同型半胱氨酸浓度及MTHFR基因多态性与急性心肌梗死的相关性分析

章志玲 张明 张淑华

同型半胱氨酸浓度及MTHFR基因多态性与急性心肌梗死的相关性分析

章志玲 张明 张淑华

目的 研究半胱氨酸浓度及MTHFR基因多态性与急性心肌梗死（AMI）之间的相关性。方法 选取60例AMI患者，随机分为病例组和治疗组，各30例，病例组采取常规住院治疗方案，治疗组在此基础上口服叶酸治疗，10mg/次，3次/d。另选择同期60名健康者作为对照组。分别测定3组血浆同型半胱氨酸（Hcy）浓度、叶酸、维生素B12浓度水平以及MTHFR基因的多态性。结果 AMI病例组血浆Hcy浓度（18.74±3.71）μmol/L水平明显高于其余2组，差异具有明显统计学意义（P＜0.05）；病例组患者的维生素B12（321.41±87.4）μg/mL以及叶酸水平（4.87±3.16）ng/mL明显低于其余2组（P＜0.05）；叶酸以及维生素B12与Hcy浓度水平之间呈负相关性；AMI2组患者的MTHFR基因TT纯合子组的血浆Hcy水平与CT杂合子和CC纯合子相比明显增高；与健康对照组相比AMI2组TT纯合子的分布频率明显增高；并且AMI2组的T等位基因频率明显增高（P＜0.05）。结论 Hcy在血浆中的浓度水平与AMI的发病之间有着密切的联系，通过叶酸的使用可以降低血浆中Hcy的浓度，进而降低AMI的风险；HTHFR基因的多态性与AMI易感性密切相关，HTHFR基因的T等位基因可能是导致AMI的风险基因突变。

急性心肌梗死；MTHFR基因；Hcy；叶酸；基因多态性

急性心肌梗死（acute myocardial infarction，AMI）是一种长时间缺血而导致的心脏肌肉出现不可逆性的坏死，是一种急性心血管疾病的临床表现[1]，AMI的发生是由环境和基因相互作用所引发[2-3]。近些年的研究发现，血浆Hcy水平是造成心血管疾患的一个重要风险因素[4-5]。在Hcy代谢的过程中N5,N10-亚甲基四氢叶酸还原酶(N5,N10methylenetetrahydrofolate reductase,MTHFR)基因碱基图片会导致高Hcy血症，其中最为常见的是C677T基因位点的突变。本次研究首先通过检测治疗组患者、病例组患者和健康者血浆中Hcy、叶酸以及维生素B12的浓度水平，并进一步研究MTHFR基因多态性与各组患者之间相关性。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取江西省人民医院二部2012年10月～2015年4月就诊的60例AMI患者，按照随机数字表将其分为病例组和治疗组，并选取同时期来本院进行健康体检的健康人60名。3组人群在年龄、性别比率、吸烟以及文化程度等方面差异无统计学意义，具有可比性。见表1。

表1 3组基线资料对比（n）

1.2 治疗方法 病例组按照常规治疗方案进行住院治疗；治疗组在常规治疗基础上，给予叶酸，按照1天3次，每次10mg的量进行给药。

1.3 检测方法 各组患者采用高效液相色谱法测定受检者血浆Hcy水平。采用应用多聚酶链反应-限制性内切酶片段长度多态性技术（PCR-RFLP）检测基因表型。Hcy浓度高于

15μmol/L时评定为高Hcy血症[6]。采用免疫组化法对血清中的VitB12以及叶酸进行检测。

1.4 统计学方法 所有数据均使用SPSS19.0统计学软件包进行统计学分析，计量资料采用“x±s”表示，组间比较采用t检验；计数资料用例数（n）表示，计数资料组间率（%）的比较采用χ2检验。P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 3组血浆Hcy、叶酸、Vit B12浓度对比 AMI病例组血浆Hcy浓度水平明显高于其余2组，差异具有统计学意义（P＜0.05）；病例组患者的维生素B12以及叶酸浓度水平显著低于其余2组（P＜0.05）；叶酸以及维生素B12与Hcy浓度水平之间呈负相关性。见表2。

表2 3组血浆Hcy、叶酸、VitB12浓度对比（x±s）

2.2 3组基因多态性分析 AMI2组患者的MTHFR基因TT纯合子组的血浆Hcy水平与CT杂合子和CC纯合子相比明显增高（P＜0.05）。见表3。与健康对照组相比AMI2组TT纯合子的分布频率明显增高；并且AMI2组的T等位基因频率明显增高（P＜0.05）。见表4。

表3 3组基因型及等位基因频率分布对比[n（%）]

表4 MTHFR各基因型与血浆Hcy水平相关性比较（x±s，μmol/L）

3 讨论

血浆中Hcy浓度水平升高是造成AMI的一个风险因子，本次研究结果中，Hcy血浆浓度水平与叶酸、维生素B12水平呈现出负相关性，通过对AMI患者给予叶酸补充后发现，患者血浆中Hcy以及叶酸水平得到了明显的控制，叶酸升高的同时对Hcy也得到了有效的抑制。同时发现，AMI患者血浆中Hcy浓度水平升高与MTHFR可能存在密切的相关性，因此推断MTHFR基因中667位点的突变可能是与AMI易感性有着一定的联系。

Hcy是一种由蛋氨酸经过脱甲基后形成的含有硫的氨基酸，在人体中存在有三种Hcy代谢途径[7-8]：(1)胱硫醚-β-合成酶在维生素B12作为辅酶因子的做用，与丝氨酸经过缩合形成胱硫醚以及水，Hcy则在γ-胱硫醚酶的催化作用的效果下分解成为半胱氨酸以及α-丁酮酸；（2）MTHFR与维生素B12共同作用下，通过甲基化转化成为甲硫氨酸；（3）由甜菜碱提供所需的甲基，并在甜菜碱-Hcy甲基转移酶的催化作用下使Hcy合成成为蛋氨酸。在正常的机体状态下，Hcy血浆浓度水平较低，一旦机体中维生素B12、叶酸缺乏，或出现先天性的上述酶缺乏时，血浆中Hcy浓度便会增高，出现高Hcy血症。

染色体的1p36.3位点为人类MTHFR基因的基因位点，基因全长为1980bp，其有较高的多态性[9]。通过研究发现MTHFR基因中的第四个外显子的第677位点上的碱基较为容易发生C和T的突变。此位点的突变会造成MTHFR酶活性的显著降低[10]，进而导致血浆中Hcy大量聚集，诱发Hcy血症[11]。本次研究发现，叶酸可以显著的调节AMI患者血浆中Hcy浓度水平，同时通过基因多态性研究发现，MTHFR基因C677T位点发生T突变是造成AMI易感性的关键性基因突变。

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10.3969/j.issn.1009-4393.2016.22.022

江西 320006 江西省人民医院二部心内一科 （章志玲 张明）江西省心血管病研究所（张淑华）