三七总皂苷对心肌缺血大鼠血清IL-6和AngⅡ的影响

姬艳苏冯利民

（1.武警后勤学院附属医院，天津 300162；2.天津中医药大学第二附属医院，天津 300150）

三七总皂苷对心肌缺血大鼠血清IL-6和AngⅡ的影响

姬艳苏1冯利民2

（1.武警后勤学院附属医院，天津 300162；2.天津中医药大学第二附属医院，天津 300150）

目的：研究三七总皂苷（Panax Notoginsenosides，PNS）对心肌缺血大鼠血清白细胞介素6（Interleukin6，IL-6）和血管紧张素Ⅱ（AngiotensinⅡ，AngⅡ）含量的影响。方法：采用结扎大鼠冠状动脉左前降支造成心肌缺血模型，将心肌缺血大鼠随机分成模型组和PNS组，并设假手术组作为空白对照。PNS组给予PNS 120mg/kg，分别给药3、7、14、28d后，检测各组大鼠血清IL-6和AngⅡ含量。结果：在心肌缺血后3、7、14、28d，造模大鼠IL-6和AngⅡ含量均有不同程度的升高，在缺血早期IL-6迅速升高而在后期稍有下降，AngⅡ的含量随时间延长逐渐升高。PNS组给药3d后IL-6较模型组即显著下降，且持续到给药28d；而给药28d时AngⅡ才显著低于模型组。结论：在急性心肌缺血期以炎症反应为主而在心肌缺血后期则以心肌纤维化为主。PNS可能在心肌缺血的每个阶段均起到保护心肌的作用，即在心肌缺血早期起到抗炎作用，而在心肌缺血后期尤其是连续给药14d后起到抗心肌纤维化作用。

心肌缺血 三七总皂苷 白细胞介素6 血管紧张素Ⅱ 实验研究

心肌缺血，是指心脏的血液灌注减少，心肌能量代谢不正常，不能支持心脏正常工作的一种病理状态。本研究以结扎大鼠冠状动脉左前降支造成心肌供血不足，复制心肌缺血模型，以IL-6和AngⅡ作为评价指标，观察三七总皂苷（PNS）对大鼠心肌缺血的影响。

1 实验材料

1.1 实验动物雄性W istar大鼠400只，体重250～300g，由北京维通利华实验动物中心提供，动物许可证编号：SCXK（京）2002-0003，分笼饲养，每笼5只，食水自由摄取。

1.2主要实验仪器MP-150多导生理记录仪（BIOPAC systems Inc.，美国）；DU-530紫外分光光度计（DNA/ ProteinAnalyzer，BECKMAN，美国）；GC-911-γ-放射免疫计数器（中国科技大学实业总公司）；Allegra-64R Centrifuge低温高速离心机（BECKMAN，美国）。

1.3 实验药物及试剂三七总皂苷（PNS），由浙江大学药学院提供，批号：060427。IL-6检测试剂盒，武汉优尔生科技股份有限公司。

2 实验方法

2.1 心肌缺血模型制作方法大鼠用水合氯醛（300mg/kg）腹腔注射麻醉，将心电图电极针埋于右上肢和左下肢皮下，记录Ⅱ导联心电图，参照文献[1]的方法复制大鼠心肌缺血模型。于肺动脉圆锥与左心耳间，离左冠状动脉前降支起始部3～4mm处绕前降支穿线，将心脏送回胸腔内，止血钳夹闭胸壁肌肉。稳定5min后，结扎冠脉，观察心电图变化并记录。心电图显示ST段明显抬高的大鼠视为造模成功。假手术组的手术过程与上述相同，只穿线不结扎冠状动脉。

2.2 分组与给药大鼠随机分为模型组和PNS给药3、7、14和28d组，以假手术组作为正常对照，每组12只。PNS以0.5%羧甲基纤维素钠（CMC）水溶液配制，按照前期实验的结果制定PNS组给药剂量为120mg/kg[2]，分别给药3、7、14和28d。模型组和假手术组灌服等体积0.5%CMC水溶液，每日给药1次。

