盐酸伊立替康联合顺铂方案对宫颈癌患者宫颈上皮组织Bcl-2及MACC1蛋白表达的影响

李萱，张莉，刘颖群

(1.江西医学高等专科学校 病理教研室，江西 上饶 334000；2.上饶市人民医院 病理科，江西 上饶 334000；3.江西医学高等专科学校 妇产科，江西 上饶 334000)



盐酸伊立替康联合顺铂方案对宫颈癌患者宫颈上皮组织Bcl-2及MACC1蛋白表达的影响

李萱1,2Δ，张莉3，刘颖群2

(1.江西医学高等专科学校 病理教研室，江西 上饶 334000；2.上饶市人民医院 病理科，江西 上饶 334000；3.江西医学高等专科学校 妇产科，江西 上饶 334000)

目的 探讨盐酸伊立替康联合顺铂方案对宫颈癌患者宫颈上皮组织B淋巴细胞瘤-2基因(B-cell lymphoma-2，Bcl-2)及结肠癌转移相关基因1(metastasis-associated in colon cancer-1，MACC1)蛋白表达的影响。方法 选取2010年1月～2013年1月在上饶市人民医院妇产科接受治疗的100例宫颈癌患者为研究对象，所有患者均采用盐酸伊立替康联合顺铂方案化疗，对比患者化疗前后的临床效果及宫颈上皮组织中的Bcl-2和MACC1蛋白的表达。结果 宫颈癌患者以盐酸伊立替康联合顺铂方案进行化疗后，临床总有效率占75.0%(75/100)。化疗后Bcl-2、MACC1的表达以及高表达率较化疗前均显著降低(均P<0.05)。临床有效组中Bcl-2、MACC1在化疗后的高表达情况较化疗前显著降低(均P<0.05)；临床无效组中Bcl-2、MACC1在化疗后的高表达情况较化疗前差异无统计学意义。结论 采取宫颈癌患者以盐酸伊立替康联合顺铂方案进行化疗后，宫颈癌患者宫颈上皮组织中Bcl-2 与MACC1的表达显著降低，临床效果明显。

伊立替康；顺铂；宫颈癌；Bcl-2；MACC1

宫颈癌是目前临床上一种较为常见的妇科恶性肿瘤，据调查显示，宫颈癌发病率和死亡率均随着年龄的增加而增加，且其发病呈现明显的年轻化趋势，女性应重点预防的恶性肿瘤[1]。目前已有研究表明，恶性肿瘤的发生与原癌基因的激活、抑癌基因的失活、环境因素、遗传因素等多种因素有关[2]。目前，在临床上对宫颈癌患者实施治疗的过程中， 常用的治疗方法主要还是以手术治疗为主，化疗为辅[3]。因此本文探讨盐酸伊立替康联合顺铂方案对宫颈癌患者宫颈上皮组织B淋巴细胞瘤-2基因(B-cell lymphoma-2，Bcl-2)及结肠癌转移相关基因1(metastasis-associated in colon cancer-1，MACC1)表达的影响，现将结果报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2010年1月～2013年1月在上饶市人民医院妇产科接受治疗的100例宫颈癌患者为研究对象，其中年龄在25～70岁，平均年龄(45.8±8.3)岁。本研究经过伦理委员会批准。纳入标准：①经患者及其家属同意该治疗方案并签署知情同意书；②所有患者在化疗前行宫颈组织活检术，活体组织病理玻片检查证实为宫颈癌；③所有患者临床资料完整，来本院治疗前均未采取放疗、化疗或者生物治疗等任何治疗；④治疗前无严重合并症，常规检查提示肝肾功能良好，血液检查血象结果(骨髓贮备)、凝血功能良好；⑤无明显化疗禁忌症。排除标准：肝肾功能严重不全者；有宫颈癌治疗史者；有化疗禁忌症者。

根据活检术结果，其中病理分类为宫颈鳞癌患者80例，宫颈腺癌的患者 20例；根据最新国际妇产科联合会(The International Federation of Gynecology and Obstetrics，FIGO)，其中临床分期为IB2期31例，IIB1期22例，IIB2期26例，IIA2期21例。

1.2 方法

1.2.1 具体化疗方法如下：盐酸伊立替康(江苏恒瑞医药股份有限公司，国药准字H20020687)60 mg/m2，在治疗后的第1天、第8天以及第15天的同一时间注射1 h；顺铂(江苏康缘药业有限公司，注册标准JX20090030)为60 mg/m2，根据静脉注射的方式于治疗的第1天使用，注射时间为4 h。治疗15 d

1.2.2 观察指标：①临床有效率：根据RECIST国际标准[4-5]评定2组患者的临床有效率，评定标准为：完全缓解(complete response，CR)，自基线评估后所有目标病灶消失；部分缓解(partial response，PR)，和基线期相比，目标病灶最长径之和总至少减少30%；疾病进展(progressive disease，PD)，与治疗开始以来所记录的最小长径之和相比，目标病灶最长径之和至少增加20%，出现一个或多个新病灶；疾病稳定(stable disease，SD)，与治疗开始以来所记录的最小长径之和相比，既不符合PD又不符合PR评判标准。有效=CR+PR，无效=SD+PD；

