ER、PR、Ki-67、CA125在子宫内膜癌中的表达及临床意义

西安市第四医院(西安710004)

蔡凤梅 王卉芳 刘 辉 郅玲然 王亚楼

ER、PR、Ki-67、CA125在子宫内膜癌中的表达及临床意义

西安市第四医院(西安710004)

蔡凤梅 王卉芳 刘 辉 郅玲然 王亚楼

目的：探讨ER、PR、Ki-67、CA125在子宫内膜癌中的表达及临床意义。方法：应用免疫组化SP法对58例子宫内膜癌组织中4种基因蛋白的表达情况进行研究。结果：ER、PR、Ki-67、CA125在子宫内膜癌组织中阳性表达率分别是79.3%、72.4%、62.1%和51.7%；ER的表达强度与手术病理分期和组织分级有关；PR和CA125的表达强度与手术病理分期、组织分级及肌层浸润深度有关；Ki-67的表达强度与组织分级和淋巴结转移有关。结论：在子宫内膜癌的发生发展中，ER、PR、Ki-67和CA125起着非常重要的作用,可作为判断子宫内膜癌恶性程度及评估预后的分子标记物。

子宫内膜癌是一种发生在子宫内膜的上皮性恶性肿瘤,是仅次于宫颈癌的女性生殖系统第二大恶性肿瘤。近年有研究发现，一些特定的分子标记物与子宫内膜癌的产生及预后关系密切。为此，本研究拟通过检测子宫内膜癌中雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)、Ki-67和CA125 这些分子标记物基因蛋白的表达情况，探讨其与子宫内膜癌的临床病理特征及与预后的关系。

材料与方法

1 材 料 选取我院2008年5月至2013年7月手术切除且资料完整的子宫内膜癌标本58例，术前均经诊断性刮宫确诊，所有患者均未行放疗、化疗和激素治疗，手术方式为广泛或次广泛性全子宫切除术+盆腔淋巴结切除术。患者年龄在23～75岁,平均年龄58.34岁；平均初潮年龄14.2岁；有生育史46例,无生育史者12例。手术病理分期采用2009年国际妇产科联盟(FIGO)标准：Ⅰ期26例,Ⅱ期16例,Ⅲ期10例,Ⅳ期6例；组织分级：Ⅰ级(高分化)28例,Ⅱ级(中分化)18例,Ⅲ级(低分化)12例；按照肌层浸润深度分为：无浸润22例，侵及肌层浅部28例,侵及肌层深部者8例。淋巴结转移者10例,无淋巴结转移者48例。另外选取24例正常增殖期子宫内膜作对照,年龄27～52岁。

2 方 法 手术切除收集的标本采用10%甲醛固定,石蜡包埋处理,切片厚度为4μm,常规二甲苯脱蜡,梯度酒精脱水,3% H2O2封闭内源性过氧化物酶,微波处理修复抗原,10%正常山羊血清封闭组织中非特异性抗原，加入兔抗人ER、PR、Ki-67和CA125抗体(Santa Cruz 公司),置湿盒中4 ℃冰箱过夜，PBS液替代一抗作为阴性对照，次日滴加生物素标记的羊抗兔IgG(二抗),加SP复合物、DAB显色,苏木素复染,中性树脂封片。

3 结果判定 ER、PR和Ki-67阳性染色为棕黄色颗粒,均定位于细胞核。CA125阳性染色定位在细胞质以及膜上，主要为胞膜和(或)胞质出现棕黄色颗粒。实验结果判断采用半定量积分法：①根据每张切片中细胞的染色强度给予评分：无染色定为0 分，浅黄色定为1 分，棕黄色定为2 分，棕褐色定为3分；②按照组织切片中的阳性染色细胞的数量占全部肿瘤细胞的数量的百分比来记分：≤5%： 0分，≤25%：1 分，≤50%：2 分，≤75%：3 分，>75%：4 分；③前两项指标的评分相乘，阴性(-)为0分，弱阳性(+)为1～4分，中度阳性()为5～8分，强阳性()为9～12 。(+)～()定为阳性表达，()～()为过阳性表达。