2.3 指标检测末次给药后，腹腔注射麻醉，腹主动脉取血，离心制备血清。按IL-6检测试剂盒检测血清IL-6含量，采用放免法测定血清AngⅡ的含量。

3 实验结果

3.1 PNS对心肌缺血大鼠血清IL-6的影响与假手术组比较，心肌缺血3、7、14和28d后，模型组大鼠血清的IL-6含量显著升高（P＜0.05）。PNS给药3、7、14和28d后，与相应时间点的模型组相比，大鼠血清IL-6含量均降低，其中3、7和28d组的差异有统计学意义（P＜0.05，P＜0.01）。见表1。

表1 各组大鼠不同时间点血清IL-6含量比较（±s）pg/kg

表1 各组大鼠不同时间点血清IL-6含量比较（±s）pg/kg

注：与同时期假手术组比较，#P＜0.05；与同时期模型组比较，*P<0.05，**P＜0.01。

组别动物数（只）给药时间28d 14d假手术组12 120±22 119±34模型组12 161±40#162±36#PNS组12 147±30 116±51*3d 7d 159±38 149±30 213±68#204±56#127±45**156±52*

3.2 PNS对心肌缺血大鼠血清AngⅡ的影响结扎冠脉造成心肌缺血3、7、14和28d后，与假手术组相比，模型组大鼠血清AngⅡ含量显著升高（P＜0.05）。PNS给药3、7、14和28d后，与相应时间点的模型组相比，大鼠血清AngⅡ的含量均降低，给药28d后明显下降（P＜0.01）。见表2。

表2 各组大鼠不同时间点血清AngⅡ含量比较（±s）pg/mL

表2 各组大鼠不同时间点血清AngⅡ含量比较（±s）pg/mL

注：与同时期假手术组比较，#P＜0.05；与同时期模型组比较，**P＜0.01。

假模P

4 讨论

PNS是从药用植物三七中分离出的皂苷成分，主要含三七皂苷、黄酮、多糖、蛋白、甾醇、无机物、挥发油和油脂等。研究显示PNS能显著改善左室收缩和舒张功能，降低血清酶的含量及心律失常发生率，并通过抗氧化和改善心肌细胞ATP的能量代谢而发挥对缺血心肌的保护作用[3-4]。

心肌缺血会造成炎症反应，在冠心病心肌缺血炎症反应初期，受TNF-α诱发，大量的IL-6被激活而发挥其介导炎症和调节免疫的作用。如果心肌缺血较长时间不能缓解，则会造成缺血部位的纤维化和心室重构。AngⅡ作为肾素-血管紧张素-醛固酮系统的介质之一，参与了心脏纤维化和/或结构重构的过程，具有多种调节机体功能的作用。因此本研究以IL-6和AngⅡ作为评价指标，探讨PNS对不同时间点的心肌缺血的治疗作用。

结果表明，在心肌缺血后3、7、14、28d，IL-6和AngⅡ含量均有不同程度的升高。在缺血早期，IL-6迅速升高而在后期稍有下降，AngⅡ的含量随时间延长逐渐升高。提示在急性心肌缺血期以炎症反应为主，而在心肌缺血后期则以心肌纤维化为主。PNS在给药3d后即可显著降低IL-6，且持续到给药28d；而直到连续给药28d后才起到降低AngⅡ的作用。因此我们推测，PNS可能在心肌缺血的每个阶段均起到保护心肌的作用，即在心肌缺血早期起到抗炎作用，而在心肌缺血后期尤其是连续给药14d后起到抗心肌纤维化作用。本研究为PNS治疗心肌缺血，制定给药方案提供了实验依据，但关于PNS对心肌缺血不同发展阶段的更深层次的防治机制仍需进一步研究。

[1]Xiaoying Wang，Yi Wang，Min Jiang，et al.Differential Cardioprotective Effects of Salvianolic Acid and Tanshinone on Acute Myocardial Infarction Are Mediated by Unique Signaling Pathways.Journal of Ethnopharmacology，2011，135（3）：662

[2]刘杰，高秀梅，王怡，等.三七总皂苷对心肌缺血大鼠血流动力学影响实验研究.天津中医药，2005，4（22）：158

[3]王本祥.现代中药药理与临床.天津：天津科技翻译出版公司，2004：79

[4]李娟莉，苏式兵.三七总皂苷对大鼠急性心肌梗死的保护作用.中药药理与临床，2013，29（1）：68

R541.405

A

1672-397X（2014）04-0072-02

姬艳苏（1981-），女，硕士研究生，药师，中药药理学专业。shasan_2001@163.com

2013-11-30

编辑：吴宁

国家自然科学基金青年基金项目（81102534）