白介素-4和免疫球蛋白E含量监测在药物过敏反应诊断中的应用价值

李志勇，吴杨玲，蔡韶滨

(1.厦门大学附属第一医院 检验科，福建 厦门 361000；2.厦门大学附属第一医院 急诊部，福建 厦门 361000；3.漳州卫生职业学院 护理系，福建 漳州 363000)



白介素-4和免疫球蛋白E含量监测在药物过敏反应诊断中的应用价值

李志勇1Δ，吴杨玲2，蔡韶滨3

(1.厦门大学附属第一医院 检验科，福建 厦门 361000；2.厦门大学附属第一医院 急诊部，福建 厦门 361000；3.漳州卫生职业学院 护理系，福建 漳州 363000)

目的 探究白介素-4和免疫球蛋白E含量监测在药物过敏反应诊断中的应用价值。方法 采用静脉注射及常规腹腔注射的方式，将0.9%NaCl、马血清等相应的药剂进行致敏，并在不同的时间记录豚鼠血清中的白介素-4和总免疫球蛋白E指标。结果 注射0.9%NaCl与喘可治注射液，白介素-4和总免疫球蛋白E差异无统计学意义，但在其他药物致敏d8、d14和d21时，白介素-4和总免疫球蛋白E含量显著升高，均出现过敏反应。结论 白介素-4和免疫球蛋白E含量指标检测是诊断药物过敏的一种有效、快速的方式。

白介素-4；免疫球蛋白E；药物过敏反应

药物过敏反应是用药中最常见的不良反应之一[1]，指有特异体质的患者使用某种药物后产生的不良反应，又称变态反应，常表现为皮肤潮红、发痒、心悸、皮疹、呼吸困难，严重者可出现休克或死亡[2]。药物过敏反应的发生与药物剂量大小无关,而与人的过敏体质相关[3],即某些人因遗传因素或特异体质，会对一种或几种药物产生过敏反应，当其应用可能导致过敏的药物时，便可能在短时间或1周内出现药物过敏反应，轻者会出现药物热、药疹，严重者可能引起过敏性休克，不及时抢救会有生命危险。对于药物过敏诊断的方式进行研究，缩短诊断的实践，提高诊断的准确性等在临床具有重要的价值。本研究以经过常规过敏反应检查法证实能引起过敏的中药注射剂及生化制剂为例，通过建立连续静脉注射致敏方法，探讨检测血清中白介素-4(interleukin-4，IL-4)和免疫球蛋白E(immunoglobulin E，IgE)抗体检测在药物过敏中的意义。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 药剂：清开灵注射液[生产厂家：神威药业(四川)有限公司；国药准字Z13020935]、0.9%NaCl(生产厂家：昆明市宇斯药业有限公司， 08070204)、喘可治注射液(生产厂家：广州万正药业有限公司；国药准字Z20010172)、香丹注射液(生产厂家：广东雷允上药业有限公司；国药准字Z44022080)、脑蛋白水解物注射液[生产厂家：上海华源药业(宁夏)沙赛制药有限公司；国药准字H20003643]、马血清(生产厂家：广州蕊特生物科技有限公司；批号：0903189)、 白介素-4和总免疫球蛋白E测定试剂盒(深圳晶美生物科技有限公司)。

1.1.2 动物：豚鼠，购自上海申旺实验动物养殖场，合格证号：SCXK(沪)2002-0011。Hartery品系，雄雌各占一半，体质量(290.54±40.41)g，在湿度为50%，温度为24 ℃下进行饲养。本次试验操作，均遵循《实验动物保护条例》。

