建瓴汤联合卡托普利对大鼠高血压及肾脏的影响

田惠中，徐佳男，简心璐，张 薇，顾文政，龚细妹，何迎春*

（湖南中医药大学，湖南 长沙410208）

高血压是指以血压升高为主要临床表现伴有或不伴有多种心血管危险因素的综合征[1]，血管紧张素I 转化酶抑制药（ACEI）、利尿药是临床上常用的联合用于拮抗高血压的药物类别，其中常用药物分别有卡托普利、氢氯噻嗪等，但临床研究表明长期运用卡托普利及利尿药可能导致尿蛋白升高等肾损害作用[2]。 建瓴汤出自《医学衷中参西录》，今有诸多医家将其运用于临床治疗高血压病，且疗效可观[3-4]。 本实验通过观察建瓴汤对高盐饲料复制的高血压大鼠的血压、 尿微量白蛋白(microalbuminuria，mALB）、尿N-乙酰-β-D-葡萄糖苷酶（N-acetylbeta-D-glycosidase enzyme，NAG enzyme）、 光镜下肾病理改变的影响，探讨建瓴汤的降血压及护肾作用。 现将实验方法与结果报道如下。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 动物 SPF 级雄性SD 大鼠60 只， 体质量（235±15）g， 购自湖南斯莱克景达实验动物有限公司，实验动物许可证号：SCXK（湘）2011-0003。

1.1.2 试药 （1）中药：建瓴汤（怀山药30 g，怀牛膝30 g，代赭石24 g，龙骨18 g，牡蛎18 g，生地黄18 g，白芍12 g，柏子仁12 g）由湖南中医药大学第一附属医院中药房煎制并真空包装， 每袋200 mL（含生药0.81 g/mL）。 （2）西药：卡托普利片由华中药业股份有限公司生产 （规格25 mg/片， 批号：20130302）， 氢氯噻嗪片由山西云鹏制药有限公司生产（规格25 mg/片，批号：A130104）。

1.1.3 饲料 普通饲料和8%高盐饲料由湖南省中医药大学动物实验中心负责加工制成。

1.1.4 主要仪器 Softron BP-2010A 大鼠无创血压测量仪（北京软隆科技有限责任公司）；大鼠尿NAG酶检测试剂盒(批号：201310)及大鼠尿mALB 检测试剂盒(批号：201310)购于武汉贝茵莱生物科技有限公司。

1.2 方法

1.2.1 造模 60 只大鼠适应性喂养4 d 后，按随机数字表法从60 只大鼠中随机抽选10 只标记为正常对照组，饲喂正常饲料及饮水。 另外50 只大鼠为造模组，用于复制高血压大鼠模型[5]，饲喂高盐饲料（含8.0%氯化钠）和饮用0.85%氯化钠液，复制期10 周，期间每周测定1 次大鼠尾动脉压，当大鼠血压比处理前高20 mmHg（大于正常血压3个标准差值） 以上且高于115 mmHg 者确定为高血压模型[6]。

1.2.2 分组 造模过程中死亡13 只大鼠（其中正常组3 只、造模组10 只），模型复制成功后，将喂养高盐饲料的40 只大鼠再按随机数字表法随机分为5 组，即模型组8 只、中药（予建瓴汤）组8只、西药（予卡托普利）组8 只、西联（予卡托普利加氢氯噻嗪） 组6 只、 中西 （予建瓴汤加卡托普利）组10 只。

1.3 给药

中药组按照人与动物体表面积折算的等效剂量比值，灌胃含生药16.8 g/（kg·d）建瓴汤；西药组灌胃卡托普利15.6 mg/（kg·d）； 西联组灌胃卡托普利15.6 mg/（kg·d）和氢氯噻嗪7.8 mg/（kg·d）；中西组灌胃卡托普利15.6 mg/（kg·d） 和建瓴汤16.8 g/（kg·d）； 正常对照组及模型对照组均灌胃生理盐水52.0 mL/（kg·d），持续12 周，6 组大鼠均饲喂正常饲料及饮水。

