalopathy，HIE)，其死亡率是正常新生儿的10倍，并且可发生智力低下、脑瘫等神经系统后遗症[1]。脑脊液中的Tau蛋白由于脑损伤会明显升高，神经元支架蛋白Tau蛋白被降解后释入血液中，检测血清中Tau蛋白含量，可称为诊断脑损伤的特异性指标[2]；神经元特异性烯醇化酶(neuron-specific enolase，NSE)是中枢神经特异性蛋白质,是反映神经细胞损害最敏感的指标之一, 可作为神经元损伤的标志物[3]。这两者结合可对新生儿缺氧缺血性脑损伤起到诊断性意义，但是国内尚未见到血清Tau蛋白和NSE与早产儿缺氧缺血性脑病的相关报道。本研究通过对血清Tau蛋白和NSE与早产儿缺氧缺血性脑病相关性分析，旨在为围生期早产儿窒息与脑损伤的诊断提供参考依据。

1 资料与方法

1.1 一般资料 2010年至2013年我院儿科住院部的患缺氧缺血性脑病的早产儿42例，其中28例为HIE早产儿为观察组，胎龄(33.6±1.2)周,出生体质量(1 643.8±125.3)g, 轻度7例,中度15例,恢复期6例；14例为正常早产儿作为对照组，胎龄(34.6±1.6)周,出生体质量(1 865.8±143.3)g。两组在胎龄、体质量、性别方面比较差异无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。

1.2 纳入标准 中华医学会儿科学分会新生儿学组于2004年11 月修订的标准[4],包括:①有明确的可导致胎儿宫内窘迫的异常产科病史,以及严重的胎儿宫内窘迫表现(胎心< 100次,持续5 min 以上和(或)羊水Ⅲ度污染),或在分娩过程中有明显窒息史; ②出生时有重度窒息,指Apgar 评分1 min <3分, 并延续至5 min时仍<5分，或出生时脐动脉血气pH < 7；③出生后不久出现神经系统症状, 并持续24 h 以上; ④排除电解质紊乱、颅内出血和产伤等原因引起的抽搐,以及宫内感染、遗传代谢性疾病和其他先天性疾病所引起的脑损伤。

1.3 排除标准 ①宫内感染、先天畸形；②产妇有子宫畸形、妊高征、心脏病；③有吸烟史、吸毒史、被动吸烟史。

1.4 操作方法 两组早产儿生后1～3 d，使用无菌方法在桡动脉处抽取4 ml动脉血，取2 ml采用双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)测定血清NSE。空腹采集静脉血, 标本不抗凝、无溶血, 经离心取血清测定。取2 ml血置于肝素抗凝管中抗凝，以3 000 r/min离心10 min，提取血清，装于1 ml EP管中，放于超低温冰箱中保存，测血清Tau蛋白含量，同样采用双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)测定血清，用酶标记法进行封闭、清洗，加入显色剂避光保存15 min测其浓度。

2 结 果

2.1 两组NSE检测结果比较 观察组NSE水平明显高于对照组，差异有统计学意义(27.01±2.01 U/mlvs10.28±2.54 U/ml,P<0.05)，说明患有HIE的早产儿血清中NSE水平高于正常组早产儿。

2.2 两组血清Tau蛋白水平比较 患HIE早产儿血清Tau蛋白水平明显高于对照组，结果具有统计学意义(6.84±4.47 ng/mlvs3.08±2.24 ng/ml,P<0.05)，提示血清Tau蛋白水平增高，早产儿患HIE的可能性较大。轻度组、中度组HIE早产儿血清Tau蛋白水平与对照组比较，差异有统计学意义(4.68±2.16 ng/mlvs3.08±2.24 ng/ml，5.46±1.89 ng/mlvs3.08±2.24 ng/ml,P均<0.05)；恢复期HIE早产儿Tau蛋白水平与轻度组、中度组HIE早产儿比较，差异有统计学意义(3.76±2.12 ng/mlvs4.68±2.16 ng/ml，3.76±2.12 ng/mlvs5.46±1.89 ng/ml，P均<0.05)，说明HIE病情的转归通过Tau蛋白水平变化具有一致性。

