2型糖尿病患者血清抵抗素水平与血糖及炎症因子的相关性研究

段雨函，李宗清

（湖北省恩施土家族苗族自治州中心医院临床检验中心，湖北恩施445000）

2型糖尿病患者血清抵抗素水平与血糖及炎症因子的相关性研究

段雨函，李宗清

（湖北省恩施土家族苗族自治州中心医院临床检验中心，湖北恩施445000）

目的 分析2型糖尿病（DM）患者血清抵抗素与血糖及炎症因子水平的关系。方法 选取本院住院部和门诊于2014年8月至2015年8月收治的患有2型DM的患者作为研究对象，将其分为4组，分别为未采用任何降糖措施的初诊2型DM患者为A组（n=32）；血糖已得到控制的2型DM患者为B组（n=28），呼吸道感染的患者为C组（n=24）及健康受试者为D组（n=25），采用酶联免疫分析法对其空腹时血清抵抗素、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）和白细胞介素-6（IL-6）水平进行测定，并监测空腹时的胰岛素、血糖和体重指数（BMI）及其C反应蛋白（CRP）水平。结果 A组患者的胰岛素、血清抵抗素、各种炎症因子及血糖含量均明显高于D组（P＜0.01），而B组患者的抵抗素和IL-6含量与D组受试者不具有显著性差异；C组患者的血清抵抗素和各种炎症因子水平均明显高于其余各组（P＜0.05）。经相关分析，抵抗素水平与患者性别、BMI及胰岛素水平等均不相关，但与空腹血糖及炎症因子IL-6、TNF-α和CRP均呈显著的正相关性，而与TC呈显著的负相关性。结论2型DM患者空腹时的血清抵抗素水平明显升高，且与其血糖水平相关，并可受炎症因子的影响，但与肥胖的相关性不显著。

2型糖尿病； 血清抵抗素； 血糖； 炎症因子； 相关性

2型糖尿病（DM）的发病原因和机制还未完全明晰，患者常常表现为高胰岛素血症或胰岛素抵抗（IR），有研究报道称脂肪组织与其IR及糖耐量破坏相关［1］，脂肪组织的主要作用是储存能量，还可分泌抵抗素（resistin）及炎性因子，其中炎性细胞因子主要包括白细胞介素-6（IL-6）和肿瘤坏死因子-α（TNF-α）等［2-3］，对机体能量代谢的调节及胰岛素抵抗过程均具有重要的作用。抵抗素是由Steppan等于2001年发现小鼠脂肪细胞可分泌一种多肽类的物质，这种物质可对脂肪细胞胰岛素对葡萄糖摄取刺激的直接抑制作用而被推测可能与肥胖及2型糖尿病的发病有关［4-5］，该结论主要是基于动物实验或危险人群的研究指标进行评估所得，对于2型DM患者的治疗及多重发病机制的研究还未进行综合分析［6］。本次研究选取本院收治的2型DM患者作为研究对象，分析血清中抵抗素水平与2型DM患者血糖及炎性细胞因子的相关性，取得了较好的研究结果。

材料和方法

1 一般资料

本次研究选取本院住院部和门诊于2014年8月至2015年8月收治的患有2型DM的患者作为研究对象，将其依据如下标准进行分组，未采用任何降糖措施的初诊2型DM患者为A组（n=32）；血糖已得到控制的2型DM患者为B组（n=28），该组患者通过口服降糖药物对血糖进行控制且已正常（HbA1C＜7%），不伴有糖尿病并发症或其他急、慢性疾病；患有气管炎、支气管炎及肺炎等呼吸道感染的患者为C组（n=24），该组患者的临床感染体征为：C反应蛋白（CRP）＞50 mg/L，白细胞（WBC）＞10 000/ μL；糖耐量正常且无糖尿病家族史的健康受试者为D组（n=25）。所有入选的研究对象年龄分布为50～70岁，无心、肝、肾等功能性异常。

