血小板活化标志物CD62P、CD63在糖尿病患者早期肾脏微血管病变中的表达

李云婷，张雷雷，张巧丽

（1.河北医科大学第二医院检验科，河北 石家庄050000；2.河北省食品质量监督检验研究院食品部，河北 石家庄050000）

糖尿病肾病是2型糖尿病最常见的并发症，是糖尿病主要微血管病变之一。据统计30%～40%糖尿病患者可能发生糖尿病肾病，进而发展成为终末期肾脏疾病［1］；因其发生机制复杂，早期缺乏明显的症状和体征，容易错过最佳的治疗时间而最终导致肾衰竭，因此临床早期全面诊断显得尤为重要。近年有研究发现糖尿病肾病患者血小板活化显著高于不伴肾病者，且2型糖尿病早期患者开始出现血小板活化，抗血小板活化药物对2型糖尿病有一定的疗效［2］，均提示血小板的活化与糖尿病肾病的形成有关。本研究观察2型糖尿病并发早期肾病患者血小板膜糖蛋白CD62P、CD63的表达情况，旨在探讨其在糖尿病肾病早期微血管病变发展过程中的临床价值。报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 根据1999年WHO的糖尿病诊断标准［3］选择河北医科大学第二医院2013年5月—2014年5月收治的2型糖尿病患者98例，男性47例，女性51例，年龄30～70岁。其中单纯糖尿病组48例，男性23例，女性25例，年龄30～65岁，平均（57.56±7.22）岁；早期糖尿病肾病组50例，男性24例，女性26例，年龄40～70岁，平均（59.36±5.73）岁。早期糖尿病肾病入选标准：患者出现微量白蛋白尿（Uaer 20～200μg／min，临床诊断为早期糖尿病肾病），且排除其他肾脏疾病及糖尿病急性并发症，近期无糖尿病酮症酸中毒等。正常对照组为同期来院查体的无糖尿病史的健康体检者49例，男性27例，女性22例，年龄30～75岁，平均（57.2±5.45）岁。3组性别、年龄差异均无统计学意义（P＞0.05），具有可比性。

所有受检者在近半个月内未服用抗血小板药物和抗凝药物。

1.2 研究方法 所有受检者空腹抽取静脉血6mL。其中3mL静脉血，枸橼酸钠抗凝，轻轻颠转混匀5次以上，各取5μL全血分别加入CD62PFITC／CD63-FITC单抗10μL，室温下避光反应20min后，立刻加入含1%多聚甲醛1mL固定血小板，应用美国BD公司FACSCantoⅡ型流式细胞仪测定。CD62P、CD63，主要试剂由Bioscience公司提供；另外3mL静脉血用于β2微球蛋白（β2 microglobulin，β2-MG）的测定，β2-MG 采用胶乳增强免疫比浊法，试剂由北京科美生物技术有限公司提供。

1.3 统计学方法 应用SPSS13.0统计软件进行数据分析，计量资料以±s表示，多组间比较采用单因素方差分析，两两比较采用q检验。P＜0.05为差异有统计学意义

2 结 果

早期糖尿病组CD62P、CD63阳性表达率高于正常对照组和单纯糖尿病组；单纯糖尿病组CD62P、CD63阳性表达率高于正常对照组，差异有统计学意义（P＜0.01）；早期糖尿病肾病组和单纯糖尿病组β2-MG高于正常对照组，差异有统计学意义（P＜0.01）。见表1。

表1 3组CD62P、CD63、β2-MG比较Table 1 CD62P，CD63andβ2-MG levels in three groups（±s）

表1 3组CD62P、CD63、β2-MG比较Table 1 CD62P，CD63andβ2-MG levels in three groups（±s）

＊P＜0.01与正常对照组比较 ＃P＜0.01与单纯糖尿病组比较（q检验）

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3 讨 论

糖尿病肾病主要指糖尿病性肾小球硬化症，一种以微血管损害为主的肾小球病变。在正常人的循环血液中，血小板基本处于非活化状态，非活化的血小板在受到各种理化因素（如高血糖）的刺激下，可被激活成活化血小板，血小板活化可表现为膜内、膜表面及血浆中有一些特定的血小板糖蛋白成分发生改变，这些糖蛋白即为血小板活化标志物。目前，已发现与糖尿病有关的血小板活化标志物包括CD62P、CD63（又称α颗粒膜蛋白GMP140）等。

CD63为血小板溶酶体颗粒膜蛋白，活化时经脱粒反应而表达于血小板膜表面，介导中性粒细胞对活化内皮的黏附。CD62P属于选择素家族黏附分子，表达于血小板α颗粒膜表面。当血小板活化时α颗粒迅速与血小板膜融合而在血小板膜表面表达成为血小板活化的特异标志［4-6］。CD62P、CD63在正常情况下不表达或低水平表达，当长期处于高血糖等状态时，2型糖尿病肾病患者体内存在代谢紊乱，体内升高的血清同型半胱氨酸通过氧化应激损伤血管内皮细胞，可致微血管基底膜增厚，增加血小板黏附，易于形成血栓，增加糖尿病血管病变患病率［7-8］。同时也存在炎症、水肿、硬化、出血、血栓等病理变化。

β2-MG主要由淋巴细胞分泌，是一种低分子量的蛋白质，可自由经肾小球滤入原尿，几乎全部在近端小管被重吸收并分解破坏［9］，可反映肾小球的滤过功能，是早期诊断肾小球病变的敏感指标［10］。但特异性差，其他炎症、中毒等均可升高。有研究显示DN患者CD62P、CD63阳性率较血清β2-MG阳性率明显增高，可更敏感地反映肾小管早期损害［11-12］。

本研究结果表示，单纯糖尿病组的CD62P、CD63的阳性表达率高于正常对照组，早期糖尿病肾病组CD62P、CD63的阳性表达率高于单纯糖尿病组。李颖等［6］研究发现糖尿病肾病患者CD62P、CD63的表达水平高于正常对照组；血小板活化与糖尿病肾病的形成有关，其原因可能是在糖尿病肾病中，由于血小板功能亢进而诱发高凝状态，血小板功能改变先于微血管病变的发生且活化程度随着微血管病变的发展而加强。糖尿病肾病患者血小板活化显著高于不伴肾病者。抗血小板活化药物对糖尿病肾病有一定的疗效［2］。均提示血小板的活化与糖尿病肾病的形成有关［11-12］。

综上所述，血小板的活化在糖尿病肾病发生发展中发挥着重要作用，因此在糖尿病诊疗中，除积极控制血糖外，还应考虑使用抗血小板活化药物，抑制血小板活化，以阻止细胞浸润、炎症、肾小球病变，改善微循环障碍，阻止糖尿病的肾脏损害。我们认为，CD62P、CD63不仅可早期预测糖尿病患者肾脏微血管病变的发生发展，而且CD62P、CD63可能成为糖尿病早期肾病微血管病变的一个新的检测及治疗靶点。

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