生殖激素诱导小尾寒羊同期发情效果研究

辛晓玲，王二耀，滑留帅，冯亚杰，张子敬，赵洪昌，施巧婷，陈付英，楚秋霞，王鸿周

(河南省农业科学院畜牧兽医研究所， 河南郑州 450008)



生殖激素诱导小尾寒羊同期发情效果研究

辛晓玲，王二耀，滑留帅，冯亚杰，张子敬，赵洪昌，施巧婷，陈付英，楚秋霞，王鸿周

(河南省农业科学院畜牧兽医研究所， 河南郑州 450008)

摘要：为了比较不同生殖激素组合对小尾寒羊同期发情效果的影响，采用国产孕酮阴道海绵栓+PMSG+PG(Ⅰ组)、CIDR+PMSG+PG(Ⅱ组)和2次氯前列醇法(Ⅲ组)对478只小尾寒羊进行同期发情研究。结果表明，Ⅰ组和Ⅱ组母羊同期发情率分别为81.1%和83.5%，人工授精后受胎率分别为75.3%和83.2%，差异不显著(P>0.05)。Ⅲ组同期发情率94.9%，与Ⅰ组和Ⅱ组比较，差异显著(P<0.05)；人工授精后受胎率80.6%，与其他两组无显著差异(P>0.05)。3种处理方法导致母羊阴道炎发病率分别为8.2%、3.0%和0。综合考虑3种处理方法的同期发情效果、受胎率和药品成本，国产孕酮阴道海绵栓可替代CIDR在生产中大范围使用。

关键词：生殖激素；孕酮阴道海绵栓；氯前列醇；同期发情；小尾寒羊

近年来，中原农区规模化舍饲养羊蓬勃发展，出现了一批上千只甚至几万只规模的羊场。要实现规模化羊场的盈利，必须充分利用现代繁殖技术，尤其是同期发情和人工授精技术。同期发情、同期配种、同期产羔以及对成批整齐的羔羊集中培育、出栏，便于生产的组织和管理，是提高规模化养羊场繁殖率和养羊生产管理水平的一项必不可少的技术手段。另外，开展羊胚胎移植工作也需要供体羊和受体羊进行同期发情，其发情同步化程度是影响胚胎移植成功率的关键因素之一。因此，羊同期发情技术是养羊业生产中一项重要的实用技术。本研究使用商品化的国产孕酮阴道海绵栓和进口CIDR以及2次前列腺素法对小尾寒羊进行诱导同期发情，以期找到在生产中便于操作、成本低廉、效果又稳定的同期发情方法。

1材料与方法

1.1材料

1.1.1试验用动物本试验在河南金卡特农业开发有限公司羊场和博爱显威养殖专业合作社进行。所用母羊为健康状况良好的经产或育成小尾寒羊478只；种公羊为杜泊羊和兰坪乌骨绵羊。

1.1.2药品国产孕酮阴道海绵栓(含30 mg 氟孕酮，南京农业大学研制)；CIDR(Y型孕酮阴道栓，含45 mg黄体酮，新西兰生产，批号：S051011)；孕马血清(PMSG，1 000 IU/瓶，宁波第二激素厂产品，批号：140209)；氯前列醇(PG，0.2 mg/支，上海计划生育研究所产品，批号：20131105)；注射用促黄体素释放激素A3(LHRH-A3，20 μg/支，宁波市三生药业有限公司产品，批号：120905)；长效土霉素注射液(10 mL∶土霉素100万单位，江西省特邦动物药业有限公司产品，批号：20140611)。

1.2方法

1.2.1同期发情处理将所选小尾寒羊随机分为3个试验组：Ⅰ组(国产孕酮阴道海绵栓+PMSG+PG法)共180只，在任意一天早上埋植国产孕酮阴道海绵栓，为预防粘连和感染，在埋植前将海绵栓前端和四周涂抹红霉素软膏。放栓当天为0 d，第11天颈部肌肉注射孕马血清330 IU/只，第13天早上撤栓并肌肉注射氯前列醇0.1 mg/只。同时检查有无阴道炎症发生，如有粘连和阴道炎发生，及时用含抗生素的温生理盐水冲洗；Ⅱ组(CIDR+PMSG+PG法)共200只，使用CIDR处理，无需涂抹红霉素软膏，其他处理同Ⅰ组；Ⅲ组(二次氯前列醇法)共98只，在任意一天第1次注射氯前列醇0.1 mg/只，10 d后第2次注射氯前列醇0.1 mg/只。

