复方阿莫西林缓释干混悬剂的初步稳定性及有关物质测定方法研究

●刘畅 李壮 熊晓红 卜鑫珏 简白羽 董岩

复方阿莫西林缓释干混悬剂的初步稳定性及有关物质测定方法研究

●刘畅 李壮 熊晓红 卜鑫珏 简白羽 董岩

目的：初步考察自制复方阿莫西林缓释干混悬剂的稳定性，建立测定该制剂中有关物质的HPLC方法。方法：利用影响因素试验初步考察高温、高湿对复方阿莫西林缓释干混悬剂稳定性的影响；利用自身对照法，色谱柱ODS-C18柱，流动相为A相-B相（75:25），其中A相为0.01mol/l磷酸二氢钾（pH6），B相为0.01mol/l磷酸二氢钾-乙腈（20:80），流速：1mL/min，检测波长239nm，进样20μL。结果：高温、高湿条件下阿莫西林、对乙酰氨基含量下降，杂质含量增加。结论：自制复方阿莫西林缓释干混悬剂受湿度、温度影响较大，本文建立色谱方法可用于复方阿莫西林缓释干混悬剂有关物质的测定。

阿莫西林；干混悬剂；稳定性；有关物质

0 前言

抗生素是临床治疗化脓性扁桃体炎的主要治疗方法[1]，阿莫西林是其中的常用药，临床上可联合应用对乙酰氨基酚可缓解发病时的高热症状。研究组前期已制备了两种药物的复方缓释干混悬剂，经体外释放度实验证实具有明显的缓释效果。为进一步保证制剂质量本文对该制剂在高温、高湿条件下的稳定性进行考察，并建立用于有关物质测定的HPLC法，用于该制剂的质量控制。

1 试药

阿莫西林（武汉拉那白医药化工有限公司）；对乙酰氨基酚（河北冀衡药业有限公司）；乙基纤维素45cp（武汉拉那白医药化工有限公司）；羟丙甲纤维素（安徽山河药用辅料股份有限公司）；黄原胶（湖北葛店人福药用辅料有限公司）；其他试剂均为分析纯。

2 方法与结果

2.1 复方阿莫西林缓释干混悬剂的制备

以EC45cp为载体，按EC：阿莫西林=3:1比例，以丙酮、乙醇为溶剂，利用溶剂-熔融法分别制备阿莫西林、对乙酰氨基酚固体分散体。蒸去溶剂将熔融物倒在冷却玻璃板上，真空干燥24h，粉碎，过筛，避光低温保存。将处方量阿莫西林固体分散体、对乙酰氨基酚固体分散体、HPMC（15%）、黄原胶（4%）和乳糖（6%）放入乳钵中，研匀，过筛，即得复方阿莫西林缓释干混悬剂，低温避光保存。

2.2 有关物质的HPLC方法

2.2.1 色谱条件：

色谱柱：ODS-C18柱，流动相为A相-B相（75:25），其中A相：0.01mol/ l磷酸二氢钾（pH6）；B相：0.01mol/l磷酸二氢钾-乙腈（20:80），流速：1mL/min，检测波长239nm，进样体积20μL。

2.2.2 溶液的制备：

供试品溶液：精密称取干混悬剂适量（约相当于阿莫西林25mg，对乙酰氨基酚8.125mg）， A相溶解定容，制成每1mL中含有阿莫西林0.5mg，对乙酰氨基酚0.1625mg的溶液，过滤。

对照品溶液：精密称取阿莫西林25mg和对乙酰氨基酚8.125mg，同法配置定容至50mL。

阿莫西林对照品溶液：精密称取阿莫西林25mg，同法配置定容至50mL。

对乙酰氨基酚对照品溶液的配置：精密称取乙酰氨基酚8.125mg，同法配置定容至50mL。

2%自身对照溶液的配置：精密量取同一批干混悬剂7mg，同法配置定容至50mL。

空白辅料溶液的配置：精密称取乙基纤维素198.75mg、HPMC53mg、黄原胶14mg、乳糖18mg，流动相溶解定容至50mL。

2.2.3 测定方法：对照品溶液进样 20μL，调节检测器灵敏度，使对乙酰氨基酚峰高约为满量程25%。2%自身对照溶液与样品各进样20μL，记录色谱图和峰面积，记录的色谱图保留时间约为对乙酰氨基酚保留时间的4倍。按外标峰面积法计算样品中杂质总的峰面积以及最大单个质峰面积与2%自身对照溶液两个主峰面积和的比值，分别计算总杂质和最大杂质所占供试品中总峰面积的比例。供试品色谱图中任何小于对照溶液两个主峰面积和0.05倍的峰可以忽略不计。

2.2.4 系统适用性试验： 2%自身对照溶液、供试品溶液、阿莫西林对照品溶液、对乙酰氨基酚对照品溶液及空白辅料溶液各进样20μL，记录色谱图。阿莫西林保留时间2.651min，对乙酰氨基酚保留时间4.351min，分离度良好，且空白辅料无影响。

2.2.5 线性关系考察：采用自身对照法在假设所有物质响应因子相同的前提下，考察有关物质在自身对照溶液浓度附近变化时的线性规律。取阿莫西林原料药细粉适量，加A相稀释后分别制成含阿莫西林1.200μg/ mL～24.00μg/mL的一系列溶液，按上述色谱条件进样后记录峰面积。阿莫西林浓度对峰面积作图，得算线性回归方程y=10187x+9656.7 （r=0.9997），线性关系良好，即有关物质浓度在此浓度范围内符合线性关系。

2.2.6 精密度及稳定性试验：将供试品溶液在上述色谱条件下连续进样6次，记录杂质总的峰面积以及最大杂质峰面积，并计算平均值及RSD值。将供试品溶液在室温下依次在 0，1，2，3h 进样，记录峰面积，计算3h内最大单个杂质峰面积、总杂质峰面积的平均值及RSD值。RSD值均小于2，表明精密度及稳定性良好。

2.3 复方制剂稳定性的考察

2.3.1 高温对稳定的影响：取干混悬剂适量，置于培养皿中摊成薄层，开口置60℃恒温干燥箱，于第五、十天取样，与0天供试品比较，外观变黄有黏结，随时间延长主药含量均下降，有关物质峰面积增大。

2.3.2 高湿对稳定的影响：取干混悬剂适量，置于培养皿中摊成薄层，开口置恒湿密闭容器中（湿度：75%±5%；温度：25±2℃），于第五、十天取样，与0天的供试品比较，外观变黄，随时间延长主药含量均下降，有关物质峰面积增大

3 讨论

在有关物质测定时对色谱条件进行了创新性的改进，由于无系统适用性对照品，故并未对有关物质进行具体确定。由于本制剂为创新制剂，药典中没有明确规定有关物质的标准，故在稳定性的初步考察时对有关物质的考察只与0天同一批干混悬剂进行有关物质含量的比较，由此来判定高温高湿对制剂稳定性的影响。高温条件对复方阿莫西林缓释干混悬剂稳定性有影响，且高温影响更大。尤其是阿莫西林在湿热条件下很容易降解，样品外观颜色开始变化。所以在制剂的储藏过程中一定要避免高温、高湿等条件。

（作者单位：齐齐哈尔医学院）

[1] 陈永超.阿莫西林克拉维酸钾对小儿化脓性扁桃体炎的疗效[J].临床医学, 2016 , 36 (4):115-116.

齐齐哈尔市科技局社会发展攻关项目（SFZD-2013019）

刘畅（1982～），女，硕士研究生，讲师，研究方向为药物制剂。