鸡源产ESBL大肠杆菌耐药特点分析

姚淑红　（山东省泰安市岱岳区畜牧兽医局　271000）

试验研究

鸡源产ESBL大肠杆菌耐药特点分析

姚淑红（山东省泰安市岱岳区畜牧兽医局271000）

为了解鸡源产ESBL大肠杆菌耐药特点，本研究2016年1～3月份采集山东省泰安市两个养鸡场鸡粪便棉拭子，分离并鉴定鸡源产ESBL大肠杆菌，纸片扩散法对16种抗生素进行药敏检测。本研究在69份鸡粪便棉拭子中，分离到60株大肠杆菌，获得46株产ESBL大肠杆菌（占77%）。所有产ESBL大肠杆菌菌株均呈现多重耐药，但碳青霉烯类药物敏感率较高。结果显示，鸡源产ESBL 大肠杆菌分离率高，呈现耐药谱广。

ESBL大肠杆菌耐药性

大肠杆菌不仅是人和动物的肠道正常菌群，并且也是临床感染中最常见的病原菌之一。大肠杆菌病对鸡的危害表现在造具体主要表现为气曩病、败血病、腹膜炎等［1］。在兽医临床上，大肠杆菌造成的危害十分严重，他一年四季均可致病，鸡的发病率为10%～69%，给养禽业造成严重的经济损失。

随着抗生素的大量使用，产超广谱β-内酰胺酶（ESBL）的耐药菌株越来越流行，成为一个严重影响人类和动物健康的安全问题。由于抗生素的持续且不恰当的使用，导致大肠杆菌耐药株不断增多，耐药机制不断变迁，特别是大肠杆菌多重耐药株的大量出现，使人医与兽医临床大肠杆菌病的治疗变得十分困难［2］。因此，明确鸡源大肠杆菌株的耐药谱，对临床上合理利用抗菌药物、增强抗感染治疗效果意义重大。

1　材料与方法

1.1样品采集在2016年1～3月份，以泰安地区新泰、肥城两鸡场采样地点，每只鸡采集一个肛门棉拭子。新泰鸡场23日龄为19株，30日龄为33株；肥城鸡场为15株。

1.2大肠杆菌的分离鉴定（1）粪便的溶解稀释：在粪便棉拭子的离心管中加入500μl的生理盐水，摇匀备用；（2）三线法涂于伊红美蓝培养基（EMB）上，选择绿色金属光泽的单个菌落，初步筛选大肠杆菌；（3）麦康凯琼脂培养基再次分离纯化；（4）生化鉴定。

1.3产ESBL大肠杆菌确证［3］将鉴定的大肠杆菌菌液均匀涂布于MH琼脂平板，贴头孢他啶（CAZ）与头孢他啶/棒酸（CAZ/Clav），头孢噻肟（CTX）与头孢噻肟/棒酸（CTX/Clav）两组纸片，37℃培养12～18h，如两组中任一组加棒酸比不加棒酸抑菌圈直径≥5mm，可确认为产ESBL菌株。将确证产ESBL大肠杆菌甘油保存-70℃备用。大肠杆菌ATCC25922为对照。

1.4药敏检测［3］14药敏纸片：复方新诺明（SXT）、氨苄西林（AMP）、氯霉素（C）、链霉素（S）、卡那霉素（K）、庆大霉素（CN）、环丙沙星（CIP）、氟苯尼考（FFC）、阿莫西林（AML）、头孢噻吩（KF）、诺氟沙星（NOR）、氨曲南（AZT）、四环素（TE）、萘啶酸（NA）、亚胺培南（IMP）、美罗培南（MEC）。将菌液涂于MH培养基上，14个药敏纸片贴于培养基上，37℃培养12～18h。

2　结果

2.1产ESBL大肠杆菌的分离结果分离大肠杆菌为60株，分离率为87%；分离率出产ESBL大肠杆菌为46株，分离率为77%（见附表）。

附表　产ESBL大肠杆菌的分离结果

2.2产ESBL大肠杆菌的药敏表型46株产ESBL大肠杆菌均呈现多重耐药。对SXT、AMP、C、S、K、CN、CIP、FFC、AML、KF、NOR、AZT、TE、NA的耐药性非常强，但对碳青霉烯类的IMP、MEC敏感度达100%（见附图）。

附图　产ESBL大肠杆菌的药敏结果

3　讨论

（1）本研究中鸡源产ESBL 大肠杆菌分离率高且呈现耐药谱广。一旦大肠杆菌作为条件性致病菌引起鸡群感染和发病时，很可能会由于耐药问题给治疗带来困难，最终给生产带来的经济损失。（2）本研究中在两个泰安两个鸡场中分离到60株大肠杆菌，其中产ESBL大肠杆菌为46株，分离率为77%，分离。鸡源产ESBL大肠杆菌菌株的药敏表型结果表明，呈多重耐药的特点，耐药谱广，耐药情况非常严重，多重耐药现象不断恶化。但幸运地一点是对碳青霉烯类的亚胺培南和美罗培南敏感度达100%。（3）由于抗生素的大量、持续且不恰当的使用，导致大肠杆菌耐药株不断增多，特别是多重耐药株的大量出现，使人医与兽医临床大肠杆菌病的治疗变得十分困难［4］。

［1］ 挥时锋， 潘震寰， 郑明球. 鸡大肠杆菌病研究进展［J］. 畜牧与兽医. 1998， 30（6）∶ 227-230.

［2］ Tekiner H， Ozpinar H. Occurrence and characteristics of extended spectrum beta-lactamases-producing Enterobacteriaceae from foods of animal origin ［J］. Braz J Microbiol. 2016， 47（2）∶ 444-51.

［3］ Clinical and Laboratory Standards Institute Performance standards for antimicrobial susceptibility testing. 21st informational supplement，document M100-S21s. Wayne， PA， USA. 2011.

［4］ Pohjola L， Nykäsenoja S， Kivistö R， et al. Zoonotic Public Health Hazards in Backyard Chickens［J］. Zoonoses Public Health. 2016， 11.

S852.61+2

A

1007-1733（2016）10-0001-02

2016-06-06）