1.2.2发情鉴定在撤栓或第2次注射氯前列醇后，用试情公羊(试情布每天要洗净)按1∶40～1∶50的公母比例，每天早晚各试情1次。在试情过程中，要随时赶动母羊，不要让母羊拥挤，使试情公羊有机会追逐发情母羊，接受公羊爬跨并站立不动的母羊视为发情母羊。做好标记和记录，统计12 h～24 h、24 h～48 h、48 h～72 h时间段内发情母羊数量。

1.2.3人工授精采集杜泊羊和兰坪乌骨绵羊种公羊新鲜精液，用维生素B12做3倍稀释后人工授精，输入子宫颈约1.5 cm深处。每只母羊授精2次～3次，每次间隔12 h，在第1次输精时，同时肌肉注射促黄体素释放激素A3(促排3号)20 μg/只。

1.2.4妊娠检查输精后17 d～25 d 用试情公羊检查返情，60 d 用兽用B超进行妊娠诊断。统计母羊不返情率和受胎率。数据用SPSS进行卡方检验。

2结果

2.1不同处理方法各时间段内发情数量和发情率

本试验用3种不同方法诱导小尾寒羊同期发情，在撤栓或第2次注射氯前列醇后12 h开始试情，统计12 h～24 h、24 h～48 h、48 h～72 h时间段内发情母羊数量。结果表明，使用国产孕酮阴道海绵栓和CIDR并配合使用孕马血清和氯前列醇的两组母羊，其发情集中在12 h～24 h，发情母羊数分别占该组总发情母羊数的71.9%和74.3%；两组72 h内总发情率分别为81.1%和83.5%，差异不显著(P>0.05)。而2次氯前列醇法处理组母羊发情则集中在24 h～48 h，发情母羊数占该组总发情母羊数的63.4%，72 h内总发情率则为94.9%(表1)，与Ⅰ组和Ⅱ组相比差异显著(P<0.05)。

表1　3种处理方法各时间段内母羊同期发情效果

2.2人工授精受胎率统计

撤栓时检查有无阴道炎症发生，统计发现，Ⅰ组阴道炎发病率达8.2%，Ⅱ组仅为3.0%，Ⅲ组未出现阴道炎。采集鲜精施行人工授精，25 d未返情率3个组分别为88.4%、91.0%和89.2%，60 d受胎率则分别为75.3%、83.2%和80.6%，其中国产孕酮阴道海绵栓组受胎率稍低，但经卡方检验，与其他两组并无显著差异(P>0.05)。具体情况见表2。

表2　小尾寒羊人工授精受胎率情况统计

3讨论

3.1母羊同期发情集中程度分析

本试验采用国产孕酮阴道海绵栓和CIDR配合孕马血清和氯前列醇进行小尾寒羊同期发情处理，其发情时间集中在12 h～24 h，一般撤栓当天下午就有母羊发情，第2天早上试情发现大部分母羊发情，两个处理组发情母羊数分别占该组总发情母羊数的71.9%和74.3%；第2天下午有少量母羊发情，第3天仅有少数几只发情。

本试验与田树军等[1]的研究结果类似，他们采用撤栓前1 d注射孕马血清、撤栓时注射氯前列烯醇的方法，0 h～24 h同期发情率在80%以上。而马世林等[2]的研究表明，用CIDR处理13 d后撤栓，同时肌注400 IU孕马血清，其0 h～24 h发情母羊数占总发情母羊数的20%，24 h～48 h为52%，48 h～72 h还有28%的羊发情，母羊发情集中在24 h～48 h。叶峰等[3]在撤栓的同时肌肉注射500 IU孕马血清，母羊也是集中在24 h～48 h发情。常育贤等[4]同样在撤栓时肌肉注射333 IU孕马血清，母羊多在24 h～56 h发情。分析原因，可能与孕马血清注射的时间和撤栓时是否注射氯前列醇有关。孕马血清可以促进卵巢上卵泡的发育,但起作用需要一定的时间；氯前列醇可快速溶解卵巢上残存的黄体。因此，撤栓前2 d注射孕马血清，然后2 d后撤掉孕酮栓同时注射氯前列醇，迅速解除孕激素对卵泡发育的抑制作用，则可以显著提高母羊的同期发情率和发情集中程度。