2 方法

本次研究所有受试者均隔夜空腹大于8h以上，由同一名医师对其仅穿内衣的身高及体重进行测定，并分别精确到0.1cm和0.1kg，计算其体质量指数（BMI），同时测定其空腹时的总胆固醇（TC）、血糖（FPG）及甘油三酯（TG），分别采用相应的ELISA试剂盒（购自上海长征医学有限公司）和全自动生化分析仪（型号为：7150型，购自日立公司）进行测定。而对于抵抗素、胰岛素及炎症因子水平的测定则需抽取其空腹时的血浆进行，采血后2h，采用2000r/min进行离心，10min后取出血清并置于-70℃冰箱中保存待用。

3 护理措施

①对其病情进行密切关注：监测其低血糖反应特别是症状不典型的低血糖患者需提高识别的能力，而对于老年患者及并发症较多的患者，需增加血糖监测次数，分析其病情动态变化［7］。②加强宣教工作：由护理工作人员向患者及家属宣讲低血糖的主要临床表现及其处理措施，使其有充分的识别判断能力和心理准备，能及时采取自救措施。③合理饮食：根据患者的体质量指数和劳动强度，计算其每日所需总能量。并指导患者对其饮食要求充分了解，固定其每餐的食量，同时需保持饮食量与药量的平衡。当患者进食较少或几乎不进食时，其药量应相应减少或暂停。其主食需控制在250g，如明显感觉饥饿者可食用西红柿或生黄瓜等。注射胰岛素后需按时进餐并根据其并发症发生情况制定不同的饮食。④胰岛素的选取：根据患者的实际临床表现选取正确的胰岛素剂型和剂量，并于餐前30min注射于皮下组织，采用多部位注射。如其进食量降低，活动量增加，且病情较稳定时，可遵循医嘱适当减少胰岛素用量。如患者餐后运动应避免将胰岛素注射到四肢以防加速其吸收［8］。⑤外出注意事项：胰岛素强化治疗如外出一定要携带必要的食物及水。并携带患者卡，填写患者的姓名、疾病状况、所用药物的名称及剂量、家属联系方式等，当其出现低血糖反应时，需给予及时帮助。⑥合理运动：选择有氧运动，如跳绳、慢跑、快走、骑车、跳舞或登山等。运动强度需注意，当明显感觉周身发热出汗即可，不可剧烈运动，且运动后不感觉劳累。餐后1h运动最宜，此时不易导致低血糖的发生。运动过程中如出现各种不适需立即停止［9］。

4 指标监测

血清抵抗素：对于血清抵抗素水平采用ELISA试剂盒（购自Phoenix Pharmaceuticals，Inc.美国）进行测定，均参照说明书的操作方法进行，该测定方法采用了兔抗人抵抗素片段（第51～第108个氨基酸）的多抗，同时以此片段作为标准品及标记抗原，该试剂盒的灵敏度为3.8μg/L，批间的CV＜14%，批内的CV＜5%。

胰岛素（FINS）：采用全自动酶放大免疫分析仪（型号为：IMMULITE，由美国DPC公司生产提供）进行测定。

IL-6浓度：本次研究采用ELISA试剂盒（由深圳晶美生物公司生产提供）对IL-6水平进行测定，该试剂盒的检测灵敏度为10 ng/L。

TNF-α浓度：本次研究采用ELISA试剂盒（由Bender MedSystems公司生产提供），该试剂盒的检测灵敏度为5.8 pg/L。

CRP：采用高敏CRP（hs-CRP）测试盒（液体双试剂，购自上海申索公司），应用乳胶凝集反应进行测定，该测试盒的线性范围为0.1～350 mg/L，CV＜8.2%。该法的灵敏度优于普通浊度法。

5 统计学处理

本次研究所有数据均采用统计学软件SPSS 17.0进行统计学分析，其中计量资料采用（±s）表示，组间比较采用t检验；而计数资料采用百分率（%）表示，组间比较采用χ2检验，多组间比较采用方差分析，以Pearson相关系数对变量间的相关性进行评价，以P＜0.05定为结果具有显著性差异。

