新疆不同产地骆驼刺中总黄酮的含量比较

石磊岭， 魏鸿雁， 徐晓琴， 夏提古丽·阿不利孜， 贾晓光， 张小龙

(1新疆中药民族药研究所， 乌鲁木齐 830002； 2新疆农业大学科学技术学院， 乌鲁木齐 830000)

骆驼刺(Alhagisparsifoliashap.)为豆科骆驼刺属(Alhagi)植物，生长地区集中，主要分布于北非、地中海、西亚地区。在我国主要分布于新疆、内蒙古、甘肃、青海等省区[1-2]。

黄酮类化合物是药用植物中的主要活性成分之一，其结构类型的多样性决定了其生物活性的多样化。研究表明，黄酮类化合物具有抗氧化、抗病毒、抗过敏、抗菌、抗突变、抗肿瘤、保肝、免疫调节、抗炎、镇痛、泻下、保护心脑血管系统以及杀虫等多种生物活性，且毒副作用较低[3-5]。生长在不同地域的骆驼刺由于受自身遗传因素、温度、土壤等环境因素的影响，使药材中有效成分的差异很大。为了能了解新疆不同产地骆驼刺中总黄酮的含量，充分发挥该物种的药用价值，本实验采用紫外可见分光光度法测定新疆不同产地骆驼刺地上部位总黄酮的含量，为新药研究和充分利用骆驼刺药材资源提供一定的参考依据。

1 仪器与材料

1.1试验仪器BECKMAN DU-7 紫外可见分光光度计(美国贝克曼库尔特有限公司)，EYELA OSB-2100旋转蒸发仪(上海爱朗仪器有限公司)，Mettler Toledo AB265-S分析天平(瑞士梅特勒-托利多公司)，9FZ-25多用粉碎机(四川简阳市大地机械厂)。

1.2材料骆驼刺经新疆中药民族药研究所王国平副研究员鉴定为豆科骆驼刺属(Alhagi)植物骆驼刺(Alhagisparsifoliashap)。将骆驼刺阴干粉碎，在真空干燥器中以60℃干燥至恒重，备用。芦丁标准品 (批号100080-200707中国药品生物制品检定所) ;无水乙醇、 石油醚、氢氧化钠、亚硝酸钠和硝酸铝均为分析纯。

2 方法与结果

2.1总黄酮的测定

2.1.1 标准液的配制 精密称取 120℃干燥恒重的芦丁标准品 7.23 mg，置 50 mL容量瓶中，用 60%乙醇溶解并定容得到浓度为 0.133 8 mg/mL的芦丁标准溶液。

2.1.2 标准曲线的绘制 精密量取标准溶液0、0.5、1.0、2.0、3.0、 4.0、5.0、6.0、7.0、8.0 mL置于25 mL容量瓶中，分别加60%乙醇溶液至10 mL，依次加入1 mL 5%亚硝酸钠溶液，摇匀，放置6 min后，加入1 mL 10%硝酸铝溶液，摇匀，放置6 min后，再加入4%氢氧化钠溶液4 mL，再加 60%乙醇定容，摇匀，放置15 min后在510 nm处测定吸光度值。以吸光度值为纵坐标，芦丁浓度 (mg/mL )为横坐标，制作标准曲线。得到回归方程Y=12.374X-0.036，结果芦丁在0.27～42.81 mg/L范围内呈良好的线形关系，r2=0.999 7。

2.2方法学考察

2.2.1 精密度试验 取同一对照品溶液，按“2.1.2”项下方法处理并显色后，重复测定吸光度6次，结果RSD为1.18%，表明精密度良好。

2.2.2 重复性试验 取同一样品溶液，按“2.1.2”项下方法处理并显色后，重复测定吸光度6次，结果RSD为1.24%，表明重现性良好。

2.2.3 稳定性试验 取样品溶液，照样品测定方法操作，每隔10 min测定吸光度值，连续60 min，结果吸光度值基本无变化，表明样品在60 min内稳定性良好。

2.2.4 加样回收率试验 称取已知总黄酮含量的骆驼刺样品粉末5份，每份1 g，精密称定，分别加入“2.1.1”项下芦丁对照品溶液2、3、4、5、6 mL(每毫升含芦丁0.133 8 mg)，按“2.1.2”项下进行测定，计算回收率，结果平均回收率为100.2%，RSD为1.92%，见表1。

表1 加样回收率测定(n=5)

2.3样品含量测定准确称取8个采集地阴干粉碎的骆驼刺茎叶各10 g，用100 mL石油醚连续回流提取，脱脂除杂，药渣用100 mL甲醇连续回流提取，回收溶剂，再用60%乙醇定容至250 mL容量瓶中，依照“2.1.2” 项下方法测定吸光度，代入回归方程中计算总黄酮的含量，并计算总黄酮的得率,结果鄯善县、莎车县及乌鲁木齐县的骆驼刺中总黄酮含量较高，分别为18.2、16.8、16.6 mg/mL，奇台县最低，为7.3 mg/mL,见表2。

总黄酮含量/%=CVD/W×100%

[式中：C 为总黄酮显色稀释后的浓度(mg/mL)，V 为稀释后的体积，D为样品的稀释倍数，W 为样品的质量。]

3 讨论

通过紫外-可见分光光度计测定药材中总黄酮含量常见报道[6-10]，该方法具有简单可靠、重现性好、方法成熟等特点，故本实验采用该方法测定总黄酮的含量。

表2 不同产地骆驼刺样品中总黄酮的含量测定结果

根据收集到的8批不同产地的骆驼刺总黄酮含量测定结果得知，鄯善县、莎车县、乌鲁木齐县3个产地骆驼刺总黄酮的含量较高，骆驼刺中总黄酮的含量分别为18.2、16.8 、16.6 mg/g，奇台县骆驼刺中总黄酮含量最低，为7.3 mg/g，可见不同产地的骆驼刺药材中总黄酮含量相差比较大，因此在用药时应注意产地与药材质量的关系。

参考文献：

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