3.2不同处理方法对母羊同期发情效果分析

本试验采用国产和进口孕酮栓的两组处理方法，72 h内总发情率分别为81.1%和83.5%，差异不显著，说明两种孕酮栓效果相当；而2次氯前列醇法处理组总发情率为94.9%，与Ⅰ组和Ⅱ组相比差异显著。刘长彬等[5]采用国产孕酮阴道海绵栓处理小尾寒羊，同期发情率达到89.06%。田小平等[6]应用1次氯前列醇钠法处理四季发情的贵州白山羊，同期发情率可达到51.8%。陈西英[7]应用氯前列烯醇和阴道海绵栓对280只繁殖母羊进行同期发情试验，用阴道海绵栓试验的母羊同期发情率91.88%，用氯前列烯醇试验的母羊同期发情率98.33%。而权凯等[8]用孕酮栓和2次氯前列醇法处理青海高原半细毛羊，得到的同期发情率分别为86.8%和61.8%，2次氯前列醇法效果不如孕酮栓法。2次氯前列醇法能否得到较高的同期发情率，与绵羊是否为四季发情品种和处理的季节有关。氯前列醇可以溶解黄体，但仅对排卵后4 d～16 d的黄体有效，其他时间(4 d以下、17 d以上)的黄体对氯前列醇不敏感；并且氯前列醇对于卵巢处于静止状态(如处于非繁殖季节或哺乳期)的母羊也无效果。小尾寒羊属于常年发情绵羊品种，其雌二醇、孕酮和促卵泡素等生殖激素在4个季节中基本稳定[9]，因此用氯前列烯醇处理效果良好。值得注意的是，氯前列醇法用于绵羊同期发情时, 一旦有未被发现的妊娠羊, 则会引起流产, 造成一定的经济损失, 所以在处理前应仔细检查，排除妊娠羊只。

3.3不同处理方法对受胎率的影响

有研究表明，2次氯前列醇法同期发情率比阴道海绵栓法高，但情期受胎率却低。李长存等[10]研究发现，阴道栓处理的母羊同期发情率90.63%，受胎率65.5%；用氯前列烯醇处理的母羊同期发情率97.58%，受胎率仅为42.15%。彭巍等[11]采用PG+PG法处理农区藏羊，情期受胎率为60.42%，而采用CIDR+PMSG法处理，农区藏羊的情期受胎率可达到80.0%。也有不同的报道，田斌等[12]在春季分别用氯前列烯醇和CIDR+PMSG法对小尾寒羊进行同期发情处理，氯前列烯醇法的情期受胎率为76.31%，CIDR+PMSG法的情期受胎率为72.09%。本试验结果表明，3种处理方法60 d情期受胎率分别为75.3%、83.2%和80.6%，无显著差异，2次氯前列醇法受胎率还高于阴道海绵栓法，这可能与本试验在人工授精时肌肉注射促黄体素释放激素A3(促排3号)有关。

另外，国产孕酮阴道海绵栓组受胎率偏低，可能受使用该栓引起的8.2%阴道炎发病率影响。有研究表明[13]，使用海绵栓会导致27.6%的母羊阴道发生炎症。本试验在埋栓前将海绵栓前端和四周涂抹红霉素软膏，起到润滑和预防感染的作用，可降低海绵栓发生粘连和炎症的风险。

3.4不同处理方法同期发情成本分析

进口CIDR市场价约35元，而国产孕酮海绵栓约12元，孕马血清用药量每只羊约需6元，1次氯前列醇注射需4元。这样使用CIDR进行同期发情的药品成本约为45元，国产孕酮海绵栓为22元，而2次氯前列醇法仅需要8元。本试验结果表明，国产孕酮阴道海绵和CIDR诱导母羊的同期发情率和受胎率均无显著差异，因此，在规模化养羊生产中，完全可以使用国产孕酮阴道海绵栓诱导母羊同期发情，可有效降低处理费用。目前，应用CIDR诱导同期发情，同期发情率和受胎率等效果非常稳定，不易粘连造成阴道炎症，但处理成本较高，一般在进行胚胎移植供体羊同期发情时使用。2次氯前列醇法成本最低，且同期发情效果确实可靠，虽然有造成孕羊流产的风险，但在管理规范的羊场，公、母羊分圈饲养，常年开展同期发情处理，羊群发情周期明确，使用2次氯前列醇法还是切实可行的。

总之,本试验采用国产孕酮阴道海绵栓和CIDR，配合使用孕马血清和氯前列醇，取得了较好的同期发情效果，其同期发情率和受胎率无显著差异，考虑成本因素，国产孕酮阴道海绵栓更适合在规模化养羊生产中大范围使用。2次氯前列醇法成本最低，操作简便，且同期发情率高于孕酮栓组，差异显著，受胎率与孕酮栓组无差异，因此，在管理规范、母羊繁殖状况清楚的规模化养羊场，可以考虑使用。

参考文献:

[1]田树军，桑润滋，李俊杰，等.应用生殖激素对小尾寒羊同期发情效果研究[J].河北农业大学学报，2004,27(1)：89-91.

