椒七麝巴布贴对大鼠软组织损伤修复及血液黏度的作用

冯浩轩,王万春，吴爱萍,魏 云

(1.中南大学湘雅二医院，湖南 长沙 410008；2.湖南医药工业研究所，湖南 长沙 410014)

椒七麝巴布贴对大鼠软组织损伤修复及血液黏度的作用

冯浩轩1,王万春1，吴爱萍2,魏 云2

(1.中南大学湘雅二医院，湖南 长沙 410008；2.湖南医药工业研究所，湖南 长沙 410014)

目的 探讨椒七麝巴布贴对大鼠软组织损伤的修复及活血化瘀作用。方法 SD大鼠右后肢外侧局部去毛，采用重物冲击大鼠右后肢外侧软组织造成面积约4 cm2有明显皮下出血及肿胀的非开放性软组织损伤模型，损伤处给予实验药物，连续给药7 d，另设正常对照组10只。肉眼观察局部组织损伤程度，并进行病理组织学检查；颈动脉取血，肝素抗凝，SA-6000型血液流变仪测全血黏度高切、中切、低切及血浆黏度。结果肉眼观察到椒七麝巴布贴可明显减轻损伤组织肿大和瘀斑程度；组织形态学观察显示椒七麝巴布贴具有不同程度减轻嗜中性粒细胞等炎性细胞渗出、减轻创伤后炎症、促进组织修复的作用，与对照组比较差异有显著性(P<0.01)；椒七麝巴布贴低、中、高剂量组(0.266、0.532、1.064 mg·kg-1)可不同程度降低全血比黏度及血浆比黏度，与对照组比较差异有显著性(P<0.05，P<0.01)。结论 椒七麝巴布贴能改善软组织损伤大鼠血液流变性及促进软组织损伤修复。

椒七麝巴布贴；大鼠；软组织；损伤；活血化瘀

椒七麝巴布贴由麝香、三七、辣椒、干姜等中药组成，具有温经散寒、活血止痛之功效，临床用于寒凝血瘀性关节炎、肩周炎、腰肌劳损等。根据其功能主治，本研究旨在探讨椒七麝巴布贴对大鼠软组织损伤及活血化瘀的作用，以期为临床应用提供药理学基础。

1 材料与方法

1.1 药物与动物

1.1.1 药物 椒七麝巴布贴(51%)，规格：每片6.5 cm×9 cm，每片5.8 g，相当生药2.96 g，批号：110904-A；椒七麝巴布贴(102%)，规格：每片6.5 cm×9 cm，每片5.8 g，相当生药5.92 g，批号：110904-B；椒七麝巴布贴(204%)，规格：每片6.5 cm×9 cm，每片5.8 g，相当生药11.84 g，批号：110904-C；椒七麝巴布贴赋性剂，规格：每片6.5 cm×9 cm，每片5.8 g，批号：110904，均由湖南九典制药有限公司提供。麝香壮骨膏，规格：每片7 cm×10 cm，每100 cm2不少于1.6 g，批号：111011，岳阳市金寿制药有限公司提供。

1.1.3 仪器 OLYMPUS光学显微镜。TP-1200C电子天平，湘仪天平仪器设备有限公司生产。SA-6000自动血流变测试仪，北京赛科希德科技发展有限公司。

1.2 方法

1.2.1 分组及实验方法 60只SD大鼠，随机取50只大鼠损伤造模，10只对照(未损伤大鼠，也不给药)。50只模型大鼠随机分为5组：①损伤模型组(赋形剂)；②麝香壮骨膏组(0.202 g·kg-1)；③～⑤椒七麝巴布贴低、中、高剂量组(0.266、0.532、1.064 g·kg-1)。大鼠右后肢损伤处给药，每天一次，连续给药7 d后，肉眼观察局部组织损伤程度，并进行病理组织学检查[1-8]。