1.2.3 仪器：美国宝特Bio-Tek E1x808酶标仪，8+1检测通道光学设计，检测范围0.0-4.0OD，波长380～900 nm。

1.2 方法

1.2.1 马血清引起IL-4和总IgE水平升高及过致敏反应的时效性:选取豚鼠40只，按照攻击天数的不同分成4组：d7、d8、d9、d10攻击组，每组10只，雌雄各占一半，各组豚鼠均静脉注射0.5 mL浓度为10 %的马血清进行致敏，在第0，1，2天进行注射，共3次。注射后将豚鼠全部取出，取1 mL的足背静脉血,3000 r/min离心15 min，分离血清，并进行白介素-4和总免疫球蛋白E的测定。

另外随机选取10只豚鼠，不做处理收取静脉血，对其白介素-4和总免疫球蛋白E水平进行检测。此10只豚鼠为对照组。

本次研究的血清存放在零下30 ℃的冰柜中，检测白介素-4和总免疫球蛋白E水平，所有检测在一月内完成，操作要按照试剂盒说明书严格执行。

1.2.2 静脉注射药物致敏反应的时效性:准备好0.9%NaCl，喘可治、脑蛋白水解物、清开灵、香丹注射液，取豚鼠50只，随机分为5组，每组10只，按照给豚鼠所注册的药品的名称对小组进行命名：0.9%NaCl组，喘可治组、脑蛋白水解物组、清开灵组、香丹组。试品原液分别在当天、第2天和第3天进行静脉注射，用量为0.5 mL，共注射3次。8天后，抽取1 mL足背静脉血，对白介素-4和总免疫球蛋白E进行测定。

1.2.3 药物腹腔注射过敏反应的时效性:取60只豚鼠，随机分为6组，每组10只，在1.2.2的分组的基础上，增加了马血清组。马血清浓度为10%，分别在d0、d2、d4，对各组豚鼠腹腔注射0.5 mL相应的供试液，进行致敏。在d14、d21时，各组均取出5只豚鼠，抽取足背静脉血1 mL，测定白介素-4和总免疫球蛋白E水平。

2 结果

2.1 马血清引起IL-4和总IgE水平升高及过致敏反应的时效性: 对照组豚鼠的白介素-4指标为(91.6±10.9)ng/L，总免疫球蛋白E水平为(42.8±6.5)IU/mL。使用马血清致敏以后，白介素-4和总免疫球蛋白E水平在d7出现升高现象，到了d8时，上升明显加快。与对照组的数据相比，采用马血清致敏组豚鼠的白介素-4和总免疫球蛋白E水平显著升高(P<0.05)。见表1。

表1 马血清引起IL-4和IgE含量时效性比较Tab.1 Comparison of chronergy of IL-4 and IgE of house serum(±s)

#P<0.05，与对照组比较，compared with control group

2.2 静脉注射药物致敏反应的时效性: 豚鼠进行药剂致敏第8天以后，0.9%NaCl组豚鼠的血清白介素-4和总免疫球蛋白E水平无异常变化，水平正常、喘可治注射液组的水平正常。香丹注射液组、清开灵注射液组、脑蛋白水解物注射液组豚鼠的血清白介素-4和总免疫球蛋白E水平显著升高(P<0.05)。见表2。

表2 致敏药物静脉注射白介素-4和IgE水平比较Tab.2 Comparison of IL-4 and IgE of sensitization drug injection by vein(±s)

#P<0.05，与0.9%NaCl组比较，compared with saline group

2.3 药物腹腔注射过敏反应的时效性:豚鼠在隔日进行腹腔注射致敏以后，分别在d14、d21时进行2次攻击。攻击时所使用的药液相同。0.9%NaCl组与喘可治注射组血清白介素-4和总免疫球蛋白E指标无异常变化，处于正常水平。而其他各组在攻击以后均出现了血清白介素-4和总免疫球蛋白E水平显著升高。见表3。

表3 致敏药物腹腔注射白介素-4及总免疫球蛋白E水平比较Tab.3 Comparison of IL-4 and IgE of sensitization drug injection by