[2]马世林，张琴，杨磊，等.小尾寒羊同期发情与人工授精试验研究[J].畜牧兽医科技信息，2015(2):21-22.

[3]叶峰，史远虹，陈华，等.非繁殖季节不同品种绵羊同期发情试验研究[J].草食家畜，2010,9(3)：45-47.

[4]常育贤，吐尔洪·阿木提.外源激素诱导绵羊同期发情效果观察[J].中国畜禽种业，2011(2):62-63.

[5]刘长彬，张宾，李国庆，等.春季小尾寒羊同期发情及受胎率效果分析[J].甘肃畜牧兽医，2014,44(9)：34-35.

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[8]权凯，黄炎坤，张长兴.青海高原半细毛羊同期发情的研究[J].黑龙江畜牧兽医，2005(7)：30-31.

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[10]李长存，姚海儒，任旭荣，等.阴道海绵栓和前列腺素在绵羊同期发情中的试验研究[J].养殖与饲料，2008(5)：5-6.

[11]彭巍，徐尚荣，张君.青海农区藏羊同期发情及适时授精技术试验研究[J].青海畜牧兽医杂志，2015,45(3)：13-14.

[12]田斌，宋玉魁.氯前列烯醇与CIDR两种方法对绵羊春季同期发情及受胎效果的观察[J].中国草食动物，2007,27(1)：31-33.

[13]权凯，魏红芳，茹宝瑞.欧宝棉栓影响小尾寒羊同期发情效果初探[J].中国草食动物科学，2014,34(4)：78-79.

Effects of Reproductive Hormone Induction on Estrus Synchronization in Small-tail Han Sheep

XIN Xiao-ling,WANG Er-yao,HUA Liu-shuai,FENG Ya-jie,ZHANG Zi-jing,ZHAO Hong-chang,SHI Qiao-ting,CHEN Fu-ying,CHU Qiu-xia,WANG Hong-zhou

(InstituteofAnimalHusbandryandVeterinaryMedicine,HenanAcademyofAgriculturalSciences,Zhengzhou，Henan，450008,China)

Abstract:In order to study the effects of different reproductive hormone combinations on estrus synchronization in small-tail Han ewes,three combinations of reproductive hormones were used to induce estrus synchronization in 478 small-tail Han ewes.The ewes were divided into three groups.The ewes in group 1 were treated with domestic progeterone-impregnated intravaginal sponge,the pregnant mare serum gonadotrophin ( PMSG) and prostaglandins;The ewes in group 2 were treated with CIDR,PMSG and prostaglandins;The ewes in group 3 were treated two times with prostaglandins.The result showed that the estrus rates of ewes in group 1 and group 2 were 81.1% and 83.5%;The pregnancy rates after artificial insemination were 75.3% and 83.2%,respectively.There were no significant differences between group 1 and group 2(P>0.05).The estrus rate of ewes in group 3 was 94.9%,and had significant differences with group 1 or group 2(P<0.05).Meanwhile,the pregnancy rate of ewes in group 3 was 80.6%,and there were no significant differences with other two groups(P>0.05).The vaginitis incidence of the three group ewes were 8.2%,3.0% and 0,respectively.Considering the estrus rate,the pregnancy rate and medicine costs of the three treatments,domestic progeterone-impregnated intravaginal sponge can be applied in a larger scale to substitute for CIDR.

Key words:reproductive hormone;progeterone-impregnated intravaginal sponge;prostaglandin;estrus synchronization；small-tail Han sheep

文章编号:1007-5038(2016)03-0067-04

中图分类号:S857.21

文献标识码:A

作者简介：辛晓玲(1972-)，女，河南郑州人，副研究员，博士，主要研究方向为动物遗传育种与繁殖。

基金项目：河南省科技攻关计划项目(142102110070)；农业部转基因专项(2014ZX08008)；河南省农业科学院优秀青年科技基金项目(2013YQ20)

收稿日期：2015-10-08