免疫胶体金快速诊断技术在兽医诊断中的应用分析

康淑英

(内蒙古赤峰市宁城县天义镇政府，024200)

免疫胶体金快速诊断技术[1]最初应用在尿液与血清绒毛膜促性腺激素的检测中，后随着我国科学技术的不断发展，有专家学者提出胶体金可用于标记物的替代酶，参与渗滤实验，在人类免疫缺陷病毒抗体检测试剂盒的生产中得到广泛的应用。免疫胶体金快速诊断技术具备操作方便、快捷等特点，在传染病病原抗体、妊娠试验中得到广泛的应用，但在兽医诊断中的应用处于初级阶段。

1 免疫胶体金快速诊断技术的原理

固相载体通过微孔滤膜包被已知抗体或者是抗原，并加入待测样本，通过毛细管虹吸或者是微孔膜渗滤等作用与包被后的抗体、抗原相结合，最后再与胶体金标记物产生反应。现阶段，免疫胶体金快速诊断技术在兽医诊断中的应用分为两种方法：免疫层析试验与免疫渗滤试验。

1.1 免疫层析试验 将具备特异性的抗体或者是抗原固定在膜上，并将该范围选作检测带。把胶体金标记物放置于玻璃纤维结合释放垫中进行干燥，且胶体金标记物两端分别连接在样品垫与膜上，膜另外一端连接在吸水垫中。加入液体样品，通过毛细血管发生扩散，从而移动，在此作用下，玻璃纤维中的标记物会出现水化，与胶体金标记物发生反应，并向前泳动，一直到检测线结束，检测线截获待测物与标记物，显示红色。如果在样品中部存在待测物，说明其和游离标记物抵达质控线位置，红色是胶体金和质控线发生反应而显示红色。

1.2 免疫渗滤试验 固相载体通过微孔滤膜把具备特异性的抗体或者是抗原进行固定，将吸水材料填满渗滤装置，并将固定好的固相载体置入，一般情况下，扁形盒上方有小孔，并在试验过程中，把标本盒金标结合物分别滴在膜中，抗原抗体利用渗滤作用与膜上发生免疫结合并显色。以待测物为基础选择不同的试验方法，特别是在免疫球蛋白检测试验中，最好选择捕获法，而抗体检测选择间接法。

2 免疫胶体金快速诊断技术具备的优势

2.1 操作简便 无需仪器设备辅助，利用渗滤试剂盒或者是试纸条就能够完成试验，且样品在简单处理后就可开展试验。

2.2 特异性良好 免疫胶体金快速诊断技术在单克隆抗体的标记中应用较为广泛，因而具备良好的特异性。

2.3 灵敏度良好 免疫胶体金快速诊断技术具备良好的灵敏度，并不受其特异性的影响。有的试验操作中，灵敏度在1ng/ml或者是略低水平，少数试验的灵敏度不在该范围中，利用免疫金银染色法与生物素亲合素系统能够有效提高银加强试验的敏感度。

2.4 判定难度低 由于试验显色颜色非常明显，因此可通过肉眼判断阴、阳性。

2.5 迅速、快捷 免疫胶体金快速诊断技术在5—10min内就能显示试验结果，明显短于其他方法。

3 免疫胶体金快速诊断技术在兽医诊断中的应用

免疫胶体金快速诊断技术应用于兽医诊断中，不仅能够检测抗体，而且能够针对病原进行检测。

3.1 病原检测效果 在病原检测过程中，标记胶体金、NC膜分别与两种抗体包被，如果样品为阳性，那么病原在与胶体金标记体、NC膜发生反应，显色为红色；如果样品为阴性就不会出现上述现象。有专家学者在PRRSV斑点检测免疫金渗滤法构建过程中，进行交叉试验与特异性阻断试验，试验结果均显示具备良好的特异性，且检出率较高，具备很高的临床应用价值。

3.2 抗体检测效果 免疫胶体金快速诊断技术在抗体检测中应用时，抗原需包被在NC膜中，而抗原标记则利用胶体金。如果样品为阳性，那么抗体与NC膜或者是标记抗原发生反应后，显色为红色；如果样品为阴性，则不出现上述现象。

随着我国科学技术的不断发展，免疫胶体金快速诊断技术成为三大标记物后的发展较为成熟的一种测定技术，具备操作方便、快捷、特异性高等特点，可完成定量检测，因此在很多试验中代替传统试验中使用的ELISA等方法。免疫胶体金快速诊断技术在兽医诊断中使用时，所需费用较低且安全环保，符合构建环保型社会的要求，又不受到操作空间、地点的限制，因此在兽医临床诊断中将得到广泛的应用。

结语

综上所述，随着我国医疗技术的不断提高，免疫胶体金快速诊断技术得到很大发展，属于新型的一种诊断技术，逐渐与免疫荧光技术、放射免疫技术、免疫酶标技术称为临床诊断中的四大免疫标记技术，临床应用价值较高。免疫胶体金快速诊断技术在兽医临床诊断中的应用，创新了动物疫病的新的诊断模式，指明兽医临床诊断的发展方向。

[1]杨雪林,张福官,杨卫华等.胶体金快速诊断技术在兽医临床诊断中的应用[J].安徽农学通报,2010,16(2):36-37.

[2]汪莉.胶体金免疫层析快速诊断技术在疾控中心的应用[J].中国保健营养(上旬刊),2013,23(9):5277-5278.

[3]祖立闯,王金良,李娇等.胶体金免疫层析技术在动物疫病诊断上的应用[J].动物医学进展,2010,31(8):101-105.

[4]张书永.免疫胶体金快速诊断技术的临床应用与质量控制[J].中国医学装备,2013,10(5):37-39.

[5]李文胜,周伟,柳晓琴等.快速输血免疫胶体金法检测的临床应用评价[J].现代预防医学,2011,38(12):2369-2370.