② 免疫组化检测宫颈上皮组织中Bcl-2和MACC1蛋白表达：所有患者在接受治疗前后行宫颈组织活检术取宫颈上皮组织切片，并采用免疫组化SP(streptavidin-perosidase)法，即链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连结法检测宫颈上皮组织中Bcl-2和MACC1蛋白的表达(试剂盒购自上海雅吉生物科技有限公司，并严格按照说明书操作)。MACC1和Bcl-2免疫组化染色以细胞质核膜内呈现黄色颗粒为阳性表达。结果采用半定量标准：即阴性(-)，无阳性细胞；弱阳性(+)，阳性细胞<25%；中度阳性(++)，阳性细胞25%～50%之间；强阳性(+++)，阳性细胞≥50%。其中，阳性细胞数≥50%的称为高表达。

1.3 统计学方法 所有数据均采用SPSS19.0软件分析，计数资料采用[n(%)]表示，2组间比较进行χ2检验，等级资料比较采用秩和检验。以P<0.05表示差异有统计学意义。

2 结果

2.1 宫颈上皮组织中Bcl-2和MACC1蛋白的表达 宫颈上皮组织中Bcl-2和MACC1蛋白的表达情况见图1。

A：Bcl-2表达 B:MACCI表达图1 宫颈癌患者宫颈上皮组织中Bcl-2和MACC1蛋白的表达(×300)Fig.1 Expression of Bcl-2 and MACC1 protein levels in cervical epithelial tissue of patients with uterine cervix cancer(×300)

2.1 化疗后不同病理分类及临床分期的疗效情况 行盐酸伊立替康联合顺铂方案化疗后，总有效率为75.0%(75/100)，总无效率为25.0%(25/100)。化疗后不同病理分类及临床分期的疗效情况，见表1。

表1 100例患者化疗后病理分类及临床分期的疗效[n(%)]Tab.1 Efficacy of 100 cases of pathological classification and clinical stages post-chemotherapy[n(%)]

2.2 Bcl-2、MACC1在行盐酸伊立替康联合顺铂方案化疗前后的表达情况对比 在行盐酸伊立替康联合顺铂方案化疗后Bcl-2、MACC1蛋白表达较化疗前显著降低(P<0.05)。见表2。

表2 Bcl-2、MACC1蛋白在化疗前后表达水平对比(n)Tab.2 Comparison of expression levels of Bcl-2 and MACC1 protein pre-and post-treatment(n)

2.3 Bcl-2、MACC1在行盐酸伊立替康联合顺铂方案化疗前后的高表达情况对比 Bcl-2和MACC1在行盐酸伊立替康联合顺铂方案化疗后的高表达率较化疗前显著降低(均P<0.05)。见表3。

表3 Bcl-2、MACC1蛋白在化疗前后的高表达水平对比[n(%)]Tab.3 Comparison of high expression levels of Bcl-2 and MACC1 protein pre-and post-treatment[n(%)]

*P<0.05，与治疗前比较，compared with pre-treatment

2.4 不同临床疗效组的宫颈上皮组织中Bcl-2、MACC1在行盐酸伊立替康联合顺铂方案化疗前后表达情况 经治疗后，100例宫颈癌患者有75例判定为临床有效，25例为临床无效。临床有效组中Bcl-2、MACC1在化疗后的高表达情况较化疗前显著降低(均P<0.05)；临床无效组中Bcl-2、MACC1在化疗后的高表达情况较化疗前差异无统计学意义。见表4。

表4 不同临床疗效组患者Bcl-2、MACC1蛋白在化疗前后表达水平比较[n(%)]Tab.4 Comparison of expression levels of Bcl-2 and MACC1 protein pre-and post-treatment between different efficacy groups

*P<0.05，与治疗前比较，compared with pre-treatment

3 讨论

宫颈癌是目前临床上一种常见的妇科疾病，宫颈癌的发病是个漫长且复杂的过程，与细胞凋亡以及抑癌基因的调控和癌基因的表达均相关[6]，随着长期以来对细胞凋亡的深入研究发现，Bcl-2基因的表达产物是强有力的细胞凋亡抑制蛋白，会导致细胞凋亡机制紊乱而促使宫颈癌的发生、发展[7]。而MACC1是由科研工作者通过对结肠癌的原发灶、转移灶以及正常结肠组织进行全基因组表达谱分析，最终确定的一种新发现的致癌基因[8]。MACC1在多个恶性肿瘤(结肠癌、宫颈癌、乳腺癌等)中高表达，其异常高表达与良性病变转变成恶性组织密切相关[9-10]。经文献报道，在白血病和淋巴瘤患者中首次发现Bcl-2蛋白是一种对细胞凋亡具有抑制作用的基因[11]。后来经许多研究者通过临床机制研究的深入钻研证实，Bcl-2抑制细胞凋亡的机制是通过抑制封闭细胞核的运转以及细胞内钙离子含量的上升和抗氧化作用进而达到抑制细胞凋亡的作用[12]，Lee等[13]研究发现Bcl-2的过度表达则使得受损细胞无法正常凋亡而抑制细胞凋亡。目前临床研究表明，MACC1不仅能通过结合c-Met启动子，进而进行一系列的诱导，而最终导致细胞增长，上皮间质转化，血管生成，细胞运动，侵袭和转移[14]，还可以激活下游靶细胞基因MAPK信号通路，进而激活MACC1启动子，最终导致促进肿瘤细胞的增殖分裂[15]。既然Bcl-2和MACC1与宫颈癌关系密切，因此本文通过对比宫颈癌患者行盐酸伊立替康联合顺铂方案前后宫颈上皮组织Bcl-2及MACC1的表达情况，探讨该化疗方案对宫颈癌的具体影响。