3 讨 论

由于早产儿身体器官发育尚未成熟，缺氧缺血性脑病在早产儿中更易发生，严重威胁早产儿的存活率及生存质量。因早产儿HIE早期临床特征存在不明显性，常常被医务工作者忽略，因此早期对早产儿HIE作出诊断，并给予早期干预治疗，具有重要的临床意义。

血清中Tau蛋白作为脑损伤神经系统的重要指标，对其诊断的准确性提供了一种依据，Tau蛋白在中枢神经系统正常的状态下，能与微管蛋白结合形成微管，起到维持细胞形态，促进轴突运输的功能[5]。实验表明早产鼠与新生鼠大脑中只含有低分子量的Tau蛋白，Tau蛋白表达量多[6]。早产儿缺氧缺血性脑病是新生儿神经功能障碍的主要病因，缺氧容易导致细胞膜的损伤，使膜的通透性升高，脑组织的缺氧缺血使Tau蛋白异常磷酸化，降低了微管结合的能力，同时阻碍了与微管相结合的有关蛋白，微管集聚使细胞骨架稳定性降低，加速细胞凋亡[7]，神经元被破坏后Tau蛋白被释放，通过对其含量的检测，可以了解神经元被破坏的情况。本研究发现血清Tau蛋白水平增高，早产儿患HIE的可能性较大，血清Tau蛋白变化与脑损伤程度成正相关，HIE病情的转归通过Tau蛋白水平变化具有一致性。因此Tau蛋白含量可以协助诊断早产儿缺血缺氧性脑病轻重等级，成为诊断HIE的敏感型指标之一。

NSE是中枢神经系统受损的标记物[8], 特异性地存在于神经元和神经内分泌细胞的胞浆内。当新生儿窒息缺氧导致大脑神经元损伤和坏死时, NSE可释放进入血液和脑脊液中, 使血清和脑脊液中含量增加, 其含量可反应神经元死亡的程度, 对早期直接而准确了解脑损伤程度具有重要的临床意义[9]。从本文结果可以看出NSE含量与早产儿脑损伤的程度呈正相关性。

综上所述，Tau蛋白含量在早产儿缺血缺氧性脑病可以成为判定脑损伤及神经损害程度的指标之一，NSE是判断早产儿窒息后脑损伤程度及预后较灵敏而可靠的生化指标，两者结合能比较有效的反应脑损伤及预后的情况，对早产儿缺氧缺血性脑病的诊断及预后具有重要的临床意义。

参考文献

[1]Shalak L, Perlman J M. Hypoxic-ischemic brain injury in the term infant-current concepts[J].EarlyHumDev,2004, 80 (20):125-141.

[2]杨 红,肖志辉,唐凤英.早产儿缺血缺氧性脑病中血小板活化因子水平的研究[C].浙江省围产医学学术年会论文汇编,2006,9:74-75.

[3]杨嘉琛,朱绪亮,李海珍.窒息新生儿脑干听觉诱发电位与血清神经元特异性烯醇化酶的相关性分析[J].中国当代儿科杂志，2008,10(6)；607-699.

[4]中华医学会儿科学分会新生儿学组.新生儿缺血缺氧性脑病诊断依据和临床分度[J].中国实用儿科杂志，2000,15(6):20-22.

[5]Rutherford M,Counsell S,Allsop J,etal.Diffusion-weighted magnetic resonance imaging in term perinatal brain injury：a comparison with site of lesion and time from birth[J].Pediatrics, 2004,114(4):1004-1014.

[6]王保生,李继峰,王 舟.脑低灌注大鼠认知功能障碍及P-Tau蛋白表达研究[J].医学信息，2011,24(17):5662-5664.

[7]刘 蓉,王小川,黄 尧.急性缺氧和急性低糖对脑片Tau蛋白磷酸化影响[J].生物物理与生物化学进展，2004,31(5):402-404.

[8]BerqerR P, Pierce M C, Wisniewski S R,etal.Neuron-specific enolase and S100B in cerebrospinal fluid after sever traumatic brain injury in infants and children[J].Pediatrics,2002,109(2):E31.

[9]Lamers K J, Vos P, Verbeek M M,etal. Protein S-100B,neuron-specific enolase(NSE), myelin basic protein(MBP) and glial fibrillary acidic protein (GFAP) in cerebrospinal fluid(CSF) and blood of neuro logical patients[J].BrainResBull, 2002,61(3):261-264.