结 果

1 4种基因蛋白在增殖期子宫内膜组织和子宫内膜癌中的表达 见表1。增殖期子宫内膜组织和子宫内膜癌中ER的阳性表达分别为87.5%及79.3%，PR的阳性表达分别为91.7%及72.4%，Ki-67的阳性表达分别为25.0%及62.1%，CA125的阳性表达分别为8.3%及51.7%，差异均具有统计学意义(P<0.05)。

表1 4种基因蛋白在增殖期子宫内膜组织和子宫内膜癌中的表达 [例(%)]

2 4种基因蛋白表达与子宫内膜癌临床病理特征的关系 见表2。①ER阳性表达率与手术病理分期和组织分级有统计学意义(P<0.05),与肌层浸润深度和淋巴结转移无统计学意义(P>0.05)。②PR阳性表达率与手术病理分期、组织分级及肌层浸润深度有统计学意义(P<0.05)，与淋巴结转移无统计学意义(P>0.05)。③Ki-67阳性表达率与组织分级和淋巴结转移有统计学意义(P<0.05)，与手术病理分期和肌层浸润深度无统计学意义(P>0.05)。④CA125阳性表达率与手术病理分期、组织分级及肌层浸润深度有统计学意义(P<0.05)，与淋巴结转移无统计学意义(P>0.05)。

讨 论

在子宫内膜癌的发生发展中，ER和PR起着非常重要的作用。研究认为，子宫内膜癌的发病机制与激素的紊乱，尤其是雌激素的增多密切相关。一方面，雌激素可以促进子宫内膜细胞的有丝分裂，从而导致DNA 发生突变，进而导致内膜增殖，而后者是子宫内膜癌的基本病变。另一方面，孕激素可以促进子宫内膜细胞的分化，抑制细胞的有丝分裂，引起蛋白合成减少，从而促使增生期的子宫内膜转为分泌期，从而发挥拮抗内膜发生癌变的作用。当 ER和PR 各自与相应的激素结合，相应受体激活，以活化的形式与DNA特定部位结合，启动转录，进一步合成新的蛋白质。这些新合成的具有特定生物学功能的蛋白质继而参与调节细胞生长及代谢过程。近年来大多数文献报道[1-3]，在子宫内膜样腺癌的病理分期为早期和组织分化较好的患者中，其ER和PR 阳性率高于特殊的组织分类；在病理分期晚期和组织分化较差的患者中，高阳性ER和PR患者预后相对较好。但也有个别研究认为，ER和PR与肿瘤组织的类型、分级、病理分期并无关联，并且和肿瘤的复发无关[4]。ER 和 PR本身相比较，PR是影响子宫内膜癌预后的独立因素，PR对内膜癌预后的判断作用优于 ER。但在 PR 阴性的情况下，ER 对也在一定意义上与预后关联，可以用于判断指标[5]。本研究结果显示，ER和PR在子宫内膜癌中的阳性率分别是79.3%和72.4，比正常增殖期子宫内膜的87.5%和91.7%低，ER无统计学差异，而PR有统计学差异，ER阳性表达率与手术的病理分期及组织分级二者均有统计学差异， 但肌层浸润深度及淋巴结转移与ER阳性表达率并无统计学意义。PR阳性表达率与手术病理分期、组织分级及肌层浸润深度均有统计学意义，而与淋巴结转移无统计学意义。这些结果说明 ER和PR 与手术病理分期及组织分级联系紧密，手术病理分期、组织分级越高，ER、PR表达越低，与文献报道结果一致，说明肿瘤分化越差，激素受体的阳性率越低。提示ER、PR水平的高低对评估子宫内膜癌的预后及指导临床治疗具有重要的作用。

表2 4种基因蛋白表达与子宫内膜癌临床病理特征的关系[n(%)]