结果

1 四组受试者的一般资料比较

本次研究四组研究对象从性别及年龄分布方面等经统计分析，均不具有显著性差异（P＞0.05）。其中2型DM患者的BMI和TC均明显高于C组和D组，经统计分析，具有显著性差异（P＜0.05）；四组受试者在TG方面经统计分析，具有显著性差异（P＜0.05），且A组患者含量最高；三组受试者在FINS方面经统计分析，不具有显著性差异（P＞0.05），但均明显高于D组（P＜0.05）；A组患者的FPG明显高于其余三组，经统计分析，具有显著性差异（P＜0.05），而B组和C租患者明显高于D组，经统计分析，具有显著性差异（P＜0.05）。具体见表1。

表1　四组受试者的一般资料比较（±s）

表1　四组受试者的一般资料比较（±s）

组别例数（男/女）年龄（岁）BMI（kg/m2）TC（mmol/L）TG（mmol/L）FPG（mmol/L）A组32（18/14）62.6±6.224.9±1.64.33±0.761.25±0.434.63±0.68 B组28（15/13）64.5±6.423.9±2.53.95±0.821.56±0.426.35±0.79 C组24（13/11）64.3±5.826.6±1.94.91±0.991.95±0.526.84±0.84 D组25（13/12）62.3±6.527.6±2.35.62±0.792.38±0.588.97±1.79

2 四组受试者的血清抵抗素水平比较

A组患者的血清抵抗素含量明显高于B组和D组，但明显低于 C组，经统计分析，具有显著性差异（P＜0.05）；而B组患者与B组经统计分析，不具有显著性差异（P＞0.05），具体见表2。

3 四组受试者的各种血清炎症因子水平比较

C组患者的3种炎症因子均明显高于其余各组，经统计分析，具有显著性差异（P＜0.05），其中A组患者的IL-6含量明显高于B组和C组，经统计分析，具有显著性差异（P＜0.05）；而C组和D组间经统计分析，不具有显著性差异（P＞0.05），TNF和CRP含量与上述情况类似，但B组明显高于D组，经统计分析，具有显著性差异（P＜0.05）。具体见表2。

表2　四组受试者的血清抵抗素和炎症因子比较（±s）

表2　四组受试者的血清抵抗素和炎症因子比较（±s）

组别例数抵抗素（μg/L）FINS（mU/L）IL-6（ng/L）TNF-α（pg/L）CRP（mg/L）A组3221.9±4.66.23±2.325.4±2.55.34±1.530.85±0.24 B组2862.5±11.78.53±2.4545.5±16.417.21±1.8187.51±9.61 C组2422.2±5.18.93±2.485.5±2.36.92±1.983.93±1.28 D组2539.2±9.59.47±2.5215.3±5.115.57±2.117.9±2.14

4 各因子间的相关性分析

本次研究中，2型DM患者，其血清抵抗素水平与其TG水平、年龄、胰岛素水平及BMI均无明显的相关性，而与TC含量呈显著的负相关（r=-0.20，P＜0.05），而与FPG（r=0.49）、TNF（r=0.53）、IL-6（r=0.42）及CRP（r=0.69）均呈显著的正相关（P＜0.05）。

讨论

人体抵抗素由108个氨基酸组成，通常情况下二聚体形式存在的一种小分子蛋白质。患者体内给予注射重组抵抗素时可降低胰岛素对脂肪细胞摄取葡萄糖的诱导作用，而注射抵抗素抗体则可增加胰岛素的敏感性，使其血糖含量得以恢复［10］。抵抗素对胰岛素的抵抗作用是否可以作为2型DM与肥胖关系的相关机制还有待研究，其在脂肪细胞中的表达程度并不高甚至在部分2型DM患者体内表达较低，所以有必要对抵抗素的调控机制作进一步分析［11］。本次研究从肥胖、血糖水平及炎症因子等方面进行相关性分析，探讨抵抗素在2型DM中的作用。结果表明，与健康受试者和经过治疗血糖恢复的2型DM患者相比，未采取降糖治疗措施的初诊2型DM患者抵抗素水平较高，且与血糖水平呈显著的相关性，而与胰岛素的含量相关性不明显。除此之外，经过治疗的患者其血糖水平得到有效控制后，其血清中的抵抗素水平随之减少，进一步表明高血糖症对抵抗素水平可具有一定的影响作用，但胰岛素的调节却相对较弱。