1.4 观察指标及检测方法

1.4.1 标本采集及制作 （1）24 h 尿液采集：末次给药后即收集各组大鼠24 h 尿液， 尿液指标使用试剂盒检测。（2）肾组织切片制作：末次给药后24 h处死大鼠，立即剥离双肾，用生理盐水冲洗，滤纸擦干。 每只大鼠的左右两肾纵切分成两个部分，各取其中一半用10%甲醛固定。 将甲醛固定的标本经梯度乙醇脱水，二甲苯透明、浸蜡、包埋、石蜡切片后苏木精-伊红（HE）染色。

1.4.2 检测指标 （1）血压：造模及用药期间每周测量大鼠尾动脉压1 次，于造模后、用药1月、用药3月后，分别测定各组大鼠血压值；（2）尿mALB；（3）尿NAG 酶浓度；（4）光镜下观察肾组织切片，每张切片随机选取5个不重叠的视野（×400）采集图片。

1.5 统计学分析

2 结果

2.1 各组大鼠血压不同时段比较

造模前，各组大鼠血压差异无统计学意义（P＞0.05）。 造模完成后，各造模组大鼠血压都高于正常组（P＜0.05 或P＜0.01），说明造模成功；给药1个月后，与正常组比较，西药组、中西组、西联组血压无统计学意义（P＞0.05），中药组、模型组血压均显著高于正常组（P＜0.01）；与模型组比较，西药组、中西组、西联组血压均显著下降（P＜0.01），而中药组无统计学差异（P＞0.05），说明中西组、西药组及西联组降压效应相似，且西药降压效果较中药快。 治疗3个月后，与正常组比较，各用药组大鼠血压均恢复至正常水平，差异无统计学意义（P＞0.05），而模型组血压仍显著高于正常组（P＜0.01），说明各药物均可有效治疗高血压。 结果见表1。

表1 各组大鼠不同时间段血压比较（±s，mmHg）

表1 各组大鼠不同时间段血压比较（±s，mmHg）

注1： 药物剂量：a=卡托普利15.6 mg/（kg·d）；b=建瓴汤16.8 g/（kg·d）；c=a+b；d=a+氢氯噻嗪7.8 mg/（kg·d）。 下表同。注2：与正常组比较*P＜0.05，**P＜0.01；与模型组比较＃＃P＜0.01；与西药组比较☆☆P＜0.01。 下表同。

组 别正常组模型组西药组中药组中西组西联组n 7 8 8 8 1 0 6药物剂量——abcd造模前119±3 120±7 116±6 117±5 118±5 119±5造模后119±5 139±3**127±6*143±6**135±7**140±5**治疗1月120±4 137±6**118±6＃＃136±1**126±8＃＃126±5＃＃治疗3月117±3 141±6**112±6＃＃116±5＃＃118±6＃＃118±3＃＃

2.2 治疗期3月后各组大鼠24 h 尿NAG 酶和mALB 浓度比较

治疗期3月后， 各组大鼠NAG 酶和mALB 均显著高于正常组（P＜0.01）；西药组NAG 酶和mALB均显著高于模型组（P＜0.01）；与西药组比较，中药组、中西组NAG 酶和mALB 均显著降低（P＜0.01）；西联组与西药组之间NAG 酶和mALB 均无统计学差异（P＞0.05）。 说明模型组和各药物治疗组都有不同程度的肾功能损害，而中药可显著减轻西药对肾功能的损害。 结果见表2。