另取60只SD大鼠，分组及给药方法同上，连续给药7 d后，颈动脉取血，肝素抗凝，待检[1-6，8-11]。

1.2.2 造模方法 SD大鼠固定于木板上，取内径2.5 cm、长100 cm PVC空心管垂直置于大鼠右后肢外侧软组织上，取100 g钝头铁杵从上而下自由落体冲击大鼠右后肢外侧软组织连续3次，造成面积约2 cm×2 cm有明显皮下出血及肿胀的非开放性软组织损伤模型[4-6]，操作时尽可能使每只大鼠损伤部位相近，成功率100%。所使用实验动物均获得湖南医药工业研究所实验动物伦理委员会批准。

1.2.3 观察指标 肉眼观察：肉眼观察局部组织损伤程度，参照以下分级标准计分：“-”无明显肿大和瘀斑；“+”无肿大，隐约可见瘀斑；“++”肿胀厚度在左侧肢体同部位厚度1倍以下，可见瘀斑；“+++”肿胀厚度在左侧肢体同部位厚度1倍以上和/或有明显紫瘀斑。

病理组织学检查：将损伤组织固定于10%中性福尔马林溶液中，24 h后常规石腊包埋切片，HE染色，光镜下观察病理组织学改变，参照以下分级标准计分：“-”无明显病理组织学改变；“+”皮下及肌纤维轻度水肿、瘀血，仅见散在嗜中性粒细胞等炎性细胞浸润；“++”皮下及肌纤维间中度水肿、少许肌纤维变性坏死，有明显嗜中性粒细胞等炎性细胞浸润；“+++”皮下和肌纤维间重度水肿，大量肌纤维变性坏死及炎性细胞浸润或炎性肉芽组织增生。

SA-6000型血液流变仪测定全血黏度高切、中切、低切及血浆黏度。

1.3 统计学方法

2 结 果

2.1 椒七麝巴布贴对大鼠软组织损伤修复效果

椒七麝巴布贴(0.266、0.532、1.064 g·kg-1)可明显减轻损伤组织肿大和瘀斑程度，可减轻嗜中性粒细胞等炎性细胞渗出，减轻创伤后炎症，促进组织修复。与损伤模型组比较差异有显著性(P<0.01)(表1～2，图1)。

表1 椒七麝巴布贴修复大鼠软组织损伤肉眼观察结果

注：与损伤模型组比较*P<0.05，**P<0.01；与麝香壮骨膏组比较#P<0.05。

表2 椒七麝巴布贴修复大鼠软组织损伤显微镜观察结果

注：与损伤模型组比较*P<0.05，**P<0.01，与麝香壮骨膏组比较#P<0.05。

图1 椒七麝巴布贴修复大鼠软组织损伤病理观察结果(HE染色,250×)

2.2 椒七麝巴布贴活血化瘀作用

椒七麝巴布贴低、中、高剂量组具有不同程度降低全血比黏度及血浆比黏度作用，与损伤模型组比较差异有显著性(P<0.05，P<0.01)，提示椒七麝巴布贴具有改善血液流变性的作用(表3)。

表3 椒七麝巴布贴对大鼠血液流变性的影响±s)

注：与损伤模型组比较*P<0.05，**P<0.01。

3 讨 论

现代医学认为，软组织损伤引起炎症的主要因素有损伤因子、化学因子、致热源和微生物，组织受损后，组织细胞失活、肌纤维断裂、局部小血管破裂、红细胞浸润，血浆因子与暴露的基膜、胶原等接触，于是激肽系统、补体系统、凝血系统、纤维系统变化，释放组织胺、5-羟色胺、缓激肽、前列腺素E等炎性介质，引起血管反应。微血管经过短暂收缩后发生扩张和充血，血管壁通透性增高，水分、电解质和血浆蛋白渗入组织间隙，同时中性粒细胞、单核细胞从血管溢出，进入损伤组织间隙，局部表现为肿胀疼痛、功能障碍[12-13]。同时损伤愈合的基础也是炎性细胞如中性粒细胞和修复细胞如成纤维细胞一系列活动的结果。