近年来，有研究表明，抵抗素主要在单核细胞中表达，在脂肪细胞中的表达量极低，几乎检测不到［12］。有专家通过采用脂多糖（LPS）进行炎症诱导时发现，患者的抵抗素mRNA的表达量明显上升；而单核细胞作为机体炎症反应的介导因子之一，可参与2型DM的炎症发病过程，其与抵抗素的相关性需作进一步考察，因此本次研究将呼吸道感染的患者作为对照［13-15］。本次研究结果显示，与健康受试者相比，2型DM患者的TNF-α、IL-6和CRP等炎症因子和抵抗素水平均明显升高，由此可见，炎症反应对患者的血清抵抗素水平具有一定影响，但其能否作为抵抗素表达的调节因素还需进行深入研究。综上所述，2型DM患者主要以炎症反应为基础而发病时，其抵抗素水平可能参与胰岛素的抵抗作用，对2型DM的发生进行诱导，但其与肥胖的直接关系却不明显。

有学者通过研究发现，抵抗素、IL-6和TNF-α之间具有高度的正相关性，表明在促进IR形成的过程中脂肪细胞因子通过相互影响从不同的层次、不同的环节来对胰岛素的生理活性进行干扰，进而诱发了IR［16-18］。所以2型DM的形成是由多方面的因素和多个步骤共同作用的过程，通过进一步探讨抵抗素与炎性细胞因子的生理机制而对糖尿病和IR的发病作进一步解释，为治疗IR的新药的研发提供了新的思路，对DM及其相关的疾病防治具有重要的临床意义。

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（潘子昂编辑）

Type 2 Diabetes Mellitus and Correlations Between Blood Glucose with Serum Resistin Level，and Inflammatory Factors

DUAN Yu-han，LI Zong-qing
（Clinical Laboratory Center of Central Hospital of Enshi Tujia and Miao Autonomous Prefecture，Hubei Province，Enshi 445000，China）

Objective To analyze the relationships between blood glucose and serum resistin and inflammatory factor level in type 2 diabetes mellitus（DM）patients.Methods Samples were selected from our hospital inpatient and outpatient from August 2014 years to August 2015.A total of 84 patients were divided into 4 groups，patients without using any hypoglycemic action in newly diagnosed type 2 diabetic patients as group A（n=32）；blood glucose controled of type 2 DM patients in group B（n=28）and with respiratory tract infection patients in group C（n=24）.Healthy subjects（n=25）were also included in the study.Fasting serum resistin，tumor necrosis factor alpha（TNF alpha），leukocyte interleukin 6（IL-6）were measured by enzyme linked immunosorbent assay.Fasting insulin，blood glucose，body mass index（BMI）and C-reactive protein（CRP）were also monitored.Results In group A who were treated with insulin，serum resistin，inflammatory factor and blood sugar levels were significantly higher than those in group D（P＜0.01）；resistin and IL-6 content showed no differneces between group B and group D；in group C，patients serum resistin and inflammatory factor were significantly higher than those in other groups（P＜0.05）.Based on correlation analysis，resistin levels were not related to gender，BMI and insulin；but fasting blood glucose，showed significant positive correlation with inflammatory cytokines IL-6，TNF-and CRP.Conclusion In patients with type 2 diabetes，significantly increased fasting serum resistin levels might be closely related to concentration of blood glucose which might be influenced by the inflammatory factors.

Type 2 diabetes； Resistin； Glucose； Inflammatory factor； Correlation

10.11748/bjmy.issn.1006-1703.2016.09.021

2015-11-03；

2015-12-10

段雨函（1978—），女，硕士，主管技师，研究方向：糖尿病生化检验。Tel：18971891008

李宗清（1968—），男，硕士，主任技师，研究方向：糖尿病生化检验。Tel：13971884857