表2 治疗3个月后各组大鼠24 h 尿NAG 酶和mALB 比较

2.3 各组大鼠肾组织病理学变化

正常组大鼠肾组织结构无明显病理改变；模型组大鼠肾组织可见入球小动脉管壁增厚、 管腔狭窄、细动脉玻璃样变性、肾小球硬化及萎缩等病理改变，说明高血压本身对肾脏有损害；西药组与西联组大鼠， 除表现模型组大鼠肾脏病理改变外，另有细胞广泛性空泡变性、 肾小管上皮细胞脱落、肾小球肥大或萎缩、基底膜增厚，西药组可见炎性细胞浸润及细动脉充血，总体来看，西联组大鼠肾脏损害程度轻于西药组，说明卡托普利对肾脏具有损害作用，而氢氯噻嗪与卡托普利联用能缓解其肾脏损害作用； 中药组大鼠肾脏细胞偶见空泡变性，其余病理改变程度较模型组轻，说明建瓴汤对肾脏有保护作用；中西组大鼠肾脏总体病理改变程度较模型组、西药组、西联组少，说明建瓴汤与卡托普利联用时能减轻卡托普利的肾损害作用，并且其效果优于氢氯噻嗪与卡托普利联用。结果见封三彩图图1。

3 讨论

高血压是引起肾功能损伤等疾病的重要危险因素，由于其复杂性，大多数患者需要联合治疗和终生用药，ACEI（如卡托普利）为高血压治疗的一线药物[7]，单用本品能使大多数高血压患者血压控制在理想水平[1]，联用利尿剂氢氯噻嗪能增强降血压作用，但临床研究表明长期运用卡托普利及利尿药可能导致尿蛋白升高等肾损害现象[2]，而多项临床研究表明建瓴汤具有良好的降压效果[3-4]，故本实验通过探究建瓴汤联合卡托普利对高血压大鼠的降压效应及减轻肾的损害，为中西医结合治疗高血压提供一个安全有效的实验数据。

肾脏既是血压调节的重要器官，又是高血压损害的主要靶器官之一。 高血压的肾损害机制为动脉内高压造成的血管病变，以局灶阶段性肾小球硬化和缺血性肾小球萎缩为常见的病理改变，同时伴肾小管的萎缩和肾间质纤维化等改变[8]。 肾小球滤过膜具有滤过血液功能，尿mALB 的排泄增加提示肾小球滤过膜损害，是肾损害的早期表现[9]，NAG 酶是一种位于溶酶体内的酸性水解酶，当肾近曲小管上皮细胞受损时，尿NAG 酶活性显著升高，且早于其他尿酶。 因此尿NAG 酶是反映肾小管敏感且特异的指标[10]。 两者联合测定可作为疗效判断的依据。

高血压属于中医学中 “眩晕”、“头痛”、“肝风”等病症范畴，血脉瘀阻、肝风内动是本病的基本病机[11]，应用中医学辨证治疗高血压病能够起到显著的降压效果[12]。 建瓴汤原方出自清末民初名医张锡纯所著《医学衷中参西录》，用于治疗肝阳上亢或肝火上炎之头痛、震颤等症状。 怀牛膝能活血通经、引血下行、 兼补肝肾， 代赭石平肝潜阳、重镇降逆，二药合用，平肝同时兼顾补益肝肾，共为君药；龙骨、牡蛎助君药潜阳降逆，还兼有安神功效，共为臣药；加用生地黄、怀山药滋阴降火，白芍平肝木之火，三者共为佐药；柏子仁甘平可养心安神而为佐使药。 以上八味药，配伍使用，共奏平肝潜阳、补益肝肾、养心安神之功，从而调和阴阳、和畅气血，可以达到降压同时顾护肝肾的疗效。 何婷等[3]及佟文浩[4]发现建瓴汤对于阴虚阳亢型原发性高血压有良好的降压及改善临床症状的作用。

本研究结果表明： 单用建瓴汤达3月时对高血压大鼠具有显著降压效应； 建瓴汤与卡托普利联用无协同降压作用， 但能拮抗卡托普利对高血压大鼠的肾脏损害作用， 其具体作用机制有待进一步研究。

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