#P<0.05，与0.9%NaCl组比较，compared with saline group

3 讨论

药物引起的过敏反应以速发型过敏反应最为常见、危害也最大，现有判断药物引起过敏反应的方法主要有直接检测过敏物质、被动皮肤过敏反应实验、豚鼠回肠条实验、豚鼠主动过敏反应检查法[4-7]等，上述动物实验方法存在检验周期偏长、过敏反应观察指标不够客观等缺陷，不利于迅速得出结论。血浆类胰蛋白酶为类过敏反应和Ⅰ型超敏反应共同的生物标志物，为区别2类反应过敏反应的专属性生物标志物。其检测方法主要有2种，分别为皮肤试验和体外特异性IgE含量测定。Ⅰ型超敏反应需IgE介导，当抗原特异性IgE水平升高时，表明机体极有可能发生Ⅰ型超敏反应。当血浆类胰蛋白酶水平升高却未见特异性IgE产生，机体则可能发生类过敏反应[8-9]。因此诊断类过敏反应应对机体的血浆组胺、类胰蛋白酶和IgE进行综合评价。

本次试验以豚鼠为对象，对过敏原进入机体以后所引起的白介素-4和总免疫球蛋白E水平升高情况进行了研究。结果可以看出，注射马血清后，血清白介素-4和总免疫球蛋白E水平于d7时开始升高(P<0.05),d8开始急剧升高(P<0.05)，与对照组相比，血清白介素-4和总免疫球蛋白E水平指标差异显著(P<0.05)。提示连续3 d静脉致敏后，从d8开始出现明显的过敏反应。静脉致敏过敏反应检查需以d8为准。表2、表3的数据显示，在d8,d14,d21时，喘可治注射液组与0.9%NaCl组的结果相似，无过敏反应。其他3组均出现了过敏反应，血清白介素-4和总免疫球蛋白E水平均升高(P<0.05)。说明在静脉致敏后，过敏反应出现的时间与攻击前指标升高的时间平行。表3的结果与表1和表2的结果一致。本研究结果显示，血清IL-4和总IgE水平比常规检查药物过敏的速度更快，规避了常规方法存在的缺陷，符合药物过敏反应检查的需求，本次的研究结果与其他相关研究的结果一致。

本次研究的结果表明，在药物致敏8天、14天以及21天时，白介素-4和总免疫球蛋白E含量显著升高。说明白介素-4和免疫球蛋白E含量指标检测是诊断药物过敏的一种较为快速的方式。

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(编校：谭玲)

Value of interleukin 4 and immunoglobulin E levels monitoring in diagnosis of drug allergy reaction

LI Zhi-yong1Δ, WU Yang-ling2, CAI Shao-bin3

(1.Department of Clinical Laboratory, The First Affiliated Hospital of Xiamen University, Xiamen 361000, China; 2. Department of Emergency, The First Affiliated Hospital of Xiamen University, Xiamen 361000, China; 3. Department of Nursing, Zhangzhou Health Career Academy, Zhangzhou 363000, China)

ObjectiveTo explore interleukin 4 and immunoglobulin E levels indicators monitoring value in diagnosis of drug allergy reaction.MethodsThe way of intravenous injection and conventional intraperitoneal injection was used, with the corresponding drugs such as saline, horse serum sensitized, and in different time interleukin -4 and total immunoglobulin E index were recorded in guinea pig serum.ResultsInjection of saline and Chuankezhi injection, interleukin-4 and total immunoglobulin E protein content, the difference was not statistically significant, but in other drug induced sensitive D8, D14 and D21, interleukin-4 and total immunoglobulin E protein content increased significantly.ConclusionInterleukin 4 and immunoglobulin E levels index detection is the diagnosis of drug allergy is an effective and fast way.

interleukin 4; immunoglobulin E; drug allergy reaction

李志勇，通信作者，男，本科，副主任技师， 研究方向：免疫学及生物化学，E-mail：Xmlzy_213@163.com。

R917

A

1005-1678(2015)11-0030-03