注：*P<0.05

Ki-67 抗原是一种重要的反映肿瘤增殖活性的蛋白，除G0期和G1早期外，在其他细胞周期均有表达，在有丝分裂周期S 期的后半段上升，在G2和M 期达到高峰。Ki-67 过量表达与多种恶性肿瘤的生物学行为和预后密切相关，如大肠癌[6]、口腔癌[7]、透明细胞肾细胞癌[8]等。虽然Ki-67 和子宫内膜癌的病理特征的相关性研究报道较多，但结论尚不统一，多数报道指出，Ki-67 和子宫内膜癌的组织类型、分级、分期、浸润深度有关，并与预后有密切关系[9]。但另外也有部分研究报道认为子宫内膜癌的组织分级、分期、浸润深度、转移及复发与Ki-67的表达无明显关系[4,10]。本研究结果显示，Ki-67在子宫内膜癌中的阳性率是62.1%，Ki-67阳性表达率与组织分级和淋巴结转移均有统计学意义，但与手术病理分期及肌层浸润深度无统计学意义。提示Ki-67与疾病进程有一定的关系，Ki-67表达越高，细胞增殖越活跃，其侵袭性强，更易发生转移，且患者的预后差。CA125是一组含有半乳糖、N-乙酰氨基葡萄糖和N-乙酰氨基半乳糖链的高分子糖蛋白，分布广泛，在正常组织、良性病变和恶性肿瘤中均有表达。CA125主要存在于胚胎发育中的体腔上皮细胞中，其成体表达于体腔上皮分化而来的各种组织中，如胸腹膜、子宫以及蜕膜组织等。较多文献对子宫内膜癌患者血清CA125进行了大量研究[2]，但对子宫内膜癌组织中CA125的表达及其意义研究较少。本研究对子宫内膜癌进行了CA125免疫组化检测，结果显示，CA125在子宫内膜癌中的阳性率是51.7%，比正常增殖期子宫内膜的8.3%高，具有统计学差异。CA125阳性表达率与手术病理分期、组织分级及肌层浸润深度有统计学意义，与淋巴结转移无统计学意义。CA125在高度、中度分化的子宫内膜癌中表达显著增强，而在低分化的子宫内膜癌中表达减少，可能与分化较差的肿瘤组织，大多数呈实体片状样排列，具有分泌功能的内膜腺体、癌细胞形成的腺管及腺腔结构大部分消失，而CA125的表达能力在被肿瘤侵蚀的细胞分化过程中逐渐丧失表达有关。因此，CA125是反映子宫内膜癌发生发展过程及生物学行为的重要肿瘤标志物，对预测预后也有一定的参考价值。

ER、PR、Ki-67和CA125这4种蛋白的联合检测，对评估子宫内膜癌的发生发展、生物学行为、分化程度及判断预后提供了科学依据，对指导子宫内膜癌的诊断及早期治疗具有重要的参考价值。相信随着子宫内膜癌相关研究的不断深入，有关其诊断和治疗的方法和标准将更加科学合理。

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(收稿：2014-07-16)

Expressions and significance of ER, PR, Ki-67 and CA125 in endometrial carcinoma

Xi’an NO.4 Hospital(Xi’an 710004)

Cai Fengmei Wang Huifang Liu Hui et al

Objective：To study the expression and significance of ER, PR, Ki-67 and CA125 in endometrial carcinoma. Methods：ER, PR, Ki-67 and CA125 were detected by immunohistochemical SP method respectively in 58 cases of endometrial carcinoma.Results：The positive expression rates of ER, PR, Ki-67 and CA125 were 79.3%,72.4%,62.1% and 51.7%in endometrial carcinoma respectively. The expression of ER was related to operation stage and histologic classification. The expression of PR and CA125 were related to operation stage, histologic classification and depth of myometrial invasion. The expression of Ki-67 was related to histologic classification and lymph node metastases. Conclusion：The abnormal expression of ER, PR, Ki-67 and CA125 are maybe take important part in endometrial carcinoma, which will be useful biomarkers to estimate the grade of endometrial carcinoma and prognosis early detection and judging prognosis.

Endometrial neoplasms Estrogen receptor Progesterone receptor Immunohistochemistry Ki-67 Antigen @CA125

子宫内膜肿瘤 雌激素受体 孕激素受体 免疫组织化学 Ki-67抗原 @CA125

R711.32

A

10.3969/j.issn.1000-7377.2015.02.010