Cellectis：基因疗法量产化

王众

CAR-T给无数的病患带来了生的希望，UCART的通用性有利于CAR-T治疗的标准化和平民化。

成立于1999年的Cellectis是一家以细胞免疫疗法为技术手段的法国公司，拥有同种异源的CAR-T（Chimeric Antigen Receptor T-CellImmunotherapy，嵌合抗原受体T细胞免疫疗法）技术平台。该平台可以改造单个供体的T细胞，并用于多个不同的患者。Cellectis让细胞疗法的适用性得以扩展到一个人群，而不仅仅局限于单个个体，从而能够实现工业化大规模生产，成为CAR-T领域的一匹黑马。2014年，Cellectis和制药巨头辉瑞达成了关于CAR-T疗法的合作协议。2015年，Cellectis上市成功，市值10亿美元。

基因抗癌界的网红

这个不明觉厉的CAR-T技术是近几年基因抗癌界的网红。这种免疫疗法通过特异性修饰的T细胞，高效识别肿瘤细胞，能在治疗肿瘤的同时避免了对正常组织的损伤。要建立治疗性的CAR-T细胞，需要通过分离患者体内的T细胞并在体外进行特定肿瘤抗体的修饰，经过扩增后再回输至患者体内，整个过程耗时约两周。可以看出，这是一个定制型疗法，目前的战绩十分辉煌。

CAR-T治疗的临床研究始于2010年，当时CAR-T的发明人、宾夕法尼亚大学教授CarlH.June利用CAR-T治疗成功缓解了三位淋巴细胞白血病患者，其中有两位患者维持了健康的状态，没有复发的迹象。2012年，身患急性淋巴细胞白血病的7岁小姑娘Emily Whitehead成为第一个接受CAR-T治疗的儿童，当时CAR-T治疗技术尚处于临床Ⅰ期。

2015年11月Waseem Qasia教授结合基因编辑与CAR-T技术，成功挽救了1岁小姑娘Layla的生命。在这次治疗过程中，Qasia使用的T细胞株来自于Cellectis。这就引出了这个疗法的另一个关键词——T细胞株。

这个细胞株是在体外培养后植入患者体内的。当外源的物质进入人体之后，通常会激发人体强烈的排异反应，最容易理解的例子是器官移植。T细胞株也是外来物质，也很可能激发人体的排异反应。所以在CAR-T免疫治疗中，最好的办法是收集患者自身的免疫细胞，体外改造后再输回患者体内，这样做基本可以避免排异反应。CAR-T疗法的先驱诺华公司采用的就是个性化CAR-T免疫治疗。但是，与个性化伴生的是高额的成本。

Cellectis公司的首席执行官AndréChoulika认为，个性化与高成本无疑阻碍工业化生产，也就相应地阻碍了疗法的推广。值得庆幸的是，Cellectis成功破解了这个难题，也实现了弯道超车、后来居上。

基因疗法也能量产

Cellectis的做法是用Talen基因编辑技术“关闭”导致人体排异反应的基因，将CAR-T制成UCART（通用型CAR-T）。由于关闭了与CAR-T的排异相关的基因，理论上，Cellectis的T细胞株可以输入到同类疾病的所有患者体内，不需要做配型。

Cellectis公司的执行副总裁David Sourdive在声明中说：“以往的细胞疗法都属于自体移植范畴。基于Talen的基因编辑方法，使得细胞疗法的适用性得以扩展到一个人群，而不仅仅局限于单个个体，从而能够实现工业化大规模生产。”工业化生产让Cellectis公司有信心获得90%的毛利润。

不过，这并不是说，UCART本身是抗癌良药，事实上，它是一招缓兵之计。回到Layla的案例。Layla所患的急性淋巴细胞性白血病，其主要特征为，免疫淋巴细胞在骨髓内异常增生，导致人体造血功能紊乱，以及大量器官被侵犯。

医生发现，在异常增殖的免疫淋巴细胞（也就是癌细胞）表面有CD19蛋白，这个蛋白可以被CAR19蛋白识别，但是Layla的体内没有携带CAR19蛋白的合适供体。UCART19细胞（有CAR19蛋白），尽管不是合适的配型，但成为了Layla唯一的希望。

Qasim利用ZFNs基因编辑技术“关闭”了导致排异反应的关键基因，将UCART19安全输入Layla体内。UCART19将Layla体内恶性增殖细胞消灭干净，让Layla能接受新一轮骨髓移植（此时有没有CAR19蛋白已经不重要了），目前恢复良好。当然，是不是完全康复，还需要时间的考验。

从目前的临床试验结果来看，即使是已经获得FDA“突破性”称号的诺华CTL019，尽管治疗结束后，患者的完全缓解率较高，但是在1年时间之内会有1/4左右的患者出现复发的现象。

CAR-T的局限

另外，尽管CAR-T的格局是抗癌，但目前的局限性和风险性也是不容忽视的。

首先，该技术的治疗主要集中在血液癌症。对付血液癌症，只需要干掉血液中的癌细胞；但实体肿瘤是长在固定组织或者器官上的肿块，治疗难度要大得多。而且目前大多数的CAR-T针对的是CD19这个抗原，CD19只作用在B淋巴细胞上，所以它能够杀死B淋巴细胞衍生出的急性淋巴细胞白血病和非霍奇金淋巴瘤。如果患者的白血病细胞因为基因的突变没有生成CD19抗原，也是无效的。

另外，由于CAR-T见效过快，会产生一种严重的副作用，叫做细胞因子风暴（也称“细胞因子释放综合症”），病症表现为高热。当T细胞在杀死白血病细胞时，会释放很多蛋白，叫作细胞因子，它们的作用是激活更多的免疫细胞来一起对抗这些病原体，就是我们日常熟悉的炎症反应。

但是，由于CAR-T细胞过于高效，能够瞬间在局部产生超大量的细胞因子，引起惊人的免疫反应，可能产生的症状有发热、心动过速、低血压、毛细血管渗透综合症，以及呼吸系统症状。这些副作用对于身体机能已经衰弱的癌症患者来说，是非常危险的。

尽管如此，CAR-T，尤其是Cellectis的UCART仍然给无数的病患带来了生的希望，UCART的通用性，更有利于CAR-T治疗的标准化和平民化。