本研究结果表明，椒七麝巴布贴对急性软组织损伤大鼠具有抑制局部创伤炎症反应、明显减轻嗜中性粒细胞等炎性细胞渗出、减轻创伤后炎症、加快损伤组织修复的作用；能不同程度降低大鼠血液黏度及血浆黏度，具有活血化瘀作用，与损伤模型组相比，差异有显著性。其机理可能是其对炎性早期毛细血管通透性增加及炎症发生过程均有抑制作用，通过降低毛细血管通透性避免炎性细胞大量渗出，同时使血流加速，改善损伤局部供血，加速组织损伤后所释放的组织胺、5-羟色胺、缓激肽、前列腺素等致痛因子的运转和破坏或抑制它们的释放，达到抗炎镇痛作用；另一方面椒七麝巴布贴由麝香、三七、辣椒、干姜等中药组成，具有温经散寒、活血止痛之功效；第三，椒七麝巴布贴中麝香含有的麝香酮能通过降低HUVEC表面ICAM-1、VCAM-1和CD44表达而抑制中性粒细胞与血管内皮细胞黏附，可能是麝香促进创面愈合的机制之一[14]。三七中的皂甙具有活血作用，三七黄酮能降低血管脆性，改善血管通透性，辣椒中的辣椒碱具有消炎止痛作用。所以，椒七麝巴布贴能改善软组织损伤大鼠血液流变性及促进损伤软组织修复。

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[责任编辑：李蓟龙 英文编辑：谢利峰]

Effects of Seven Deer Pepper Babu Paste in Repairing and Promoting Blood Circulation by Removing Blood Stasis on Soft Tissue Injury of Rat

FENG Hao-xuan1,WANG Wan-chun1,WU Ai-ping2,et al

(1.The Second Xiangya Hospital,Central South University,Changsha 410008,Hunan China； 2.Hunan Institute of Pharmaceutical Industry,Changsha 410014,Hunan China)

Objective To study the effect of Seven Deer Pepper Babu paste in repairing and promoting blood circulation by removing blood stasis on the soft tissue injury of rat.Methods SD rats were caused significant subcutaneous bleeding and swelling areas of about 4cm2into non-open soft tissue injury model by heavy impact on outside of the right hind limb soft tissue after unhairing then right hind limb lesions in rats were given the experimental drug for consecutive seven days,while normal control group including 10 rats was set up.Afterwards,visually observe the extent of local tissue damage,histopathological examination,carotid artery blood,heparin,and measure whole blood viscosity,high cut,cut,low cut and plasma viscosity with SA-6000-type blood rheology.Results Seven Deer Pepper Babu paste could significantly reduce the extent of damage to tissue swelling and bruising with naked eye observation.Histological observation showed Seven Deer Pepper Babu paste could ease neutrophils and other inflammatory cell leakage with different degrees,reduce post-traumatic inflammation,promote tissue repairing function.Compared with that of control group,the difference was significant(P<0.01).For Seven Deer Pepper Babu paste low,medium and high dose groups(0.266,0.532,1.064 mg crude drugs/Kg)with varying degrees of reduced whole blood,it had a significant viscosity and plasma viscosity compared with that of control group,the difference was(P<0.05,P<0.01).Hence,Seven Deer Pepper Babu paste had effect in improving blood rheology.Conclusion Seven Deer Pepper Babu paste could improve blood rheology of soft tissue injury in rats and promote the repairing of soft tissue injury.

Seven Deer Pepper Babu Paste;rats soft tissue;injury;promoting blood circulation and removing blood stasis

冯浩轩(1989-)，男，中南大学湘雅二医院研究生，专业方向：骨关节外科。

王万春(1962-)，男，教授、博士，专业方向：骨与关节疾病的基础与临床研究。

R 979.4

A

10.3969/j.issn.1673-1492.2015.04.015

来稿日期：2015-06-02