在本次试验中，100例宫颈癌患者经应用盐酸伊立替康联合顺铂方案化疗后，临床治疗有效率占75.0%(75/100)，总无效率占25.0%(25/100)。通过免疫组化对100例宫颈癌患者在行盐酸伊立替康联合顺铂方案化疗前后检测发现，Bcl-2、MACC1在行盐酸伊立替康联合顺铂方案化疗后表达较化疗前显著性降低(均P<0.05)，同时也发现， Bcl-2和MACC1在行盐酸伊立替康联合顺铂方案化疗后的高表达率较化疗前显著性降低(均P<0.05)。本研究还比较了Bcl-2及MACC在不同临床疗效组中盐酸伊立替康联合顺铂方案化疗前后的表达，发现临床有效组中Bcl-2、MACC在化疗后的高表达情况较化疗前显著性降低，差异有统计学意义(均P<0.05)；临床无效组中Bcl-2、MACC1在化疗后的高表达情况较化疗前差异无统计学意义，由此本研究认为Bcl-2与MACC1的表达情况可能与化疗疗效有关，宫颈癌患者宫颈上皮组织局部相对高浓度的化疗药物可能通过抑制 Bcl-2与MACC1的表达从而增加肿瘤细胞的凋亡，减少肿瘤血管的生成，缩小局部肿瘤的体积，增加了手术的机会。因此本研究认为 Bcl-2 与MACC1有可能成为盐酸伊立替康联合顺铂方案化疗的疗效评价指标。

综上所述，宫颈癌患者以盐酸伊立替康联合顺铂方案化疗后，宫颈癌患者宫颈上皮组织中Bcl-2 与MACC1的表达显著性降低，临床效果明显，近期疗效良好。

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(编校：王俨俨)

Effect of irinotecan hydrochloride combined with cisplatin on Bcl-2 and MACC1 protein expressions in cervical epithelial tissue of cervical cancer patients

LI Xuan1,2Δ, ZHAGN Li3, LIU YING-qun2

(1. Department of Pathology, Jiangxi Medical College, Shangrao 334000, China; 2. Department of Pathology, Shangrao City People’s Hospital, Shangrao 334000, China; 3. Department of Obstetrics and Gynecology, Jiangxi Medical College, Shangrao 334000, China)

ObjectiveTo investigate the effect of irinotecan hydrochloride combined with cisplatin on B-cell lymphoma-2 (Bcl-2) and metastasis-associated in colon cancer-1 (MACC1) protein expressions in cervical epithelial tissue of cervical cancer patients.Methods100 patients with cervical cancer from January 2010 to January 2013 in Department of Obstetrics and Gynecology of Shangrao City People’s Hospital were selected as objects. All patients were treated with irinotecan hydrochloride and cisplatin for combination chemotherapy. The clinical effect and the protein expressions of Bcl-2 and MACC1 of cervical epithelial tissue were compared pre-and post-chemotherapy.ResultsThe total efficiency was 75.0%(75/100) after cervical cancer patients were given irinotecan hydrochloride combined with cisplatin chemotherapy program. The expressions and high expression rates of Bcl-2 and MACC1 post-chemotherapy were significantly lower than that pre-chemotherapy(P< 0.05) . In clinically effective group, the high expression rates of Bcl-2 and MACC1 post-chemotherapy significantly reduced than pre-treatment (P<0.05), and in clinical invalid group, the difference of the high expression rates of Bcl-2 and MACC1 had no statistically significant.ConclusionAfter combination chemotherapy with irinotecan hydrochloride and cisplatin on cervical cancer, the expression of Bcl-2 and MACC1 in cervical epithelial tissue significantly reduce, and the clinical efficacy is aignificant.

irinotecan hydrochloride; cisplatin; cervical cancer; Bcl-2; MACC1

2012年国家医学教育发展中心课题项目(2012-28-07-033)

李萱，通信作者，女，硕士，讲师，主治医师，研究方向：病理学教学及科研，E-mail：licuanxuan@163.com。

R737.33

A

1005-1678(2015)11-0086-04